Диссоциация фермента

Следовательно, построив зависимость aji от l/[So], можно определить константу диссоциации фермент-субстратного комплекса Ks- [c.86]

С другой стороны, константа диссоциации фермент-субстратного комплекса Ks сохраняет постоянное значение при кислых и нейтральных значениях pH, но с дальнейшим увеличением pH она возрастает [13, 46]. Последнее объясняют тем, что правильная стереохимическая конформация активного центра обусловлена взаимодействием ионной пары (Asp-194)—СОО . .. " NHa — (11е-16), находящейся внутри ферментной глобулы (См. рис. 31). В результате депротонизации а-аминогруппы Пе-16 (с рКа — 8,5—9) происходит разрушение солевого мостика , что приводит к потере ферментом сорбционной способности. Это представление согласуется с данными рентгеновского анализа структуры кристаллического химотрипсина [17], однако ван<ность именно а-аминогруппы Пе-16 для катализа поставлена под сомнение в ряде работ ]47, 48]< [c.132]

Именно при изучении влияния микроокружения на специфические взаимодействия важную роль начинает играть метод аффинной хроматографии. Как подробно показано в гл. 4, возможно, напри.мер, использовать колонку с иммобилизованным ингибитором н вытеснять специфически сорбируемый фермент растворами его ингибиторов в различных концентрациях. Па основе объемов элюата могут быть рассчитаны константы диссоциации фермента как со связанным, так и с растворенным ингибитором. Если использовать тот же ингибитор для связывания на нерастворимой подложке и для элюирования специфически сорбированного фермента, то информацию о влиянии окружения на образование комплекса можно получить, основываясь на различиях, если таковые имеются, в величинах определяемых констант диссоциации. Поскольку специфические взаимодействия играют очень важную роль в большинстве процессов, протекающих в природе, разработка простого метода определения констант диссоциации комплексов несомненно имеет важное значение. [c.12]

Для вывода уравнения стационарной скорости ферментативной реакции, в которой происходит обратимая изомеризация фермента с образованием неактивного конформера (схема 6.27), запишем уравнение материального баланса по ферменту (в случае [8]о [Е]о), а также выражения для скорости распада фермент-субстратного комплекса и для константы диссоциации фермент-субстратного комплекса [c.138]

Для вывода уравнения скорости этой ферментативной реакции запишем уравнение материального баланса по ферменту и выражения для констант диссоциации фермент-субстратного и фер-мент-ингибиторного комплексов [c.141]

Схема (84) описывает последовательное отщепление мономера с конца субстрата или посредством множественной атаки (с константой скорости кг), или путем повторных атак с повторяющейся диссоциацией фермент-субстратного комплекса на фермент и укороченный субстрат (с константой скорости кг). Как следует из схемы (84), исходный полимер имеет максимальную длину п- - [c.111]

Таким образом, видно, что константа Михаэлиса всегда будет больше константы диссоциации фермент-субстратного комплекса Л з. В случае если V будет равно Ч2У, то т=[5], иными словами, константа Михаэлиса будет равна той концентрации субстрата, при которой наблюдается скорость реакции, равная половине максимальной. [c.131]

Рассмотрим определение константы диссоциации фермент-субстратного комплекса флуоресцентным методом. Взаимодействие фермента с субстратом описывается общей схемой [c.178]

Следовательно, построив зависимость а/1 от 1/[5о], можно определить константу диссоциации фермент-субстратного комплекса Кв- [c.179]

Подобрать концентрацию фермента, при которой скорость реакции была бы пропорциональна количеству добавленного белка-катализатора. Если подобная зависимость не наблюдается, это может указывать на присутствие в препарате фермента ингибитора либо активатора, а также на возможную диссоциацию фермента при разведении на субъединицы, обладающие иными кинетическими свойствами, чем олигомер. [c.207]

Таким образом, константа равновесия равна отношению констант скоростей прямой и обратной реакций. Величину, обратную константе равновесия, принято называть субстратной константой, или, в случае ферментативной реакции, константой диссоциации фермент—субстратного комплекса, и обозначать символом К . Так, в реакции [c.135]

Отсюда вытекает важное следствие константа Михаэлиса всегда больше константы диссоциации фермент-субстратного комплекса К на величину [c.137]

Уравнение (У.4) является основным уравнением стационарной кинетики простейших ферментативных реакций. Оно носит название уравнения Михаэлиса — Ментен — авторов, которые, развивая представления Брауна и Анри в области ферментативной кинетики, экспериментально показали приложимость этого уравнения ко многим ферментативным процессам. Следует, однако, сказать, что Михаэлис и Ментен придавали иной смысл величине Кт- Они считали, что концентрация комплекса Е5 определяется лишь соотношением констант -1/ +1, т. е., что на [Е8] существенно не влияет константа +2. Легко показать, что в этом случае получается уравнение такого же вида (У.4), однако в нем член Кт равен к- к+1, т. е. является константой диссоциации фермент-субстратного комплекса. Влияние А+2 на величину [Е5] было учтено Бриггсом и Холденом, однако уравнение ( .4) сохранило название первых авторов. Точно так же константа Кт, представляющая соотношение трех констант скорости, носит название константы Михаэлиса, хотя и имеет иной, более точный смысл. [c.39]

В то же время истинная константа диссоциации фермент-субстратного комплекса, которая в энзимологии носит название константы субстрата и обозначается К , является функцией двух констант скорости [c.46]

Однако были сделаны попытки применения методов стационарной кинетики для вычисления константы субстрата (константы диссоциации фермент-субстратного комплекса). Один из принципов подхода к расчету Ks по данным стационарной кинетики, принадлежащий Слейтеру [16], основан на следующих соображениях. [c.50]

НО отмечалось, что максимальная скорость многих ферментативных реакций, наблюдающаяся при насыщающей концентрации субстрата, а не только кажущаяся величина Кт, зависит от pH. Это заставило предположить, что концентрация ионов водорода определяет не только ионизацию свободного фермента, но также кислотно-основную диссоциацию фермент-субстратного комплекса, причем этот последний процесс влияет на концентрацию активного комплекса Михаэлиса и образование продуктов реакции. [c.109]

Таким образом, максимальная скорость ферментативной реакции при избытке субстрата в случае диссоциации фермент-субстратного комплекса изменяется в зависимости от pH, и это изменение определяется соответствующими константами диссоциации Ка и Кь-В точке максимума зависимости V от [Н ] [c.110]

По наклону прямых были рассчитаны величины изменения энтальпии (АН) для диссоциации фермент-ингибиторного комплекса. Изменения свободной энергии рассчитывались по уравнению [c.189]

Значения АН, АР и А5 для диссоциации фермент-ингибиторных комплексов приведены в табл. 24. [c.189]

Интересная работа [110] также свидетельствует в пользу участия карбанионов типа (134) в тиаминдифосфат-зависимых ферментативных реакциях. Авторы показали, что тиазолон (138), который можно рассматривать в качестве аналога переходного состояния карбаниона (134) [111], очень прочно связывается с пируват-оксидазным ферментным комплексом. При этом константа диссоциации фермент-ингибиторного комплекса по крайней мере в 10 раз меньше соответствующей константы фермент-субстратного комплекса в тех же условиях. Это наблюдение свидетельствует в пользу того, что енаминная форма карбаниона (134) действительно участвует в ферментативной реакции. [c.634]

Аллостерическая регуляция нарушается при. диссоциации ферментов-мультимеров на отдельные субъединицы. Последние являются, видимо, аллостерическими регуляторами активности других субъединиц, что видно на примерах каталазы (мол. вес 252 тыс.) и 6протомерами в молекуле, уреазы (мол. вес 480тыс.), имеющей 8 субъединиц. [c.40]

Здесь следует предупредить читателей относительно некоторой несогласованности в толковании константы Михаэлиса — Ментен. В настоящей книге дано практически наиболее удобное определение константы Михаэлиса — Ментен, принятое Холдейном [15], Олберти [2], а также Диксоном и Уэббом [10]. Между тем Рей-нер [29] считает такое определение неправильным и ограничивает употребление Км особым случаем, когда эта величина выражает истинную константу диссоциации фермент-субстратного комплекса. Лайдлер [22] указывает, что в уравнении Михаэлиса — Ментен j m представляет собой константу диссоциации ES [c.42]

Смотреть страницы где упоминается термин Диссоциация фермента: [c.38] [c.38] [c.59] [c.144] [c.147] [c.216] [c.241] [c.245] [c.77] [c.156] [c.159] [c.304] [c.253] [c.190] [c.243] [c.81] [c.163] [c.86] [c.139] [c.188] [c.136] [c.659] [c.68] [c.77] [c.93] [c.80] [c.411]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология