Аминокислоты выделение компоненты после

Первая часть этой задачи решается с помощью процессов гидролиза, происходящих под влиянием энзимов или сильных щелочей и кислот. Особенно хорошие результаты получаются при использовании в качестве гидролизующего агента 6 н. НС1. В этом случае для полного расщепления белковых молекул на аминокис-, лоты необходима обработка белка 6 н. НС1 при температуре 100° С в течение 10—15 ч. Вторая часть этой задачи — анализ образующихся весьма сложных смесей аминокислот — сопряжена с более серьезными трудностями. Обычные методы анализа подобных смесей, связанные с необходимостью количественного выделения всех компонентов смеси, очень трудоемки и приводят к большим погрешностям. Этим объясняются сильные расхождения — в несколько десятков процентов, — при анализе аминокислотного состава различных белков. Метод изотопного разбавления позволяет достигать точности до нескольких десятых долей процента. В этом случае к гидролизату добавляется одна из входящих в его состав аминокислот, меченная углеродом-14. После этого из раствора осаждается некоторое количество определяемой аминокислоты и проводится тщательная очистка ее от примесей. Зная [c.115]

Анализ с помощью метода изотопного разбавления позволяет избежать полного количественного разделения компонентов смеси. Исследуемый белок подвергают гидролизу, после чего в полученный раствор добавляют известное количество одной из аминокислот, предварительно меченной радиоактивным углеродом. (Заметим, что в данном случае молекулы не обязательно должны содержать метку в строго определенном положении). В растворе меченая аминокислота равномерно смешивается с аналогичной немеченой кислотой белка, после чего проводится частичное выделение из раствора исследуемой аминокислоты. Определив активность и массу выделенной порции аминокислоты по формуле (6.13), рассчитывают содержание данной аминокислоты в белке. [c.313]

Наиболее ценным вкладом в разрешение этого вопроса была разработка новых, хроматографических методов разделения аминокислот. Сама хроматография была изобретена русским ботаником М. Цветом в 1906 г. и получила такое название потому, что вначале ею пользовались для разделения пигментов. Цвет занимался выделением хлорофилловых пигментов из зеленых листьев. У него возникла мысль, что их можно быстро разделить, используя различную скорость их адсорбции на адсорбирующем материале. Сам он описывал это так Если раствор хлорофилла в петролейном эфире профильтровать через колонку адсорбента (я пользуюсь преимущественно карбонатом кальция, которым плотно набиваю узкую стеклянную трубку), то пигменты... разделяются, образуя на колонке ряд различно окрашенных зон более интенсивно адсорбирующиеся пигменты замещают более слабо адсорбирующиеся и оттесняют их дальше, вниз. Это разделение становится практически полным, если после пропускания раствора пигментов пропустить через адсорбирующую колонку еще и чистый растворитель. Подобно полосам светового спектра, на колонке из карбоната кальция разделяются различные компоненты смеси пигментов. .. которые можно теперь определить и качественно и количественно. Такую колонку я называю хроматограммой, а соответствующий метод — хроматографическим методом . [c.69]

Для опытов служили гидролизаты из 100—450 г казеина, желатины, клейковины и белков шелка. Гидролиз проводили в кипящей 20%-ной соляной кислоте избыток кислоты отгоняли в вакууме. После пропускания гидролизата через колонки катионита собирали фракции фильтрата (до 30 и более), которые затем подвергались анализу. В результате проведенных опытов было установлено, что при разделении аминокислот в гидролизатах белков путем фильтрования гидролизатов через колонки с катионитами и последующего вытеснения адсорбированных аминокислот аммиаком или разбавленными минеральными кислотами наблюдается лишь фракционирование смеси, иногда с выделением небольшой части каких-либо компонентов в виде чистых фракций. [c.137]

В процессе производства лизина кроме основного продукта полезное применение находят также побочные продукты и отходы. Так, после отделения культуральной жидкости в осадке остаются клетки бактерий — продуцентов, фосфаты и другие компоненты питательной среды, которые после их высушивания могут быть использованы в качестве кормовой белковой добавки. С другой стороны, технологические стоки и промывные воды после выделения монохлоргидрата лизина, содержащие в растворенном состоянии аминокислоты, другие ценные компоненты культуральной жидкости, остаточный лизин, объединяют и полученную смесь упаривают, а затем высушивают с наполнителем до влажности [c.279]

Метод Уги можно рассматривать как комбинацию реакции Пассерини с конденсацией Манниха. Для получения пептидных фрагментов проводят в одну стадию, без выделения промежуточных продуктов, взаимодействие N-ациламинокислоты (I), замещенного амина (II), альдегида (III) и изонитрила (IV) (производного аминокислоты или пептида). Сначала из четырех компонентов образуется неустойчивый продукт присоединения V, который спонтанно и очень быстро перегруппировывается внутримолекулярно по реакции 1-го порядка через пятичленный промежуточный цикл в N-замещенное производное пептида VI. После отщепления R, получают желаемый пептид VII. [c.163]

В древесине арабиногалактан находится преимущественно в свободном состоянии. Однако он способен взаимодействовать с другими компонентами древесины с белками образует гликопроте-иновый комплекс, с лигнином - лигноуглеводный комплекс. Наличие химических связей углеводной компоненты с белком и лигнином достоверно было доказано выделением соответствующих фракций и идентификацией в них аминокислот после кислотного гидролиза и ароматической составляющей [10]. [c.331]

ДО 8. 5-Гиппурилтиогликолевая кислота реагирует с глицином в присутствии азотнокислого серебра, причем максимальный выход гинпурилглицина достигает 85% при pH 6 при pH 8,1 выход составляет только 30%. С теми же компонентами в присутствии ацетата свинца выход равен 80% при pH 8 и 9% при pH 7 [363]. Обычно реакцию проводят путем растворения тиолового эфира а-ациламинокислоты и ацилируемой аминокислоты в водной среде, после чего прибавляют по каплям 1 п. водный раствор едкого натра и раствор соли металла (лучше всего азотнокислого серебра) одновременно или поочередно, чтобы поддерживать необходимое значение pH. Применялись также и буферные растворы. Для завершения реакции реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре около 15 час. Если металл переходит в осадок в виде соли (например, серебряной соли тногликолевой кислоты), то последнюю отфильтровывают. В противном случае металл катализатора осаждают сероводородом и удаляют его до выделения промежуточного соединения при получении пептида. [c.275]

В ранних работах для выделения углеводов из продуктов щелочного гидролиза гликонротеинов с успехом использовали осаждение гетеросахарида прибавлением ацетата свинца и аммиака [1, 3, 4, 21], Осаждение повторяли несколько раз, чтобы удалить аминокислоты, образующиеся с низкими выходами. Полноту отделения пептидного компонента от углеводного фрагмента в примененных условиях щелочного гидролиза можно контролировать по содержанию азота в получаемых продуктах. Для дифференциального осаждения из водного раствора углеводсодержащего гидролизата (после щелочного или ферментативного гидролиза) часто применяли метанол, этанол или ацетон [12, 21, 22]. Розевеер и Смит [6] подробно исследовали относительные количества гликопептидов и других пептидов, осаждаемых различными объемами спирта из водного раствора продуктов расщепления [c.242]

Иммобилизовалпые овомукоиды. Мукоиды, впервые обнаруженные в синовиальной суставной жидкости и стекловидном теле глаза, были выделены в отдельную группу по общему признаку все они представляют собой ковалентно связанные белково-углеводные комплексы (по некоторым версиям термина — еще и не осаждающиеся из подкисленного раствора). Гликопротеид, выделенный из белка куриных яиц, называется овомукоидом. Он не коагулирует при нагревании и поэтому может быть сравнительно легко отделен от других белков. После удаления денатурированных яичного альбумина и яичного глобулина овомукоид осаждают из фильтрата этанолом. Овомукоид содержит около 20 % углеводов его К-концевой аминокислотой является аланин, а С-концевой — фенилаланин. В состав углеводного компонента входят остатки К-ацетилглюкозамина, маннозы и галактозы в соотношении 7 3 1 [38, с. 296]. [c.546]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология