Химотрипсин ингибирование

В таблице 18 приведены кинетические данные по изучению ингибирования профлавином гидролиза этилового эфира Ы-ацетил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином. Исходя [c.125]

Обработкой данных табл. 18 в координатах Лайнуивера-Берка можно показать, что профлавин является конкурентным ингибитором а-химотрипсина. Однако зависимость в координатах (Кт(кяж), [I]) в данном случае является нелинейной (рис. 68), в отличие от простого конкурентного типа ингибирования. Одной из возможных причин подобной зависимости может быть связывание с активным центром фермента двух молекул конкурентного ингибитора [c.141]

Ингибирование ионами Си++ реакций гидролиза сложноэфирных субстратов, катализируемых а-химотрипсином, происходит согласно схеме [c.148]

Рис. 73. Обработка результатов эксперимента по ингибированию ионами меди гидролиза этилового эфира К-бензоил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином

Рис. 74. Определение константы ингибирования а-химотрипсина ионами меди в реакции гидролиза этилового эфира М-бензоил-Ь-тирозина

Так как для ингибирования а-химотрипсина эриохромом черным Т величина Кт(каж) не изменяется в присутствии ингибитора, то линеаризация экспериментальных данных в координатах [c.164]

Рис. 81. Обработка кинетических данных по неполному неконкурентному ингибированию эриохромом черным Т гидролиза этилового эфира К-ацетил-Ь-тирозина, катализируемого а-химотрипсином

Полученные величины АР при взаимодействии ароматических углеводородов с а-химотрипсином хорошо согласуются со значениями, найденными при кинетических измерениях константы ингибирования ароматическими углеводородами а-химотрипсина в реакции гидролиза метилового эфира гиппуровой кислоты [179-182]. [c.37]

Поддержание величины е в смесях на уровне их значений для водных растворов, однако, само по себе еще не обеспечивает сохранение нативной конформации многих белков, необходимой для проявления ферментативной активности. В водно-метанольных растворах, например даже в условиях, когда 8 = 80, наблюдается необратимое ингибирование таких ферментов, как дегидрогеназы и редуктазы. Такие ферменты, как трипсин, t-химотрипсин, амино-трансферазы и пероксидазы, сохраняют высокий уровень ферментативной активности в смесях, диэлектрическая проницаемость которых существенно отлична от 80. Такое поведение ферментов характерно для смесей глицерина с водой. [c.235]

При помощи радиоактивного ДФФ найдено, что 1 моль фермента присоединяет 1,1 моля фосфора, а химическим анализом установлено, что в молекулу внедряются две изопропильные группы и совсем не вводится фтор. Ни одна из встречающихся в химотрипсине аминокислот не реагирует с ДФФ, а кристаллический ингибированный фермент содержит такое же количество аминного азота, что и активный белок. Однако эти результаты можно отнести за счет нечувствительности методов. [c.323]

При реа1ктивации фосфорилированного химотрипсина такими реагентами, как оксииминоацетон и пиколингид-роксамовая кислота, скорость реакции при постоянном значении 1рН пропорциональна концентрации реактива-тора [92]. Данные, полученные при изменении pH в этой реакции, указывают, что кинетически активными частицами являются анион активатора и протонированная форма ингибированного фермента. Кроме того, оказывается, что химотрипсин, ингибированный зарином, [c.148]

Известно [17], что неконкурентное ингибирование ферментативной активности а-химотрипсина борной кислотой обусловлено взаимодействием ингибитора с имидазольной группой остатка гистидина-57 активного центра фермента. В табл. 20 приведены результаты совместного воздействия борной и н-гексилборной кислот на кинетику гидролиза анилидного субстрата, катализируемого а-химотрипсином [18]. Определить, принимает ли гистидин-57 активного центра фермента участие в связывании н-гексилборной кислоты. [c.97]

Рис. 52 Влияние двух взаимозави-симы.х ингибиторов — борной и н-гексилборной кислот — на скорость реакции гидролиза амидного субстрата, катализируемого а-химотрипсином (а) — без добавления НзВОз, (б) — концентрация НзВОз равна 0,21 М. Пунктирная прямая соответствует альтернативному механизму взанмонезави-симого ингибирования

В работе [15] была предложена следующая схема ингибирования а-химотрипсина 2-фенилэтанборной кислотой [c.237]

Некоторые из белковых веществ обладают антитрипсиновым действием. Для многих клубней и корнеплодов установлена [60] величина ингибирования белков по отношению к химотрипсину. Практически все клубни содержат антитрипсиновые вещества, [c.276]

Непродуктивное связывание предотвращает гидролиз пептидов, состоящих из нежелательных о-аминокислот. Пептиды, состоящие из D-аминокислот, также могут прочно связываться химотрипсином. Однако в этом случае образуется сравнительно малореакционноспо-собный фермент-субстратный комплекс, поскольку расщепляющаяся связь не ориентирована должным образом относительно каталитического центра [629] таким путем свободная энергия связывания расходуется на ингибирование реакции с аналогом субстрата, которая могла бы привести к нежелательным продуктам. Непродуктивное связывание, по-видимому, является общим механизмом, обеспечивающим специфичность фермента [630, 631]. [c.248]

Так, у эстераз и эстеролитически активных протеиназ определено наличие в активном центре функционального остатка Сер, который подвергается ацилированию на промежуточной стадии процесса. Активный серил фигурирует в псевдохолинэсте-разе, фосфоглюкомутазе, в химотрипсине и трипсине и в ряде других ферментов. На рис. 6.7 изображена схема связывания субстрата ацетилхо-лина ацетилхолинэстеразой (АХЭ) и схема ингибирования ее активности при высокой концентрации субстрата [32]. В эсте-разный участок АХЭ входят нуклеофильная группа V и смежная с ней диссоциирующая кислотная Рис. 6.9. Схема действия креатинкиназы. группа НХ. Ацильный ос- Переходное состояние, [c.375]

Раств-сть Na-соль р. HjO, ДМСО м. р. EtOH н. р. эф. Сильно ингибирует термолизин, елабо коллагеназу (50%-ное ингибирование при 0,4 и 33 мкг/мл) не действует на трипсин, химотрипсин, напаин и пепсин (50%-ное ингибирование при [c.274]

Раств-сть р. укс. кисл., ДМСО м.р. HjO, EtOH н.р. эф. Сильно ингибирует химотрипсин, слабо папаин и катепсин, неактивен к трипсину. Вызывает 50%-ное ингибирование при следующих конц. (мкг/мл) химотрипсин 0,15, папаин 7,5, катепсин А 62,5, В 2,6, D 49.0, плазмин и трипсин > 250. [J. Antibioti s 23, 425 (1970) 26, 625 (1973)]. Лейцин в составе молекулы может быть заменен на изолейцин или валин. [c.274]

Конкурирующие ингибиторы а-химотрипсина. Кауфман и Нейрат (Kaufman, Neurath, 1949а, Ь) открыли большое число конкурирующих ингибиторов химотрипсина. Все они являются структурными аналогами субстратов химотрипсина было показано, что эффективное ингибирование обусловливается в основном теми же факторами, которые вызывают высокие скорости гидролиза у субстратов. Условия, в которых проявляется специфичность, несколько шире это становится понятным, если учесть, что для эффективного активирования субстрат должен вступить в соединение с тремя точками на поверхности энзима, а для дей ствия в качестве ингибитора вещество может осуществлять такое соединение всего в одной или двух точках. [c.631]

Вероятность существования двух оОратимых фермент-ингибиторных комплексов (схема III) согласуется с данными Стертеванта и Муна [3] по кинетике ингибирования химотрипсина ДФФ в отсутствие субстрата. Согласно схеме V предполагается, что ингибитор взаимодействует с ферментом по субстратному механизму, выступая как плохой субстрат. [c.334]

Метиловый эфир о-трнптофана — относительно слабый ингибитор химотрипсина (константа ингибирования После его связывания с сефарозой [18] даже в такой высокбй [c.35]

Механизм ингибирования холинэстеразы фосфорор-ганическпми соединениями хорошо ионят, но только по косвенным данным. Более прямые доказательства механизма действия получены по детально изученному химотрипсину. Показано, что прн действии слабого раствора параоксона на химотрипсин фосфор одной молекулы ингибитора связывается с каждой молекулой фермента одновременно появляется ион нитрофенола. Активная часть фермента, очевидно, расщепляет молекулу ингибитора, но в состоянии высвободить фосфо-рильную группу, что приводит к блокированию ее деятельности, в то время как нормальный фермент может атаковать и высвобождать тысячи молекул в секунду. [c.93]

При попытке применить этот кинетический метод к исследованию гидролиза под действием химотрипсина гидроксамовой кислоты N-aцeтилтиpoзинa сравнивали степень ингибирования этой реакции, наблюдаемую в присутствии гидроксиламина, со степенью ингибирования, предсказанной на основании распределения предполагаемого промежуточного ацилфермента между реакциями гидролиза и гидроксиламинолиза [12]. Для того чтобы определить долю каждой из этих реакций, измеряли в независимом эксперименте количества гидроксамовой и свободной кислот, образующихся под действием химотрипсина из этилового эфира ацетилтирозина в присутствии различных концентраций гидроксиламина [схема (10)]. [c.52]

Прочие протеиназы, обладающие эстеразным действием, при ингибировании их диизопропилфторфосфатом точно так же образуют кристаллические соединения [142]. При данной концентрации ДФФ протеиназная и зстеразная активности а-химотрипсина, j -химотрипсина, у-химотрипсина и трипсина в каждом случае ингибируются почти в одинаковой степени. В каждое из этих производных вводится приблизительно 1 моль фосфора, [c.324]

Недавно Смит и Браун [1536] исследовали седиментацию трех приготовленных Янсеном и сотрудниками [8, 26, 141] кристаллических производных а-химотрипсина, а именно 1) фермента, ингибированного при помощи ДФФ, 2) активного окисленного фермента и 3) окисленного фермента, ингибированного обработкой ДФФ. Ранее проведенные седиментационные исследования показали, что а-химотрипсин в отличие от зимогена ведет себя как смесь мономера и димера. Исследование указанных производных было предпринято с целью определить природу детерминирующих групп. Для ДФФ-производного а-химотрипсина и активного окисленного фермента при ультрацентрифугировании были получены диаграммы, характерные для равновесия мономер — димер в необработанном ферменте. Однако после повторной обработки с помощью ДФФ и окисления получается производное, которое осаждается при рН 4,0 как мономер. Отсюда был сделан вывод, согласно которому в димеризации а-химотрипсина принимают участие несколько групп, одна из которых должна иметь ионный характер, так как указанное явление зависит от величины рН. Седиментация аналогичных производных трипсина имеет совершенно иной характер [153 в]. При ограниченной концентрации активного трипсина последний ведет себя во время седиментации подобно активному химотрипсину и ДФФ-производному а-химотрипсина, т. е. обнаруживает характерную обратимую агрегацию, зависящую от концентрации и от величины рН. Однако ДФФ-производное трипсина, так же как и трипсиноген [153г], осаждается в подобных условиях в виде мономерных частиц. [c.344]

Смотреть страницы где упоминается термин Химотрипсин ингибирование: [c.635] [c.224] [c.110] [c.146] [c.396] [c.421] [c.422] [c.404] [c.273] [c.273] [c.273] [c.159] [c.633] [c.633] [c.251] [c.158] [c.185] [c.45] [c.323] [c.324] [c.325] [c.136]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология