Авидность

Первая модель Белла [22] содержала шесть дифференциальных уравнений и описывала динамику иммунной реакции в целом. Далее [23, 24] модель последовательно усложнялась для описания действия мультивалентных антигенов, толерантности высокой и низкой доз (для чего вводились пороговые ограничения сверху и снизу) рассмотрена также модель, содержащая несколько клонов лимфоцитов, различающихся по константам связи с антигеном (авидности). Системы уравнений становились все более высокого порядка (даже до 96-го ) и уже не поддавались аналитическому исследованию. Наверное поэтому в 1973 г. появилась работа [25], содержащая всего два уравнения для концентраций антигена А ) и антител АЬ) — модель типа хищник — жертва [c.117]

Развитием идеи Белла о различии антител по величине связи с антигеном служат работы Бруни с соавторами (см., например, [29]), где вместо численностей популяций лимфоцитов в уравнения входят плотности их распределения по константам связи к. Эти модели хорошо описывают времени селекцию клонов увеличение авидности в течение иммунного ответа. [c.118]

Отбор моноклональных антител, связывающихся с различными эпитопами на антигене. Для высокоспецифического выявления ряда антигенов наиболее удобной является сэндвич -модификация твердофазного иммуноферментного анализа. Использование в таком типе анализа двух моноклональных антител, взаимодействующих с разными эпитопами, позволяет сократить время анализа. Кроме того, такие пары моноклональных антител в ряде случаев обладают большей авидностью по сравнению с аффинностью каждого отдельного антитела. Для выявления антител, связывающихся с различными центрами на антигене, обычно используют три метода. [c.173]

Аффинность и авидность антител [c.20]

Исходя из этого положения, можно дать более строгое определение авидности, выразив ее как константу ассоциации Ка- [c.20]

Увеличение средней авидности и аффинности антител. [c.37]

При иммунизации всегда следует использовать несколько животных и контролировать иммунный ответ у каждого животного по отдельности. При этом принимают во внимание различия между животными и затем либо получают пул антисывороток, либо отбирают те из них, которые обладают максимальной авидностью/аффинностью. [c.42]

Определяют авидность. Высокая авидность необходима для проведения радиоиммунологического анализа в жидкой (фазе, а также для методов, где важно иметь низкий фон, в том числе для осуществления иммуногистохимических исследований клеток и тканей и Вестерн-блоттинга. Отличительное свойство антител с высокой авидностью заключается в том, что они сохраняют способность оптимально связываться с аи- [c.112]

Б. Влияние аффинности и авидности антител [c.232]

По той же причине, если сродство отдельных антиген-связывающих участков IgG и IgM одинаково, молекула IgM (имеющая 10 таких участков) проявит несравненно большую авидностъ к мультивалентному антигену, чем молекула IgG (имеющая 2 участка). Различие в авидиости весьма важно, так как антитела, образующиеся на ранних стадиях имунного ответа, обычно обладают значительно меньшим сродством к антигену, чем те, которые вырабатываются позже. (Повышение среднего сродства продуцируемых антител с течением времени после иммунизации называется созреванием сродства.) Благодаря высокой общей авидности антитела IgM-основной класс Ig, вырабатываемых в начале иммунного ответа,-могут эффективно функционировать даже при низком сродстве отдельных связывающих участков. [c.27]

Было выявлено, что при создании толерантности к доминантной детерминанте, т. е. в условиях искусственной безответности на нее, явления конкурентного подавления иммунного ответа на вторую, ранее подавляемую, детерминанту отменяются. Отмену подавления вызывает и пассивное введение антител против доминантной детерминанты [125]. В свете этих фактов внутримолекулярную конкуренцию объясняют конкуренцией В-лимфоцитов различной специфичности. Предполагают, что если число В-клеток одной специфичности больше или их специфичные рецепторы более авидны (например, в результате иммунологической памяти к одной из детерминант антигена или даже к родственной группировке), то такие В-лимфоциты будут иметь преимуш,ество в соединении со своей детерминантой антигена (рис. 6). В результате иммунный ответ на эту детерминанту окажется более активным, а на вторую — несколько ослабленным, так как антиген будет захвачен В-клетками первого типа. Эту гипотезу подтверждает и факт увеличения явлений конкурентного подавления при уменьшении дозы антигена. Вполне понятно, что в таких условиях конкуренция становится очень жесткой и потеря даже небольшого числа молекул антигена, необходимого для активации функционально менее активных В-клеток, может существенно сказаться на результате. [c.52]

На рис. 7 на основании данных литературы схематически изображен механизм такого нарушения. Основой его является, как и при внутримолекулярной конкуренции, конкуренция на уровне В-лимфоцитов. Поскольку у доминантного антигена IgT более авидны, он имеет преимущество при соединении с рецепторами В-лимфоцитов для F фрагмента IgT. В результате часть комплексов [c.55]

Сродство антитела отражает силу взаимодействия антигенной детерминанты с отдельным антиген-связывающим участком, каким бы ни было число таких участков. В отличие от этого общая авидность антитела по отношению к мультивалентному антигену (такому, как полимер с повторяющимися субъединицами) характеризует суммарную силу" взаимодействия всех связывающих участков антитела, вместе взятых. Когда мультивалентный антиген взаимодействует более чем с одним антиген-связываюшим участком антитела, сила связывания резко возрастает для того чтобы антиген и антитело могли диссоциировать, все их связи друг с другом должны быть разорваны одновременно. Поэтому типичная молекула IgG при вовлечении в реакцию обоих антиген-связывающих участков будет связываться с мультивалентным антигеном по меньшей мере в 1000 раз сильнее, чем в случае, когда вовлечен лишь один участок. [c.237]

При вырапщвании двух штаммов Н1 (свиньи и BEL) в присутствии антител низкой авидности были выделены антигенные мутанты. Пептидные карты таких мутантов показали различия в положении по крайней мере одного полипептида в сравнении со штаммом дикого типа [68]. При освоении метода моноклональных антител были отобраны антигенные варианты из штаммов PR8 (H1N1) и А/Меш/1/71 (H3N2). Эти варианты должны были иметь только одно или несколько изменений аминокислот. Специфические замены аминокислот наблюдали в субъединицах НА1 у 10 изолятов и не обнаруживали подобных изменений в субъединицах НА2. Четыре независимых варианта, отобранных с тем же моноклональным антителом, имели ту же замену аминокислоты (аспарагин на лизин) [71]. Восемь из 10 вариантов штамма PR8 имели одно изменение пептида. В этих проанализированных слу- [c.115]

Антисыворотки, полученные даже от одного животного, значительно различаются по своей способности связывать антиген. Для сравнительной характеристики и оценки качества антисывороток проводят их тестирование, которое позволяет решить следуюш,ие две важные задачи во-первых, произвести отбор цменно тех сывороток, которые по своим свойствам (специфичности, аффинности, авидности и концентрации присут-ствуюш,их в них специфических антител) удовлетворяют требованиям иммунохимического. анализа во-вторых, осуш,ествить стандартизацию антисывороток при их промышленном. производстве для иммуноферментных наборов. [c.157]

Для получения поликлональных антисывороток, используемых в повседневных иммунологических методах исследования, особенно в реакциях преципитации, применяют более крупных животных, в частности лабораторных кроликов. Кроликов можно содержать в клетках, они хорошо размножаются в неволе, выносливы и долго живут. Уход, иммунизация и взятие Крови у этих животных не представляют труда. Полученные от кроликов антисыворотки обладают хорошими преципитиру-ющими свойствами и стабильны при хранении, иммуноглобулиновая фракция легко поддается очистке. Кроме того, такие антисыворотки, обладая высокой авидностью/аффинностью пригодны для использования в чувствительных иммунологических тестах. В течение нескольких месяцев в период максимального ответа можно получить не менее 100 мл антисыворотки и еще 150 мл при аутопсии. Аутбредные кролики отвечают на иммуноген по-разному, поэтому следует использовать для иммунизации несколько животных, протитровать их сыворотки по отдельности, затем смешать отобранные пробы, если требуется максимальное разнообразие антител. Кролики достаточно хорошо отвечают на широкий спектр ммуногенов в сочетании с адъювантом Фрейнда образованием IgG. [c.41]

Получение зфф ективн1ых антисывороток определяется стратегией пробных заборов крови после каждой инъекции, которые позволяют проследить за возрастанием титра антител и изменением их специфичности и авидности. От результатов, полученных в ходе этих пробных исследований, зависит процедура последующих инъекций (время проведения, доза, использование адъюванта, способ введения), а также выбор наиболее хорошо отвечающих животных и необходимость в той или иной абсорбции. [c.92]

Золотое правило при взятии проб крови — это включе-ние в систему тестирования именно того метода, для осуществления которого данная аитисыворотка в конечном счете предназначается. Действительно, антисыворотка может работать в методе Ухтерлони, но обладать слишком малой специфичностью и (или) авидностью для осуществления радиоиммунологического анализа, для которого и была предназначена. [c.92]

Чтобы оценить функциональную авидность хелперов, приготовляют клетки селезенки со 100-кратными различиями в плотности поверхностной гаптенизации. Эти клетки исследуют в качестве стимулирующих и отвечающих в культурах общим объемом 0,2 мл, приготовленных иа панели для микротитровання. Культуральной средой служит PRMI 1640, в которую добавляют 2-меркаптоэтанол (5 10 М), ГЭПЭС (10 М), пенициллин и стрептомицин (200 ед/мл) и СПК (10%). [c.245]

Препаративное культивирование приводит к накопленнкг Т-хелперов, которое сопровождается повышением функциональной авидности (т. е. способности популяции Т-хелперов распознавать гаптен на поверхности отвечаюш нх клеток-мншеней прн очень низкой его плотности) и хелперной активности в расчете на одиу Т Клетку. [c.246]

Влияние поливалентности. При работе с антителами из сыворотки быка против альбумина человека были получены данные, позволяющие предположить, что преимущественная регистрация IgM при малых разведениях сыворотки объясняется их поливалентностью и соответственно высокой авидностью (Butler et al,, 1980а). Для проверки этого предположения мы [c.234]

Мы нашли, что концентрация компонентов системы гораздо сильнее влияет на конечное значение поглощения, чем время инкубации. Начальная стадия связывания антител протекает очень быстро. Так, при инкубации с сывороткой в течение 1 мин (20 С) поглощение достигает 15% значения, получаемого на конечном этапе анализа при 15-минутной инкубации (37 С) с тем же препаратом сыворотки. Проявление такой высокой начальной скорости связывания можно объяснить, исходя из закона действующих масс, в соответствии с которым скорость связывания в начальной стадии реакции до достижения равновесия должна быть велика по сравнению со скоростью обратной реакции (Maggio, 1981), Использование непродолжительного периода инкубации может способствовать повышению специфичности тестирования, поскольку именно наиболее авидные анти- [c.375]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология