Окрашивание бактериальных

Несомненно, имеется много случаев использования закономерностей белковых реакций в биологических целях, однако здесь им не уделено большого внимания. В частности, в литературе, посвященной проблемам бактериологии, можно найти исследования по вопросам о влиянии этерификации карбоксильных групп белка на реакции окрашивания бактериальных клеток [16], о связи между химическим изменением поверхности бактерий и агглютинацией или электрофоретической подвижностью [17], об ингибировании ферментативного действия при помощи алкили-рующих веществ и о поисках мутагенных агентов. [c.271]

РЕЦЕПТЫ КРАСИТЕЛЕЙ И РЕАКТИВОВ, НЕОБХОДИМЫХ ДЛЯ ОКРАШИВАНИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ [c.339]

Высушенный фильтр подвергается сразу же окрашиванию. Обычно окрашивают весь фильтр, который в дальнейшем может быть разрезан на несколько частей, соответствующих величине покровного стекла. Для окрашивания применяют эритрозин в виде 1—2% водного йли карболового раствора. Эритрозин для микроскопии— кислая краска красного цвета, обладающая особым срод- ством к протоплазме. Она не окрашивает капсулы и бактериальную слизь. Эти качества эритрозина дают возможность дифференцировать бактериальные формы, включенные в слизистые скопления (зооглеи). Эритрозин окрашивает и коллоиды органического происхождения, однако после промывания препарата водой окраска их значительно ослабевает, чем отличается от окраски бактериальных форм, сохраняющих яркость. Минеральные частицы совсем не окрашиваются эритрозином. [c.178]

Окрашивание по Граму. Клеточная стенка, по-видимому, ответственна также за окрашивание по Граму. Способность или, наоборот, неспособность окрашиваться в темно-фиолетовый цвет при использовании метода, предложенного в 1884 г. Грамом, служит важным таксономическим признаком, с которым коррелируют другие свойства бактерий. Процедура окрашивания по Граму начинается с обработки фиксированных бактериальных клеток основным красителем кристаллическим фиолетовым. Затем следует обработка раствором иода. Иод образует с кристаллическим фиолетовым комплекс, нерастворимый в воде и плохо растворимый в спирте и ацетоне. После этого клетки дифференцируют , обрабатывая их спиртом грам-положительные клетки удерживают при этом комплекс краситель—иод и остаются синими, а грам-отрицательные обесцвечиваются. Для того чтобы сделать их видимыми, их дополнительно окрашивают контрастным красителем фуксином. [c.50]

Антракноз, бактериальный некроз (ожог) 1 10—20 1000—2000 До начала цвете- НИЯ Вторая—перед началом окрашивания плодов - [c.62]

Используя различные методы окрашивания белков, а в случае радиоактивно меченных белков - метод радиоавтографии (см. разд. 4.5.2), можно выявить следовые количества практически всех полипептидных цепей. За один раз методом двумерного гель-электрофореза можно разделить до 2000 отдельных полипептидных цепей этого достаточно, чтобы выявить большинство бактериальных белков (рис. 4-52). Разрешение этого метода настолько велико, что позволяет разделить два практически идентичных белка, отличающихся одной заряженной аминокислотой. Таблица 4-9 знакомит нас с основными этапами развития методов хроматографии и электрофореза. [c.218]

При изучении бактерий особенно полезен способ нанесения сеток, покрытых пленкой, на бактериальный газон или колонии. Сразу же после снятия сеток удаляют лишнюю жидкость и проводят окрашивание. Этим способом можно исследовать природное состояние бактерий и их пространственные взаимосвязи, не нарушенные набиранием в пипетку или другими процедурами, для которых характерны сдвиговые усилия. Подобные процедуры могут вызвать отрыв жгутиков, ворсинок или других хрупких структур. Описанный способ полезен также для быстрого определения морфологического типа фага, вызвавшего образование стерильного пятна на газоне индикаторной культуры бактерий. [c.102]

Эндоспоры очень устойчивы к простому окрашиванию, но, будучи однажды окрашенными, они довольно устойчивы и к обесцвечиванию. Полезным методом позитивного окрашивания бактериальных эндоспор является метод Дорнера. [c.74]

Среды разливают тонким слоем в простерилизованные заранее сухим жаром колбы. Как нефть, так и ее продукты должны быть заранее простерили-зованы. Нефть вводится в таком количестве, чтобы она образовывала тонкий, равномерный слой (не более 1 мм толщины) на поверхности минерального раствора. Посевы выдерживают в термостате при 20—25° С. Развитие бактерий может быть отмечено уже через несколько дней. Сперва наблюдается помутнение жидкости и слабое желтоватое окрашивание, затем на границе раздела минерального раствора и нефти появляется бактериальная пленка. Процесс полного окисления нефти может продолжаться до 2 месяцев. [c.91]

Установлена зависимость окрашивания клеток в разные цвета от способа флуорохромировання, концентрации флуорохрома, концентрации бактериальной суспензии, способа щиання и интенсивности обеспечения культуры кислородом и т. п., а не от возраста клетки. [c.110]

Цитологическое выявление бактериального ядра. Способность ДНК к специфическому окрашиванию лежит в основе реакции Фёльгена на ядерное вещество, В результате взаимодействия свободных альдегидных групп с бесцветной фук-синсернистой кислотой появляется фиолетовая окраска, свойственная основному фуксину. Для удаления из клеток РНК и освобождения альдегидных групп де-зоксипентозы, входящей в состав ДНК, клетки предварительно обрабатывают горячей разведенной H l (4 мин в 1 М НС1 при 60°С). Лучшие результаты получались при окрашивании клеток после такой же предварительной обработки ос- [c.30]

Препарат хорошего качества должен отвечать следующим требованиям содержание золы 7,5—8,0% жиров 0,5—1,0 /о молочного сахара— казеин не должен давать коричневого окрашивания в течение 30-минутного нагревания нри 100° С с 507о воды по редуктазе (вероятно, образующейся вследствие бактериального воздействия [29]) цвет казеина, окращенного метиленовым синим, не должен бледнеть после 18 ч нагревания при 50° С. [c.349]

Возможно, что нарушения, наблюдаемые при олигофрении, связаны с нарушением обмена фенилаланина. Для выяснения пути превраш,ения в организме фенилаланина и тирозина большую роль сыграло изучение еш,е одного отклонения в обмене веш еств у человека, известное под названием алкаптонурии (окрашивание мочи при щелочной реакции). Моча при алкаптонурии, в отличие от нормальной мочи, окрашивается в темный цвет при добавлении к ней щелочи. Моча постепенно окрашивается и без добавления щелочи благодаря бактериальному процессу разложения мочевины с образованием аммиака и углекислого газа. Аммиак подщелачивает мочу. [c.397]

Как отмечалось выше (см. разд. 9.2.3), в гаплоидном наборе митотических хромосом млекопитающих при окрашивании можно обнаружить приблизительно 2000 темных АТ-богатых сегментов (О-полосы), разделенных светлыми ОС-богатыми участками (К-полосы). Примечательно, что АТ-богатая и СС-богатая ДПК различаются по времени репликации в 8-фазе. Эксперименты, подобные приведенном на рис. 9-60, показали, что большая часть СС-богатых полос реплицируются в первой половине 8-фазы, а большинство АТ-богатых - во второй ее половине. Отсюда можно сделать вывод, что гены домашнего хозяйства (конститутивные) находятся главным образом в СС-богатых полосах, а гены, активность которых характерна для специализированных клеток, относятся к АТ-богатым сегментам. Остается загадкой, почему геном млекопитающих должен подразделяться на такие большие чередующиеся блоки хроматина, многие из которых по размеру приближаются к целому бактериальному геному. Пеизвестпо также, сколько точек начала репликации из каждой репликационной единицы активируется одновременно. Возможно, в поздно реплицирующихся репликонах хроматин остается в конденсированном состоянии даже после окончания М-фазы и деконденсируется лишь в середине 8-фазы, открывая в репликоне сразу все точки начала репликации. В таком случае координированная репликация ДПК в пределах одной репликационной единицы, проходящая по принципу все или ничего , может отражать кооперативную природ процесса деконденсации хроматина (см. разд. 9.1.21). [c.141]

Этот вид окрашивания дает возможность самыми простыми, а зачастую и самыми быстрыми способами получить информацию о преломляюш,их свет включениях, таких, как сера или гранулы поли-р-оксимасляной кислоты, и о спорах [12]. При его осуществлении взятый петлей 7%-ный (вес/объем) водный нигрозин (или тушь, или конго красный) тщательно перемешивают с бактериальной суспензией на покровном стекле, размазывают смесь до образования тонкой пленки и высушивают на воздухе. Затем кладут покровное стекло на предметное пленкой вниз и фиксируют его положение одной-двумя каплями свечного воска. [c.59]

Бактериальные цисты, имеющиеся у видов Azotoba -ter например, при простом окрашивании прокрашиваются слабо обычно они выглядят, как сферические тела, окруженные толстыми, но плохо прокрашенными стенками. Описанный ниже метод [14] пригоден для выявления цист азотобактера, в том числе форм, образующихся до созревания цист. [c.75]

Флуоресцирующую антисыворотку ( конъюгат ) и флуоресцирующую нормальную сыворогку растворяют в воде. Готовят несколько порций флуоресцирующей антисыворотки, разбавляя ее каждый раз вдвое (например, 1 5 1 10 1 20 1 40 1 80) в фосфатном буфере с добавлением Na l [фосфатно-солевой буфер (ФСБ), см. разд. 20.4.17]. При каждом разведении антисыворотки с помощью метода окрашивания, описанного ниже, а также с помощью подходящего флуоресцентного (люминесцентного) микроскопа (разд. 1.4) определяют степень флуоресценции бактериальных клеток по шкале О, 1-Ь, 2 +, З-Ь, 4+ (максимум). Рабочее разведение антисыворотки составляет /2 максимального разведения, которое дает степень флуоресценции 4 +. Например, если максимальная степень флуоресценции 4-Ь достигается при разведении сыворотки 1 20, то рабочее разведение равно 1 10. Эквивалентное разведение флуоресцирующей нормальной сыворотки пе должно давать флуоресценции. [c.67]

Концентрация рибосом определяется содержанием РНК в клетке и находится в коррелятивной зависимости от базофиль-ных свойств ее цитоплазмы (базофильные участки цитоплазмы, как и ядро, окрашиваются основными красителями). Наличие в клетке эргастоплазмы (от греч. ergaston — рабочий, вырабатывать и трансформировать) — базофильных участков основной плазмы — указывает на присутствие в ней большого количества рибосом, У быстрорастущих растительных, животных и бактериальных клеток содержание РНК (а следовательно, и особенности окрашивания) всегда коррелирует с концентрацией рибосом. [c.42]

Пример 9-А. Анализ белков, образующихся при заражении бактерии Е. соИ фагом Т4. Если . oli инфицировать фагом Т4, то это приведет к синтезу большого числа белков-медиаторов фага. Относительное количество каждого из них и протекание во времени его синтеза можно изучить с помощью диск-электрофо-реза, используя для обнаружения белка радиоактивную метку. Если смесь всех белков, содержащихся в инфицированной клетке, подвергнуть электрофорезу и затем окрашиванию, гель окажется окрашенным практически равномерно, поскольку в нем будут присутствовать тысячи белков. Однако инфицирование фагом Т4 приводит к прекращению синтеза белков клетки-хозяина, поэтому, если заражение проводить в присутствии Н-лейцина, бактериальные белки не будут радиоактивными. Таким образом, для изучения синтеза белков при заражении фагом Т4 нужно добавлять Н-лейцин через различные промежутки времени после заражения и отделять клетки через несколько минут после каждого добавления Н-лейцина. Затем белки выделяют и разделяют с помощью диск-электрофореза, а зоны обнаруживают с помощью авторадиографии. При этом можно заметить, что в разное время образуются различные зоны. [c.237]

Для фиксации высушенных на воздухе мазков крови пригоден абсолютный метиловый спирт (продолжительность фиксации 2—3 минуты). Мазки можно окрасить по методу Гимзы или смесью Манна — метиленовой синью с эозином. Для доказательства наличия бактериальных или грибковых микроорганизмов в крови хороший результат дает окрашивание по модифицированному методу Клаудиуса. [c.323]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология