Химические методы расщепления

Селективные химические методы расщепления пептидных свя.эей 273 [c.7]

СЕЛЕКТИВНЫЕ ХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ РАСЩЕПЛЕНИЯ ПЕПТИДНЫХ СВЯЗЕЙ [c.273]

Совокупность современных методов исследования строения олигосахаридов позволяет делать надежные заключения о строении большинства соединений этого класса. Тем не менее анализ структур некоторых сложных олигосахаридов в настоящее время представляет весьма трудоемкую, а в некоторых случаях практически неразрешимую задачу. По-видимому, ключом к решению этой проблемы является развитие специфических химических методов расщепления олигосахаридных цепей, что позволило бы [c.454]

В настоящее время разделение рацематов а-аминокислот осуществляют в промышленном масштабе. Для этого широко используют хроматографическое разделение на носителях с хи-ральными группами с помощью закрепленных (обычно говорят иммобилизованных) на носителях ферментов, а также методы селективной кристаллизации. Помимо этого достаточно часто применяют химические методы расщепления рацематов (см. разд. 8.1.2). [c.453]

Наряду с ферментативными методами в практику белковой химии широко вошли химические методы расщепления по аминокислотным остаткам определенного типа. Среди них важнейшим является расщепление с помощью бромциана, которое проходит по остаткам метионина по схеме [c.270]

Методы, принятые для определения последовательности аминокислот в белках, широко используют ферментативную деструкцию и последующее изучение осколочных полипептидных цепей небольшого размера и перекрывающегося строения, выделяемых и характеризуемых после проведения процесса деструкции. Тем не менее сохраняется необходимость в разработке избирательных и количественных химических методов расщепления основной цепи макромолекул белков. В последние годы было найдено несколько химических методов расщепления пептидных связей но остаткам метионина, триптофана, гистидина и тирозина. Многие из этих методов очень специфичны, причем расщепление протекает в таких местах молекулы белка, которые недоступны действию ферментов. Эти химические методы могут найти применение для специфического расщепления одной, двух или трех пептидных связей молекулы белка — соседних с аминокислотными остатками, встречающимися в молекуле один, два или три раза соответственно. [c.387]

В настоящее время известен ряд химических методов расщепления пептидных связей по остаткам отдельных аминокислот. Возможность практического применения реагента или метода определяется главным образом специфичностью и полнотой реакции. В настоящей главе детально рассмотрены те методы, которые в прошлом и, по-видимому, в будущем нашли и будут находить практическое применение именно потому, что наиболее полно удовлетворяют этим двум требованиям. [c.128]

Вместе с тем ни один метод не дает возможности получить идеальный набор фрагментов, достаточный для реконструкции полной аминокислотной последовательности. Для достижения этой цели необходимо оптимальное сочетание химических и ферментативных методов. Химические методы расщепления пептидной связи находят применение в области химии пептидов. Методы химической модификации могут применяться при синтезе биологически активных пептидов методом рекомбинантных ДНК. [c.128]

Особенности методов расщепления при определении дисульфидных связей рассмотрены в настоящей главе, относительно гидролиза протеазами см. гл. 3 и 10, относительно химических методов расщепления см. гл. 1 и 2. [c.170]

Другие химические методы расщепление [c.506]

Из химических методов расщепления Б. наиболее специфичный и чаще всего применяемый-бромциановое расщепление по остаткам метионина (выход 90-100%) [c.251]

Методы выделения, очистки и аналитические характеристики пептидов описаны подробно в разд. 3.3. Изучение связи между строением и биологической функцией пептидов ведет к познаванию молекулярного механизма их действия. При этом главное внимание обращается на выяснение активного центра и определение аминокислотной последовательности, которая ответственна за рецепторное связывание, транспорт и иммунологическое поведение. Большой практический интерес имеет также модификация природных пептидов для пролонгирования их действия и расширения практического применения. Такого рода исследования можно проводить только тогда, когда соответствующий природный пептид имеется в достаточном количестве. Необходимые для изучения пептиды можно получать путем частичного ферментативного расщепления экзопептидазами или эндопептидазами или же с помощью специфических химических методов расщепления (бромцианом или Ы-бромсукцинимидом) можно также использовать замещение, элиминирование или превращение функциональных групп соответствующих пептидов. Возможности модификации природных пептидов ограничены тем, что часто исследователь располагает лишь нанограммо-выми количествами этих веществ. [c.90]

Химические методы расщепления. Среди химических методов фрагментации белков наиболее специфичным и чаще всего применяемым является расщепление бромциаиом по остаткам метионина. Метод разработан в 1961 г. Э. Гроссом и Б. Виткопом и по избирательности действия не имеет себе равных. [c.48]

Одним из главных препятствий при структурном изучении интегральных белков биологических мембран является нх низкая растворимость. Мембранные белки практически нерастворимы в водных буферных системах, и это фактически исключает использование протеолитических ферментов в традиционной форме. В процессе работы по установлению полной аминокислотной последовательности бактериородопсина применялись в основном химические методы расщепления полипептидной цепи, и обрАовавшиеся фрагменты разделялись на биогелях, уравновешенных концентрированным раствором муравьиной кислоты. [c.607]

Соотношение между конфигурациями двух соединений может быть установлено чисто химическими методами—-расщеплением или синтезом, не затрагивающим асимметрического центра, замыканием. цикла между заместителями в циклических соединениях или реакцией замещения, затрагивающей асимметрический центр, но являющейся стереоспецифичной. В ряде случаев необходимые сведения могут быть получены изучением кинетики реакции замещения у асимметрического центра или осуществлением частичного асимметрического синтеза. Иногда могут применяться и чисто физические методы-определение молекулярного вращения, обнаружение квазирацемических соединений по кривым плавления, а также рентгенография и электронная диффракция. Для многих биологически важных соединений могут оказаться полезными энзиматические методы. [c.167]

Реакции гидролиза фосфомоноэфирных связей, хорошо изученные для разнообразных моноэфиров фосфорной, кислоты, в том числе и природных , в ряду производных нуклеиновых кислот исследованы относительно мало. Это связано прежде всего с тем, что существуют хорошо разработанные методы ферментативного дефосфорилирования мононуклеотидов и концевых нуклеотидных звеньев в олиго- и полинуклеотидах, в то время как химические методы расщепления фосфомоноэфирных связей в рассматриваемых соединениях далеки от совершенства. [c.542]

Витамин В12 изучался методом рентгено-структурного анализа, начатым Дороти Ходжкин в Оксфорде в 1948 г. Вычисления на основе результатов измерения отражения рентгеновых лучей позволили составить карты электронных плотностей в трех измерениях. Постепенно в несколько этапов, сочетая химические методы расщепления с синтезом отдельных фрагментов молекулы, определялось положение все большего числа атомов в структуре Вся программа работы с витамином В12 и его аналогами потребовала примерно около 10 млн. вычислений. На последнем этапе для этого пришлось использовать электронные вычислительные машины. [c.670]

Обобщающее сравнение химических и ферментативных методов расщепления рацематов провести довольно трудно. Обе группы методов в большинстве случаев позволяют достичь выходов, близких к теоретическим, т. е. когда выделенный й-энантиомер составляет по весу почти половину исходного материала. По-видимому, для простых соединений (би- и трициклических полупродуктов) более пригодны химические методы расщепления, тогда как для тетрациклических соединений более выгодными могут оказаться ферментативные методы. Существенное значение при этом имеет выбор стадии полного синтеза, на которой производится расщепление рацематов. Максимальная экономия материалов достигается в том случае, когда расщепление проводится на возможно более ранней стадии — во время введения первого устойчивого центра асимметрии или сразу же после этого (ср. стр. 12). Раннее расщепление имеет также то преимущество, что позволяет контролировать дальнейши ход синтеза с помощью совремеи- [c.72]

В работах Кочеткова и сотр., которые использовали различные химические методы расщепления биополимера и изучали продукты распада аналитической гель-фильтрацией, показано, что в основе молекулы группового вещества крови А лежит полипептидная цепь, несущая углеводные единицы, связанные с ней в основном 0-гликозидной связью через оксиаминокислоты. [Деревицкая В. А., Кара-Мурза С. Г., Кочетков Н. К., Химия природных соединений, 4, 223 (1966) Кочетков Н. К., Кара-Мурза С. Г..Деревицкая В. А., Изв. АН СССР, Сер. хим., 12, 2212 (1965) Д е р е в и ц к а я В. А., К а р а - М у р з а С. Г., Кочетков Н. К., ДАН СССР, 163, 650 (1965).]—Ярмл. ред. [c.178]

В основе химических методов расщепления лежит способность модифицированных химическим путем аминокислотных остатков активировать полипептидные связи прилегающих звеньев цепи [20, 21]. В химии белка многие годы используется расщепление по остаткам некоторых аминокислот. Приемлемый па практике способ избирательного химического раснюпления полипептидпых цепей должен удовлетворять двум требованиям обладать высокой избирательностью и обеспечивать высокий выход. В идеальном случае при расщеплении отделыюй пептидной связи не должно происходить побочных реакций. Однако на практике известные методы химического расщепления не лишены недостатков прежде всего к ним относятся низкий выход продуктов реакции и нежелательные побочные реакции. [c.82]

Могут быть использованы также химические методы расщепления полипептидной цепи обработка бромоцианом (по остаткам метионина) [9, 43, 50], муравьиной кислотой (по связям аспарагиновая кислота — пролин) [41, 58] или N-xлopo yк-цинимидом (по остаткам триптофана) [42]. В этих случаях кусочек геля с белком обрабатывается в пробирке реагентом, а затем образовавшаяся смесь фрагментов наносится для разделения на второй гель. Преимущество химических методов очевидно, когда исследуется небольшое количество немеченного белка и необходимо для проявления применять высокочувствительное окрашивание серебром, которому не мешает присутствие протеаз. [c.230]

В двухстадийной схеме анализа для получения крупных фрагментов белка используют либо химические методы расщепления (табл. 10.2) по таким сравнительно редко встречающимся в полипептидной цепи аминокислотам, как триптофан, метионин, цистеин, либо ограниченный протеолиз нативного белка [36, 40, 51, 52]. Повторная фрагментация каждого из образовавшихся крупных пептидов приводит к образованию значительно меньшего числа компонентов, чем в случае целой [c.344]

Таблица 10.2, Химические методы расщепления, применяемые в двустаднйной схеме анализа

Максам и Гильберт использовали для секвенирования меченные по 5 -концам радиоактивным фосфором одинарные нити денатурированных фрагментов ДНК [Махат, Gilbert, 1977]. Были разработаны химические методы расщепления полидезоксирибо-нуклеотидов по заранее известным нуклеотидам. Концентрации реагентов и условия гидролиза подобрали так, что подавляющее большинство индивидуальных нитей случайным образом разрывалось только в одном из множества возможных мест. Все эти места равноправны. В результате при каждом методе обработки огромного множества нитей получали полный набор всех возмож- [c.131]

Специфический химический метод расщепления по остаткам метионина основан на использовании бромциана (СЫВг) в кислой среде, например в 90%-ной муравьиной кислоте [c.181]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология