Пенициллинамидаза

Рис. 103. Применение метода Фостера— Ниманна для определения константы конкурентного ингибирования пенициллинамидазы продуктами ферментативного гидролиза бензилпенициллина (по данным А. А. Клёсова и В. К. Швядаса), если начальные концентрации субстрата (мМ)

Получение б-аминопенициллановой кислоты. 6-Аминопеницилла-новая кислота (6-АПК) — ценное исходное соединение для получения эффективных полусинтетических аналогов природных пенициллинов. Получение 6-АПК в промышленности путем химического гидролиза бензилпеьшциллина сопряжено с большими трудностями в связи с крайней неустойчивостью лактамного цикла его молекулы. Так, при щелочном гидролизе бензилпенициллина выход 6-АПК составляет всего 1 %. Продуктивность этого процесса удалось значительно повысить благодаря применению для гидролиза иммобилизованных бактериальных клеток, содержащих пенициллинамидазу. [c.98]

Попытка обобщить данный материал сделана в настоящей книге, которая представляет собой логическое продолжение первой части, опубликованной ранее отдельным томом и посвященной анализу специфичности и кинетических аспектов действия ферментов на относительно простые субстраты, такие как алифатические и ароматические спирты и альдегиды, производные карбоновых кислот, замещенные аминокислоты и их производные (не выше ди- или три-пептидов). Главное внимание в первой части книги уделялось характеру фермент-субстрат ных взаимодействий на достаточно ограниченных участках активного центра и кинетическим проявлениям этих взаимодействий. В основе первой части книги лежит экспериментальный материал, полученный при изучении специфичности, кинетики и механизмов действия цинк- и кобальткарбоксипеп-тидазы, химотрипсина и трипсина из поджелудочной железы быка, алкогольде-гидрогепаз нз печени человека и лошади и пенициллинамидазы бактериального происхождения. Итогом первой части книги явились обобщение и формулировка кинетико-термодинамических принципов субстратной специфичности ферментативного катализа. [c.4]

Кинетические параметры гидролиза бензилпенициллина до 6-аминопенициллановой кислоты (6-АПК) под действием иммобилизованной пенициллинамидазы при 40° С равны йкат=15 сек- , Ят(каж)=3,1 10- м. Константа инактивации пенициллинамидазы в условиях проведения реакции равна 10 сек , причем связывание с ферментом субстрата или продуктов реакции не влияет на скорость инактивации фермента. Рассчитать, какое количество 6-АПК (мол. вес 217) можно получить с помощью иммобилизованной пенициллинамидазы в периодически действующем реакторе объемом 100 л (начальная концентрация активного фермента равна 3-10 М, начальная концентрация субстрата равна 1,0 М), если степень конверсии субстрата в каждом реакционном цикле должна составлять 99%. В расчетах учесть, что константа конкурентного ингибирования пенициллинамидазы вторым продуктом реакции, фенилуксусной кислотой, равна 2,8-10 М. [c.176]

Еще один пример, который также находит повседневное применение, касается специфического гидролиза пенициллинамидазой природного пенициллина О в препаративных количествах, при этом опять-таки используется хроматографический процесс [129]. В результате образуется чистый продукт гидролиза — 6-аминопеницнллановая кислота, свободная от примесей, которая затем может быть исиользована для синтеза всех видов полусинтетических производных пенициллина. В противополо/кность нестабильному растворимому ферменту фермент, переведенный в нерастворимое состояние, не проявляет потери активности [c.261]

Рис. 88. Применение метода Фостера — Ниманна для определения константы конкурентного ингибирования пенициллинамидазы продуктами ферментативного гидролиза бензилпенициллина

Надо убрать природную группу (Д) из природного пенициллина с помощью фермента - пенициллинамидазы. [c.216]

Эта кислота фактически является исходным материалом для последующего синтеза нового антибиотика. Далее необходимо ввести в эту кислоту другие группы, и тогда антибиотик не будет терять активность, так как нет на данный момент резистентных к нему микроорганизмов. Надо помнить, что резистентные формы микроорганизмов могут иметь эти же ферменты ((З-лактамазы и пенициллинамидазы), и тогда природный антибиотик этими микроорганизмами будет разрушаться и не действовать на болезнетворные организмы в процессе лечения. Чтобы предотвратить разрушение [c.216]

ВОЙ КИСЛОТЫ из пенициллина с использованием иммобилизованной пенициллинамидазы [32]. [c.442]

Для получения оптически активных аминокислот можно использовать и гидролиз их метиловых эфиров под действием таких ферментов, как химотрипсин, субтилизин. Так, для получения оптически активных нуклеоаминокислот осуществляли [74] гидролиз их /V-ацильных производных под действием пенициллинамидазы (схема 23, где Nu — остатки гипоксантина, урацила, тимина, цитозина, связанные через атом азота). [c.68]

Все перечисленные выше методы являются физико-химическими. Однако в настоящее время для получения многих лекарств широкое применение нашли биотехнологии. Например, иммобилизованные ферменты позволяют быстро, специфично и без побочных продуктов (являющихся главным недостатком химического синтеза) осуществлять синтез биологически активных веществ (о том, как иммобилизуют ферменты, см. главу 2). Так, иммобилизованная пенициллинамидаза используется для промышленного получения 6-аминопенициллановой кислоты, являющейся исходным сырьем в производстве новых полусинтетических пени- / /имяов широкого спектра действия (см. ниже). Производство гормональных препаратов — кортизола и преднизолона осуществляется в колонках, заполненных гранулами нерастворимого носителя с иммобилизованными ферментами. [c.504]

Таким образом, устойчивость многих видов бактерий к пенициллину связана с образованием ими ферментов, разрушающих молекулу антибиотика ( -лактамазы, или пенициллинамидазы, или того и другого вместе). [c.453]

Получение 6-аминопепициллановой кислоты с помощью иммобилизованной пенициллинамидазы (СССР, Япония, Финляндия). [c.217]

Источником получения 6-аминопенициллановой кислоты является бензилпенициллин или феноксиметилпенициллин. В результате химического, а в настоящее время чаще ферментативного дезацилирования с участием пенициллинацилазы (пенициллинамидазы) молекулы пенициллина получают 6-АПК. Пеницил-линамидаза образуется различными группами микроорганизмов. [c.253]

Проведение химического деацилирования бензилпенициллина, обычно являющегося исходным сырьем для получения 6-амино-пенициллановой кислоты (6-АПК), представляет трудную задачу из-за наличия в его молекуле чрезвычайно лабильного -лак-тамного кольца (см. гл. 3). Поэтому в промышленности до недавнего времени обрабатывали бензилпенициллин бактериальной массой Е. oli, содержащей фермент пенициллинамидазу, который специфически и без побочных реакций расщеплял именно ту амидную связь, которая необходима для образования [c.30]

В результате применения иммобилизованных бактериальных клеток, содержащих пенициллинамидазу, а затем и самой иммобилизованной пенициллинамидазы, удалось значительно повысить продуктивность и экономичность промышленного процесса получения 6-АПК- В 1975 г. процесс получения 6-АПК с использованием иммобилизованной пенициллинамидазы был внедрен в нашей стране. В настоящее время значительная доля 6-АПК в Италии и вся 6-АПК, выпускаемая в СССР, производится с помощью иммобилизованных ферментов (Ю. Э. Бартошевич, 1986). [c.30]

Итальянская компания использует иммобилизованную пенициллинамидазу, полученную включением фермента в волокна триацетата целлюлозы. При этом эмульсию, образованную при смешивании раствора фермента с раствором триацетата целлюлозы в метиленхлориде, подвергают экструзии в нити. Волокна закрепляют вдоль термостатируемой колонны и пропускают через нее 6%-ный раствор бензилпенициллина до степени конверсии последнего 97% или выше. По данным итальянских ученых, общий выход 6-АПК составляет 85% с чистотой 96% и выше (W. Markoni, 1979). [c.30]

По технологии компании Танабе Сейяку , использующей бактериальные клетки, иммобилизованные в полиакриламидный гель (с временем полуинактивации 42 сут при 30°С или 17 сут при 40°С), общий выход 6-АПК составляет около 80% (I. hi-bata, 1980). На советском производстве употребляют пенициллинамидазу, иммобилизованную в полиакриламидном геле, модифицированном глутаровым альдегидом (П. С. Ныс, А. И. Кестнер, 1977). [c.30]

Подобное избирательное превращение может быть проведено в одну стадию в самых обычных условиях при 10—40°С в водной среде с использованием спе Фического фермента — пенициллинамидазы (см. гл. 1). [c.45]

С использованием иммобилизованной пенициллинамидазы связан еще один процесс инженерной энзимологии — получение [c.45]

Хорошо известно свойство белков связываться с полиэлек-тролитными носителями множественными солевыми связями. Особый интерес представляют комплексы, растворимые только при определенных значениях pH [113]. Однако обычно область осаждения таких комплексов растянута, в то время как для медицинского применения желательно иметь по возможности узкий интервал осаждения, расположенный в области физиологических значений pH. Пути к получению таких полимер-белковых соединений связаны с нестехиометрическими полиэлектро-литными комплексами, содержащими белок в дефектах структуры [114]. Так, ферменты пенициллинамидаза и алкогольде-гидрогеназа ковалентно связаны с одним из компонентов комплекса— поликатионом, а полианион защищает молекулы ферментов, разместившиеся в дефектах комплекса. В качестве полианиона была использована полиметакриловая кислота с Мш= =260 тыс., в качестве поликатиона — сополимер 4-винил-1-этил-пиридиния с 5—10% 4-ВИНИЛ-1-(2-гидроксиэтил) пиридином Мш = 40 тыс., к которому триазиновым методом был присоединен фермент. В зависимости от pH и ионной силы раствора комплекс, содержащий фермент, может существовать в трех состояниях — А, Б и В. Первое из них А — нестехиометрический комплекс с ядром стехиометрического состава и общим [c.191]

Упомянем еще одно крупномасштабное производство на базе иммобилизованной пенициллинамидазы, имеющее огромное значение для фармацевтической промышленности, та как оно обеспечивает исходным продуктом синтез аналогов природного пенициллина, отличающихся большей терапевтической ценностью. Это—синтез 6-аминопенициллановой кислоты [c.143]

Смотреть страницы где упоминается термин Пенициллинамидаза: [c.161] [c.206] [c.133] [c.236] [c.674] [c.214] [c.119] [c.120] [c.126] [c.214] [c.241] [c.467] [c.425] [c.239] [c.239] [c.353] [c.354] [c.264] [c.363] [c.366] [c.377] [c.14] [c.45] [c.36]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология