Методы разделения пигментов

Основоположником хроматографического анализа является русский ботаник Михаил Семенович Цвет, изучавший состав хлорофилла. Он настойчиво искал эффективный метод разделения сложных смесей органических соединений, которые извлекал неводными растворителями из свежих и сухих листьев растений. Анализируя причины неполной экстракции, М. С. Цвет высказал предположение, что полному извлечению пигментов препятствует их адсорбция тканью листа. Опыты с различными порошкообразными сорбентами подтвердили это—при пропускании растворов сложных смесей через заполненную мелом колонку они разделялись на отдельные окрашенные зоны. [c.5]

Разработанная М. С. Цветом методика количественного хроматографического разделения пигментов до настоящего времени осталась в основных чертах без изменения и широко применяется в физиологических и биохимических исследованиях. Поэтому авторы руководства считают целесообразным привести описание классического анализа методом сорбционной молекулярной хроматографии на примере разделения пигментов зеленых листьев растений, предложенном основоположником хроматографии М. С. Цветом. [c.199]

Разделение пигментов зеленых листьев растений методом адсорбционно-жидкостной хроматографии [c.295]

Хроматографический анализ. При химическом исследовании хлорофилла большие трудности встречаются при разделении и очистке близких по свойствам растительных пигментов. Они не перегоняются и не разделяются перекристаллизацией. Кроме того, они весьма легко изменяются при химической обработке. Поэтому очень большое значение приобрел особый метод разделения этих пигментов, изобретенный в 1906 г. русским ботаником М. С. Цветом (1872—1919) и названный им хроматографическим адсорбционным анализом. [c.590]

Хлорофилл — зеленый пигмент растений — состоит из смеси нескольких пигментов. При пропускании вытяжки из зеленого листа через сорбционную колонку происходит разделение пигментов в соответствии с избирательной адсорбируемостью, при этом химический состав пигментов не изменяется, что и позволяет использовать хроматографический метод для препаративного получения отдельных пигментов в чистом виде. [c.28]

Эти закономерности адсорбции веществ из многокомпонентных растворов легли в основу хроматографии — метода разделения и анализа многокомпонентных смесей. Впервые этот метод был применен М. С. Цветом (1903 г.) для разделения на составные компоненты сложного растительного пигмента— хлорофилла. Пропуская раствор хлорофилла через слой оксида алюминия, помещенного в стеклянную трубку (колонку), М. С. Цвет обнаружил, что отдельные компоненты этого сложного вещества адсорбируются на разных уровнях по высоте колонки. В верхней части накапливается компонент, обладающий наибольшей адсорбционной способностью (рис. 68 а, компонент С), последующие зоны соответствуют компонентам со все более уменьшающейся адсорбционной способностью. Так как отдельные компоненты хлорофилла окрашены, то эти зоны легко различить по окраске. Такой окрашенный столбик адсорбента М. С. Цвет назвал хроматограммой, а сам метод анализа — хроматографическим, [c.176]

Методы хроматографии преимущественно применяют при анализе смесей и определении (а также выделении) примесей. Общий метод разделения газовых смесей, открытый русским ботаником М. С. Цветом (1903 г.), получил в настоящее время очень широкое применение и называется хроматографией. М. С. Цвет, изучая окраску различных растительных вытяжек красящим веществом хлорофиллом (сложный растительный пигмент), впервые применил для разделения окрашивающих пигментов растений своеобразный метод, который назвал хроматографией (греческое хромое — цвет, графо — пишу). В этом методе смесь (жидкий раствор, смесь газов) движется под влиянием какого-либо воздействия по адсорбенту. Так как различные [c.195]

Оценка разделения. Для определения состава пигмента листьев растений Цвет применил метод разделения на колонке, заполненной СаСОд. Он получил окрашенные зоны на сухом наполнителе, которые разделил механически, удалив наполнитель из колонки и разрезав его. Такой способ получения внутренней хроматограммы не типичен для современной техники проведения колоночной хроматографии. Его применяют лишь в особых случаях. Для удобного выделения вещества работу проводят с разъемными колонками или с колонками, снабженными пластмассовыми шлангами, отделяемыми после окончания процесса разделения. В случае разделения окрашенных веществ в самой колонке можно провести качественную оценку разделения (по значению определить ширину зоны и провести полу количественное определение концентраций растворов (применяя эталоны). Для количественного определения необходимо проэкстрагировать вещество из механически выделенных из колонны фракций и затем определить его содержание при помощи какого-либо метода. [c.353]

Многочисленными опытами он показал, что хлорофилл адсорбируется из петролейного эфира очень многими веществами органической и неорганической природы. М. С. Цвет установил также, что пигменты листьев растений обладают неодинаковой адсорби-руемостью на различных адсорбентах в присутствии различных растворителей. Этот важный экспериментальный факт был положен им в основу дальнейших поисков новых эффективных методов разделения пигментов. [c.13]

Хроматографический метод разделения и анализа сложных смесей был разработан в 1903—1906 гг. русским ботаником М. С. Цветом, впервые использовавшим его для разделения растительных пигментов. Характеризуя принцип своего метода, Цвет писал При фильтрации смешанного раствора через столб адсорбента пигменты... располагаются в виде отдельных, различно окрашенных зон. Подобно световым лучам Б спектре, различные компоненты сложного пигмента закономерно распределяются друг за другом в столбе адсорбента и становятся доступными качественному определению. Такой расцвеченный препарат я назвал хроматограммой, а соответствующий метод анализа— хроматографическим методом . [c.59]

М. С. Цветом, который впервые применил ее для разделения пигментов зеленого листа. В этом методе в колонку с адсорбентом вводят смесь адсорбирующихся веществ и затем пропускают поток растворителя (или газа-носителя), который перемещает вещества вдоль колонки с разной скоростью в зависимости от их адсорбируемо-сти. Таким образом можно разделить и проанализировать очень сложные смеси, например смеси нефтяных газов и др. [c.171]

РАБОТА 89. РАЗДЕЛЕНИЕ ПИГМЕНТОВ ХЛОРОФИЛЛА МЕТОДОМ АДСОРБЦИОННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ [c.257]

Взаимоотношение между жидкостями, движущимися пр волокнистой структуре бумаги или по тонкой пленке порошка, удерживаемой плоской поверхностью стекла, является функцией взаимодействия коэффициентов адсорбции и распределения, вовлеченных в процесс диффузии. В простейшем виде разделение пигментов чернильного пятна, распространяющегося по фильтровальной бумаге, иллюстрирует ту роль, которую играют эти коэффициенты при образовании диффузионного пятна. Образование таких пятен с применением специально подобранной бумаги или тонкопленочных адсорбентов составляет основу хроматографии этого типа. Применение бумажной и тонкослойной хроматографии позволяет работать с веществами, которые нельзя разделить и очистить другими способами. До сих пор не выявлены полностью возможности этого метода для качественного анализа пород и минералов. [c.263]

Открыл этот метод русский ботаник Михаил Семенович Цвет (1872—1919). Исследуя пигменты растений. Цвет пропустил ра.-т-вор смеси очень мало различающихся по цвету пигментов через трубку, заполненную адсорбентом — порощкообразным карбонатом кальция, и промыл затем адсорбент чистым растворителем. Отдельные компоненты смеси при этом разделились и образовали цветные полосы. Цвет опубликовал статью с описанием открытого им метода разделения, который он назвал хроматографией ( цветописью ) . [c.129]

Ионообменная хроматография — один из видов хроматографического анализа, основы которого были созданы в 1903— 1906 гг. Цветом первоначально с целью разделения пигментов группы хлорофилла. Современная хроматография — это метод разделения веществ (молекул или ионов), основанный на различиях в скорости переноса растворенных веществ в системе двух фаз, одна из которых подвижна компоненты перемещаются через систему только находясь в подвижной фазе, в направлении ее движения. Компоненты, распределяющиеся предпочтительно в неподвижной фазе, двигаются медленнее компонентов, находящихся в основном в подвижной фазе. Таким образом, различия в равновесном распределении компонентов между двумя фазами и в кинетике обмена обуславливают различия в линейных скоростях движения компонентов и в конечном счете ведут к их разделению. [c.686]

В основе классического адсорбционного метода разделения пигментов по М. С. Цвету лелсат различия в степени адсорбции данных веществ адсорбентом и растворимости их в соответствующих растворителях. Адсорбент— твердое вещество, способ,ное удерживать на своей поверхности молекулы. Если смесь пигментов листа и растворителей пропустить через колонку с пористым материалом, то отдельные пигменты будут располагаться на разных уровнях колонки, давая своеобразный спектр распределения, соответствующий их адсорбционному сродству. Чем слабее сродство пигмента к адсорбенту, тем ниже пигмент будет концентрироваться. Последующим промыванием чистыми растворителями получают хроматограмму с четким разделением адсорбированных веществ на зоны. [c.95]

В качестве одной из фаз можно использовать порошок или мелкие частицы ими заполняют вертикальную колонку или наносят их тонким слоем на стеклянную пластинку. Все эти методы называются хроматографическими— термин, предложенный М. Цветом, который впервые в 1903 г. описал разделение пигментов, присутствующих в листьях растений (хлорофилла и каротинов). Пропуская пигменты, растворенные [c.159]

Исследовйние красящих веществ столовой свеклы производилось методом тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии. Из большого числа испытанных адсорбентов четкое разделение пигментов в тонком слое дал тальк, при растворителе — вода или вода — метанол (3 1). Полученные пятна пигментов элюировали водой и элюаты были подвергнуты спектро-фотометрированию в видимой области света (рис. 92). Фиолетовые пигменты № 1 и 2 идентифицированы по максимуму поглощения 537 нм (ЕЙ — [c.392]

Принцип действия и разделение. Первая хроматограмма М. Цвета имела важные черты, роднящие ее с методом тонкослойной хроматографии. Цвет элюировал свои колонки до визуально обнаруживаемого разделения пигментов по окрашенным полосам в колонке, после чего он осуществлял свой анализ , отмечая размеры и положение полос в колонке. Для извлечения материала из колонки он с помощью деревянного поршня выталкивал столбик адсорбента из колонки, вырезал интересующие его зоны из общего объема адсорбента и экстрагировал соединение. Хроматографическая среда здесь использовалась для визуальной регистрации разделения — не нужно было собирать и анализировать ни жидких, ни газовых фракций, а также не нужно было записывать сигналы детектора — химикам достаточно было лишь бегло взглянуть на колонку, чтобы увидеть происходящее. [c.555]

На различной сорбируемости веществ одним и тем же сорбентом основан метод хроматографического анализа, предложенный русским ученым М. С. Цветом. Извлекая бензином смесь пигментов из зеленых листьев, М. С. Цвет пропускал раствор через стеклянную трубку с углекислым кальцием и наблюдал, как отдельные пигменты, последовательно адсорбируясь в колонке, образуют ряд цветных колец, т. е. хроматограмму. Поэтому метод разделения смесей на отдельные компоненты с помощью адсорбции получил название хроматографического (стр. 458). [c.216]

Наибольшее практическое значение приобрела про-явительная хроматография, открытая в 1903 г. М. С. Цветом, который впервые применил ее для разделения пигментов зеленого листа. В этом методе в колонку с адсорбентом вводят смесь адсорбирующихся веществ и затем пропускают поток растворителя (или газа-носителя), который перемещает вещества вдоль колонки с разной скоростью в зависимости от их адсорбируемости. Таким образом можно разделить и проанализировать очень сложные смеси, например смеси нефтяных газов и др. [c.212]

Когда М. Цвет [1] в начале нашего столетия разделил смеси растительных пигментов на несколько окрашенных компонентов па колонке, заполненной адсорбентом, это означало первую ступень развития метода, который в настоящее время стал одним из наиболее важных современных аналитических методов разделения. Колоночная хроматография является физическим методом разделения, в котором разделяемые компоненты распределяются между неподвижной и подвижной фазами. В опытах Цвета стационарной фазой был твердый адсорбент, а подвижной фазой жидкость пигменты распределялись между растворителем и адсорбентом в соответствии с различием в коэффициентах распределения, и в результате проходили через колонку е разными скоростями. [c.65]

Русский ботаник М. С. Цвет (1872—1919) создал так называемый хроматографический метод анализа, впервые применив его для разделения пигментов растений. Благодаря этому методу за последние 10—15 лет достигнуты большие успехи в химии витаминов, гормонов, энзимов и алкалоидов. В основу этого метода положено свойство растворенных веществ образовывать адсорбционные соединения с различными минеральными и органическими твердыми веществами. При протекании раствора в строго определенном направлении через колонку, заполненную адсорбе уом, отдельные компоненты раствора располагаются слоями в направлении убывающего адсорбционного сродства исследуемых веществ к адсорбенту. Этот тонкий метод может применяться для следующих целей 1) разделения сложной смеси на ее компоненты 2) определения степени однородности химических соединений 3) выделения веществ из весьма разбавленных растворов 4) определения идентичности двух веществ и контроля технических продуктов 5) количественного определения одного или нескольких компонентов 6) определения молекулярной структуры. [c.544]

Хроматография как общий метод разделения была открыта М. С. Цветом в начале XX в. Он предложил хроматографический метод разделения в жидкой фазе и описал его применение для анализа хлорофилла растений. На основании всего предыдущего, — писал М. С. Цвет, — выясняется возможность выработать новый метод физического разделения веществ в органических жидкостях. В основе метода лежит свойство образовывать физическпе и адсорбционные соединения с различнейшими минеральными и органическими твердыми веществами . Подобно световым лучам в спектре, различные компоненты сложного пигмента закономерно распределяются друг за другом в столбе адсорбента и становятся доступными качественному и количественному определению. Такой расцвеченный препарат я назвал хроматограммой, а соответствующий метод анализа — хроматографическим методом (М. С. Цвет. Хроматографический адсорбционный анализ.—М. Изд-во АН СССР, 1945, 273 с.). — Прим. ред. [c.11]

Из числа выдающихся открытий в области биохимии, сделанных русскими учеными и их школами, следует назвать открытие витаминов (Н. И. Лунин, 1880) и проферментов (И. П. Павлов и Н. П. Шеповальников, 1899), разработку хроматографического метода разделения пигментов и других близких по [c.10]

Начало хроматографии было положено, по-видимому, в 1850 г. в работе немецкого химика, специалиста в области производства красителей Рупге, который описал процесс разделения веществ, известный в настоящее время как бумажная хроматография или хроматография на бумаге. В 1906 г. Цвет [48] описал первый метод колоночной хроматографии, в настоящее время называемой сорбционной проявительной хроматографией, которую он применил для разделения пигментов растений. В это время и появился термин хроматография (в буквальном переводе с греческого цвето-писание ). Конечно, со времени открытия Цвета хроматография очень широко применялась к бесцветным материалам, так что, этот термин находится в некотором противоречии с современным содержанием выражаемого им понятия. За работой Цвета с адсорбционными колонками последовали многочисленные работы по усовершенствованию этого метода. К их числу относятся работы Винтерштейна и сотрудников [34] и Цехмейстера [52 ]. Эти исследователи применили жидкостно-адсорбционный метод длл разделения сложных смесей терпенов и каротенов. В результате этих первоначальных работ с природными материалами жидкостноадсорбционная хроматография стала во многих лабораториях органической химии обычным методом разделения реакционных смесей и очистки продуктов. [c.25]

Явление адсорбции газов и паров широко используется для очистки смесей от вредных примесей, для разделения смесей и их анализа. Получила большое развитие газовая хроматография, основанная на открытом М. С. Цветом (1903 г.) методе разделения смесей. В одном из вариантов этого метода — проявительной хроматографии— поток растворителя или несущего газа, содержащего смесь различных компонентов, двигается по адсорбенту. Каждый из комноиентов смеси отличается от других своей адсорбируемостью. Поэтому по мере движения смесь изменяет свой состав, и комионенты разделяются. Название хроматография связано с тем, что М. С. Цвет впервые использовал этот способ для разделения окрашивающих пигментов растений. [c.225]

В 1903 г. русский ботаник М. С. Цвет предложил новый метод разделения сложных смесей веществ, названный им хроматографией (от греческого слова хроматос — цвет). Этот метод в соответствии с современной терминологией представлял собой жидкостную адсорбционную хроматографию на колонке, заполненной карбонатом кальция,разделяли пигменты растений. Подвижной фазой служил петролейный эфир. М. С. Цвет создал проявительный нариант хроматографии и заложил основы многоступенчатого сорбционного разделения сложных смесей, развил фронтальный вариант, связал все виды хроматографии единой теорией, впервые четко показал слоисный характер взаимодействия в системе сорбат — сорбент— растворитель и предложил способы смещения сорбционных равновесий. Однако предложенный метод практически не развивался до 30—40-х годов. [c.582]

Из сравнения А тл Б (фиг. 6) видно, что результаты, полученные этими двумя методами, достаточно хорошо согласуются. Две полосы хлорофуцина расположены в оранжевой и красной областях с максимумами у 575,5 и 627 м >. в метаноле и у 581 и 631 в 80-процентном ацетоне. На фиг. 6, В, видна также полоса в синей области спектра (у 446 м х), почти в 10 раз большей интенсивности, чем длинноволновые максимумы. Отношение интенсивностей этих полос, таким образом, гораздо больше, чем у хлорофилла Ь (для которого это отношение равно 3), не говоря уже о хлорофилле а, у которого обе полосы почти одинаковы по интенсивности (см. табл. 2 и 10). Однако общая картина спектра имеет один и тот же характер. Вассинк и Керстен [61] и Танада [71] дают аналогичные кривые поглощения для фракции хлорофилла с, полученной при хроматографическом разделении пигментов диатомовых водорослей. В метаноле они наблюдали три максимума поглощения, около 450, 590 и 635 причем первая полоса была почти в 10 раз интенсивнее двух других (см. стр. 30). [c.21]

Метод хроматографии был впервые использован русским ученым М. С. Цветом в 1903 г. для разделения компонентов, входящих в состав растительных пигментов. Поскольку М. С. Цвет имел дело с окрашенными веществами, он и назвал этот метод разделения хроматографией ( hromatos — цвет). Этот термин в настоящее время прочно укоренился, несмотря на то что хроматографические методы применяются для разделения и бесцветных веществ. [c.92]

Хроматографический метод тонкого разделения пигментов по Цвету позволил обнаружить новые природные изомеры каротина. Так, А. Винтер-штейн [16] выделил из плодов гонокариума четвертый изомер каротина, названный 8-каротин. [c.43]

Естественно, что полученный экстракт всегда содержит целую гамму веществ, поэтому далее возникает трудоемкая задача выделения из экстракта индивидуальных соединений. При решении этой задачи наибольший эффект достигается при применении препаративной колоночной хроматографии. Колоночная хроматография в различных ее модификациях в химии природных соединений является незаменимым, широко используемым экспериментальным методом разделения и очистки веществ — это буквально палочка-выручалочка. Здесь следует отметить, что этот метод сейчас весьма распространен и в классической органической химии, но пришел этот метод из химии природных соединений в 1904 году ботаник М.С.Цвет впервые таким способом разделил пигменты листьев растений. Обычно в качестве носителя (твердой фазы) используют силикагель или окись алюминия — они [c.11]

Исследование пигментов желчи проводилось еще во время алхимиков первым из исследователей, добившимся известного успеха в этой области, был опять-таки Берцелиус. Он изучил методы разделения и очистки пигментов желчи на основании его работ Тидеману и Гмелину [17] удалось найти характерную цветную реакцию для пигментов желчи. Проба Гмелина является самой чувствительной среди всех других, известных для этих веществ, [c.221]

Разработаны методы разделения на смоле поликлар АТ антоцианов земляники, ревеня и малины, не требующие повторной хроматографии [91]. Колонки готовят по методике, приведенной в раооте [90]. Пигменты земляники разделяют на колонке (5Х Х40 см) в подкисленном (0,1% НС1) метаноле пигменты ревеня — на колонке (1,5X35 см) в подкисленном (0,1% НС1) 30%-ном этаноле или на колонке (1,5X70 см) в подкисленном [c.131]

Далее он был разработан Вильштеттером и Штолем [7, 8], а также и другими исследователями. Хроматографический анализ, несомненно, более быстрый и многосторонний из этих двух методрв, был изобретен в 1906 г. Цветом Ему посвяш ено несколько монографий [12, 20]. Снециальное применение хроматографии к растительным пигментам изложено в ряде работ [15 — 19,51, 102, 104, 109]. Мейер [16] и Хэпсон [17] находят, что во время хроматографического анализа может произойти алломеризация хлорофилла (см. главу XVI), и поэтому считают, что метод Вильштеттера и Штоля, основанный на различной растворимости пигментов, предпочтительнее адсорбционного. Имеется описание простого метода разделения, основанного на сочетании хроматографии с применением несмеши-ваюш ихся растворителей [11]. [c.402]

Термин хроматография от греческих слов хроматос — цвет и графо — пишу) был предложен русским ученым М. С. Цветом в 1903 г. для метода разделения растительных пигментов. Позднее он использовал этот метод для разделения неокрашенных веществ. [c.8]