Метод свободной диффузии

МЕТОДЫ СВОБОДНОЙ ДИФФУЗИИ И ДИАЛИЗА [c.25]

Методы свободной диффузии и диализа вообще не являются способами исследования комплексообразования в растворе. Они применяются скорее для определения молекулярных или ионных весов. Вместе с тем из полученных таким путем данных о весе частиц можно, правда с некоторыми ограничениями, сделать качественные выводы о типах комплексных соединений, присутствующих в растворе. [c.25]

МЕТОД СВОБОДНОЙ ДИФФУЗИИ [c.25]

Наиболее точным экспериментальным методом является метод свободной диффузии. В нем первоначально устанавливается резкая граница между раствором равномерной концентрации и чистым растворителем. [c.408]

Изменение скорости диффузии [15] Метод свободной диффузии [8] [c.269]

Рис. 8.2. Способы формирования границы раздела в методе свободной диффузии

Метод пористой диафрагмы. Для устранения конвективных потоков, которые могут иметь место в методе свободной диффузии при наличии градиента температуры, на границе двух сред устанавливается стеклянная пористая перегородка (диафрагма). Она делит диффузионную ячейку (рис. 8.4) на два отделения, одно из которых содержит меченые индикаторы (изотопы). Диффузия осуществляется через каналы пористой перегородки. Предполагается, что градиент концентрации меченых атомов в диафрагме постоянен, а растворы в обоих отделениях однородны по своему составу, что достигается перемешиванием растворов с помощью магнитной мешалки. В таких условиях диффузия будет осуществляться с постоянной скоростью. Коэффициент диффузии можно вычислить из следующего соотношения [41] [c.325]

Точно измерить коэффициент диффузии нелегко. Для этого используется два метода метод пористого диска и метод свободной диффузии. Первый из них основан на прямом применении уравнения (7.31) измерения проводят с помощью несложного прибора, изображенного на рис. 7.12. Растворенному веществу дают возможность диффундировать через пористый диск, сделанный из алунда илн спекшегося стекла. Сначала измеряют скорость прохождения через диск вещества с известным коэффициентом диффузии, а затем — скорость прохождения исследуемого вещества. После этого исходя из данных калибровки определяют коэффициент диффузии исследуемого вещества. Таким путем, однако, получают относительные, а не абсолютные значения коэффициента диффузии. [c.406]

В методе свободной диффузии можно использовать аппарат для электрофореза, аналитическую ультрацентрифугу или специальный прибор, предназначенный для измерения диффузии. Сначала создается резкая граница раздела между раствором, содержащим макромолекулы, и зоной растворителя эту границу получают либо при помощи стеклянной перегородки, либо создают в результате седиментации. Затем перегородку убирают или понижают скорость центрифугирования и дают [c.406]

Наиболее простым для анализа гидродинамическим методом является метод диффузии, так как единственная сила, действующая на макромолекулы, вызвана пространственным распределением их концентраций. Скорость переноса массы через поверхность пропорциональна градиенту концентрации у этой поверхности. Коэффициент пропорциональности (Р) называется коэффициентом диффузии. Коэффициент диффузии обратно пропорционален поступательному коэффициенту трения. Его измеряют по изменению концентрации раствора. Прямое определение D методом свободной диффузии связано со значительными экспериментальными трудностями. [c.221]

Измерение коэффициентов самодиффузии можно производить теми же методами, которые используются для измерения коэффициентов взаимной диффузии, применяя в качестве второго компонента радиоактивные или стабильные изотопы исследуемого вещества. Возможность использования подобной методики основана на том предположении, что коэффициенты взаимной диффузии меченных изотопами и немеченных молекул одинаковы и представляют коэффициент самодиффузии. Наиболее широкое распространение получили метод свободной диффузии, метод пористой диафрагмы и метод капилляров. Теоретическое обоснование этих методов дано Юй Синь Ваном [41, с. 56-71] и Тиррелем [32]. [c.323]

РС йх есть скорость изменения самого градиента. Данные, необходимые для использования уравнения (7.32), с успехом получают с помощью оптических устройств, позволяющих измерять показатель преломления вещества на разных расстояниях от дна кюветы. Наибольший градиент показателя преломления [йп1(1х) отвечает наиболее высокому градиенту концентраций,, т. е. участку, где концентрация меняется с расстоянием сильней, чем где бы то ни было. Измерение показателя преломления вдоль кюветы непосредственно приводит к кривым, подобным кривой, приведенной на рис. 7.13, В. Граница раздела соответствует точке, в которой йС1с1х имеет максимальное значение. (Это и есть то точное определение границы, которое мы обещали дать.) На рис. 7.13 граница находится на горизонтальной штриховой линии при л = Хт. Обычно изменение концентрации растворенного вещества исследуется в зависимости как от времени, так и от расстояния. В расчетах, связанных с диффузией, используют также различного рода интегральные уравнения. Метод свободной диффузии позволяет получать абсолютные значения коэффициента диффузии . [c.407]

Коэффициенты диффузии. Коэффициенты диффузии почти всех биологических макромолекулярных препаратов были определены методом свободной диффузии, при котором наблюдают изменение во времени формы первоначально резкой границы между раствором и чистым растворителем. При этом используют шлирен- или интерференционную оптические системы. Исчерпывающее квалифицированное изложение этого вопроса содержится в обзоре Гостинга [53]. Две доступные интерферометрические системы (Гои [126—128] и Релея [129—132]) обеспечивают высокую степень прецизионности. Шлирен-оптика также дает точность, достаточную для многих целей. При изучении более вязких гликонротеинов основная практическая трудность состоит в создании хорошей первоначальной границы при соблюдении этого условия нет необходимости в очень высокой точности измерений. Эта трудность в известной степени может иметь место при применении для измерения диффузии ячейки ультрацентрифуги для искусственного образования границы. Очень резкие и симметричные границы позволяют проводить определения при малом расходовании изучаемого вещества. Ультрацентрифуга нри подобных экспериментах должна работать на низких скоростях вращения ротора, чтобы не происходило перераспределение компонентов полидисперсной смеси [133] и не было обострения границы за счет седиментации. Если благодаря высокому коэффициенту седиментации это невозможно, тогда Т) можно определить при различных скоростях вращения ротора и экстраполировать полученные данные к нулевой скорости вращения ротора [134]. [c.61]

Несмотря на простоту теории метода свободной диффузии, практическое применение его связано с больпшми экспериментальными трудностями. Константы диффузии высокомолекулярных веществ имеют порядок от 10 до 10" см с . Удалось оценить (см. выражение Б в Дополнении 10.3) время размытия исходной тонкой границы до толщины 1 мм, которое составляет несколько часов. Чтобы точно измерить время размытия, нужно создать границу толщиной много меньше 1 мм, что само по себе представляет значительную трудность. Для размытия границы до 1 см потребуются сотни часов. Такое днффузион- [c.214]

Для ЭТОГО предложено почти полтора десятка методов. Белок признают гомогенным, если увеличение его количества в твердой фазе не сопровождается возрастанием содержания белка в растворе (рис. 14). Наличие одной белковой полосы при электрофорезе в полиакрила-мдцном геле, одного пика на выходной кривой (либо одной белковой зоны на пластинке) при хроматографировании или гельфильтрации, резкой границы пограничного слоя белок—растворитель при ультрацентрифугировании белка являются наиболее надежными показателями гомогенности белкового препарата. В большинстве случаев гомогенны кристаллические белки. Если кривая распределения белковых частиц по высоте при использовании метода свободной диффузии подчиняется теоретической кривой распределения Гаусса, белок гомогенен. Достижение в процессе очистки белка стабильного содержания свободных Н8-групп или содержания радиоактивной метки (при работе с меченым белком), равно как и постоянного уровня биологической (ф мен-тативной, гормональной и т. п.) активности, свидетельствует в пользу гомогенности белка. Выявление единственной N-кoнцeвoй и единственной С-кон-цевой аминокислоты при анализе белкового препарата также является признаком гомогенности выделенного белка. [c.34]