Актин, связывание ферментов

В ряде работ обсуждается возможный характер пространственной организации комплекса ферментов гликолиза. П. Фридрих предложил гипотетическую схему расположения ферментов в мембране эритроцитов (рис. 20). Идея схемы состоит в наложении последовательно расположенных ферментов центральной части гликолиза на пучок хвостов белка полосы 3, имеющих весьма специфичные участки для связывания каждого фермента. Схема учитывает также возможное участие белков цитоскелета (актина) в процессе связывания отдельных ферментов. [c.84]

По существу миозин является ферментом. При сокращении, когда актин скользит вдоль миозина, происходит взаимодействие актина с головками миозина это взаимодействие приводит к стократной (или более) активации актомиозиновой АТР азы. Следствием связывания актина с миозином является генерация напряжения, при этом источником энергии для осуществления механической работы служит гидролиз АТР. [c.64]

ТИПОВ фибрилл), а каждая мышечная клетка содержит несколько субклеточных органелл, получаемые средние значения концентраций являются весьма ориентировочными и не дают представления о тех концентрациях, которые характерны для цитоплазмы, где функционирует фосфорилаза. Далее, классическими методами можно определить только суммарную концентрацию метаболита, в то время как необходимо знать концентрацию свободного, т. е. доступного для ферментов, метаболита. Последняя может значительно отличаться от суммарной вследствие связывания метаболита со специфическими макромолекулами так, например, большая часть ADP в скелетной мышце связана с актином. [c.73]

Конформационная перестройка миозина сопровождается аллостери-ческим эффектом - смыканием длинной узкой щели, находящейся на границе между толстой и тонкой половинами грушевидной головки. Результатом становятся сближение актина с нуклеотидным центром миозина и высвобождение ADP и неорганического фосфата. В этом причина того, почему миозин представляет собой актин-зависимую АТРазу. Давно было замечено, что этапом, лимитирующим скорость каталитической реакции, является не связывание молекул АТР в активном центре и не собственно гидролиз, а освобождение продуктов ферментативной реакции, остающихся прочно связанными с миозином, что и препятствует началу следующего каталитического акта [442, 443]. АТРазная активность очищенного миозина невелика для гидролиза одной молекулы АТР ферменту требуется 30 с. В присутствии актина каждая молекула миозина способна гидролизовать от 5 до 10 молекул АТР в секунду. [c.128]

Гидролиз АТР во время мышечного сокращения-это прямой результат взаимодействия миозина с актином. Сам по себе миозин тоже обладает свойствами АТРазы, т.е. фермента, способного гидролизовать АТР однако АТРазная активность очищеннопо миозина невелика для гидролиза одной молекулы АТР молекуле фермента требуется около 30 с. Этапом, лимитирующим скорость реакции, является не связывание молекулы АТР и не собственно гидролиз (обе эти стадии протекают чрезвычайно быстро), а освобождение продуктов гидролиза-ADP и неорганического фосфата, которые остаются прочно связанными с миозином в нековалентный комплекс и препятствуют началу следующего каталитического акта. [c.81]

Установлено, что взаимодействие ЛДГ с F-актином и нативным тонким филаментом приводит к уменьшению каталитической активности фермента. При связывании с F-актином происходит увеличение значения константы Михаэлиса для NADH и уменьшение максимальной скорости реакции. Для свободной и связанной форм ЛДГ выполняется уравнение Михаэлиса — Мен-тен. Предполагают, что обратимое взаимодействие изофермента М ЛДГ с F-актином является специфическим и обусловлено образованием белок-белкового комплекса. [c.174]

При взаимодействии ЛДГ с тенями эритроцитов, обработанными тритоном Х-100, наблюдалось снижение каталитической активности ЛДГ, однако степень инактивации фермента была выше, чем в случае его ассоциации с препаратами нативных мембран. Так, связывание ЛДГ с эритроцитарными мембранами и их три-тоновыми тенями при pH 7,4 приводило к снижению ее активности на 25 и 82 % соответственно (рис. 50). При pH 9,0 каталитическая активность ЛДГ в присутствии нативных и тритоновых теней статистически достоверно не отличалась от таковой для свободного фермента. Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что ЛДГ эффективнее взаимодействует со спектрин-актино- [c.177]

Функции ряда белков установлены. Наибольшая фракция — полоса 3 — представлена интегральным белком гликопротеином с молекулярной массой 90 кДа, который взаимодействует с мембраной и одновременно обеспечивает транспорт ионов через бислой, а также связывание ряда цитоплазматических ферментов. Белок полосы 3 через анкерин (полоса 2,1) взаимодействует со спект-рином — основным белком цитоскелета, составляющим двумерную сеть, к которой прикрепляется актин. При электрофорезе актин выявляется в полосе 5. Белки полос 8, 9 и 10 относятся к семейству гликофоринов (см. рис. 23). [c.56]

Цитохалазин В-антибиотик, который часто используют как ингибитор клеточной подвижности, обеспечиваемой актином,-служит также мошным конкурентным ингибитором поглощения О-глюко-зы клетками млекопитающих. Когда тени эритроцитов инкубируют с цитохалазином В, меченным Н, а затем облучают ультрафиолетовым светом, происходит связывание цитохалазина с переносчиком глюкозы за счет поперечных сшивок. Если в среде имеется избыток О-глюкозы, то меченый цитохалазин не взаимодействует с переносчиком. Однако избыток в среде Ь-глюкозы (которая не переносится через мембрану) не влияет на связывание. Если мембранные белки из меченых теней разделить при помощи гель-электрофореза в полиакриламидном геле с ДСН, то переносчик выявляется в виде размытой радиоактивной полосы в диапазоне молекулярных масс от 45000 до 70000 Да. Если меченые тени до проведения электрофореза обработать ферментом, отщепляющим связанные сахара, то эта размытая полоса исчезает и вместо [c.56]

Миозин — единственный из имеющих отношение к актину белков, способный генерировать механическую силу. Производимая им за счет АТР механическая работа лежит в основе мышечного сокращения и обеспечивает, как полагают, натяжение, развиваемое фиброблас-тами и другими клетками при контакте с внеклеточным матриксом. Взаимодействие миозина с актином очень сложно — настолько, что ему была посвящена отдельная книга в этой серии. Миозин производит работу путем циклического взаимодействия с актином. Миозин-А1)Р связывается с актиновыми филаментами, происходит изменение конформации миозина, сопровождающееся освобождением АВР, и затем АТР, если он есть в растворе, замещает освободившийся из миозина АВР и индуцирует отсоединение актиновых нитей от миозина. После гидролиза АТР может начаться следующий цикл. Кальций регулирует этот процесс в нескольких точках. В некоторых мышечных клетках он взаимодействует с тропо-нином, контролируя связывание тропомиозина с актином. Про такие клетки говорят, что в них регуляция осуществляется на уровне тонких нитей. В других мышцах кальций действует на молекулу миозина — либо прямо, либо активируя ферменты, фосфорилирующие ее легкие цепи. [c.16]

Как ни просто устроены эритроциты млекопитающих, даже на их примере ясно видна необходимость учитывать многообразие возможных взаимосвязей между ци-тоскелетными белками. Спектрин может функционировать так, как описано выше, только потому, что на каждом его мономере имеются участки связывания по меньшей мере для четырех белков. На сеть, состоящую из актина и спектрина, существенное влияние оказывает присутствие компонента 4Л. Наконец, степень доступности компонента 3 может изменяться в результате его связывания с различными гликолитическими ферментами [49]. Таким образом, для большинства белков цитоскелета нужно постоянно иметь в виду возможность взаимодействия не с одним, а с несколькими другими белками. [c.35]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология