Частичное фракционирование

Малоселективными являются классические методы высаливания белков, когда растворимость белка понижается путем добавления соли, чаще всего сульфата аммония, в результате чего начинается выпадение белка из раствора. Так как растворимость различных белков зависит от концентрации соли несколько по-разному, то с помощью сульфата аммония производится частичное фракционирование белковых смесей. Когда-то это был почти единственный известный прием разделения белковых смесей. Он требовал бесчисленного повторения процедуры высаливания белка солями. Первые производства чистых белковых препаратов, например белков кровяной сыворотки или чистых протеолитических ферментов, нашедших значительные применения в медицине, были целиком основаны на высаливании белков солями. Одна пз трудностей этой технологии заключалась в необходимости избавляться от больших количеств прибавленных солей путем диализа. Поэтому в дальнейшем было предложено заменить осаждение белков солями осаждением с помощью органических жидкостей — спирта и ацетона. От последних можно избавиться путем испарения, что [c.132]

Метод центрифугирования. Известно, что сила тяготения, действующая на частицу, пропорциональна ее массе. Поэтому, например, под действием силы тяготения в атмосфере Земли происходит частичное фракционирование газов относительное содержание водорода и гелия в верхних слоях атмосферы выше, чем в нижних. [c.43]

Метод масс-термографии основан на тех же принципах, что и метод масс хроматографии. В этом случае образец помещают вблизи области ионизации масс-спектрометра и постепенно повышают температуру. При этом происходят испарение веществ и их частичное фракционирование. Если прибор настроен на один ион (селективное ионное детектирование), то получают кривые испарения, соответствующие данному иону. Площади под кривыми пропорциональны количеству детектируемого вещества. [c.194]

Растворы едкого натра способны не только вызывать набухание целлюлозы, но также частично переводить ее в раствор. На этой их способности основан метод частичного фракционирования целлюлозы и определения ее качества (см. раздел 1.1.1.). [c.45]

Часто используемым методом является реэкстракция фенольных соединений полярными растворителями, которые ограниченно смешиваются с водой. Этим приемом, позволяющим ие только извлечь вещества из водных растворов, но и произвести их частичное фракционирование, в настоящее время широко пользуются для выделения фенольных гликозидов [c.136]

Введение пробы может сопровождаться вредными явлениями потерей пробы вокруг иглы шприца или вообще течью в дозирующем устройстве. Если одновременно с введением пробы происходит частичное фракционирование, то потери в результате течи не пропорциональны составу всей пробы. [c.62]

Наряду с использованием методов фракционного растворения и осаждения в последние годы опубликован ряд статей, в которых для фракционирования целлюлозы и ее эфиров использован метод гель-фильтрации. Фракционированию подвергали целлюлозу, растворенную в кадоксене а также нитраты целлюлозы, растворенные в тетрагидрофуране - В качестве носителя использовали полиакриламид и полистирол Следует, одна со, отметить, что опубликованные данные не позволяют сделать вывод о характере всей кривой МВР. Метод гель-фильтрации представляет собой пока лишь метод частичного фракционирования целлюлозы или нитрата целлюлозы. [c.37]

Причиной различной способности белков вытеснять подвижные ионы может быть неодинаковое количество и природа заряженных групп в молекулах разных белков, а также влияние общих размеров и конфигурации белковой молекулы на прочность образующихся связей. Таким образом, уже на этой стадии происходит частичное фракционирование белковой смеси. Однако наиболее эффективным этапом разделения является следующая стадия процесса — элюция белков. Элюция достигается обычно введением раствора с высокой концентрацией солей (хлористого натрия, например). Ионы соли вытесняют связанные белки, причем в первую очередь элюируются белки, обладающие меньшим сродством к ионообменнику. В результате начальный эффект разделения белков резко усиливается. Наконец, можно еще больше усилить фракционирование, производя элюцию раствором с постепенно (или ступенчато) нарастающей концентрацией соли (градиентная элюция). Собирая элюат небольшими порциями, можно весьма полно разделить фракции. Для зтого широко применяют автоматические приемники элюата. [c.28]

В промышленности тетралин очищают (частично) фракционированной перегонкой при этом отделяется большая часть декалина и других примесей. Чистый тетралин можно получить сульфированием технического продукта серной кислотой при умеренном нагревании, кристаллизацией натриевой соли [c.586]

Помимо ряда вирусных нуклеиновых кислот, большинство выделенных полирибонуклеотидов, бесспорно, представляют собой сложные смеси, содержащие полимеры с различной длиной цепи, нуклеотидной последовательностью и составом оснований (присутствие или отсутствие минорных оснований). Существует ряд приемов для частичного фракционирования, однако, пока не разработаны удовлетворительные методы характеристики, трудно определить степень чистоты или гомогенности рибонуклеиновых кислот. В основу оценки чистоты транспортных РНК, этих сравнительно низкомолекулярных полирибонуклеотидов, может быть положена их ферментативная реакция с аминокислотами (через аминоациладенилаты), что, конечно, позволяет оценить и их биохимическую однородность. [c.365]

Частичное фракционирование рибонуклеиновых кислот может быть также осуществлено с помощью противоточного распределения [c.366]

Условием применимости метода [131] является наличие для каждого из компонентов области индивидуального поглощения с приемлемым отношением сигнал шум. При этом реальное число компонентов в анализируемых смесях не превышает т 3. Объем вычислений можно сократить, если вместо отношения рассматривать разности спектров до и после частичного фракционирования [132]. [c.93]

Происходят ли в природе процессы разделения и концентрирования изотопов водорода Да, немного. В водах рек и проточных озер отношение О И мало меняется и в среднем равно 1 6800. В отдельных образцах снега оно снижается до 1 9000, а в морской воде с высоким солесодержанием повышается вплоть до 1 5500 выше оно и в некоторых арктических льдах. Это различие обусловлено частичным фракционированием изотопных разновидностей воды при испарении и замерзании из-за некоторого различия в упругости паров и точке замерзания. Предполагают, что в глубочайших океанических впадинах придонные слои обогащены дейтерием. [c.82]

Самым интересным для инженера-химика аспектом диффузии в полимерах является, по-видимому, возможность применять мембраны для разделения компонентов смесей газов и жидкостей. Мембраны действительно проявляют селективную проницаемость, благодаря чему и удалось продемонстрировать частичное фракционирование смесей. Однако анализ, который был проведен с точки зрения инженерных приложений, показал, что в общем такое разделение едва ли будет экономичным, поскольку проницаемости низки, и потребовались бы огромные площади мембран для осуществления промышленных процессов. Вероятно, использование полых полимерных волокон могло бы изменить эту ситуацию. Такие волокна были разработаны в последнее время для применения при удалении солей из рассолов посредством обратного осмоса полые волокна могут обеспечить площадь поверхности мембраны свыше 32 808 mVm объема оборудования. [c.62]

Ввиду применения малых количеств неподвижной жидкости следует вводить очень небольшие пробы — около 1 мкг, для чего вводят обычную по величине пробу и большую часть ее выбрасывают в атмосферу при соотношении от 100 1 до 1000 1 с помощью делителей потока, установленных между дозатором и колонкой. Такой метод дает не очень воспроизводимые результаты, особенно в случае высококипящих соединений, поскольку проба может подвергнуться частичному фракционированию еще до входа в колонку. Поэтому ввод проб и обработка колонки неподвижной жидкостью являются основными проблемами, которые еще не решены до конца. [c.50]

Показано, что методом вымораживания целесообразно концентрировать органическое вещество речных вод высокой цветности в 10—13 раз при более высокой степени концентрирования наблюдается частичное фракционирование растворенных органических веществ за счет высаливания полимерных высокомолекулярных соединений. [c.151]

Количеств, определение труднолетучих в-в проводят в системе прямого ввода, детектируя их по одному или неск. ионам, характерным для исследуемого соединения. По мере плавного повышения т-ры испарителя происходит испарение и частичное фракционирование исследуемых в-в. Т. обр., для каждого в-ва получают кривую испарения, площадь под к-рой прямо пропорщюнальна кол-ву соед., внесенного в масс-спектрометр. Абс. чувствительность метода, наз. методом интегрирования ионного тока, 10 г. Достоинство метода - отсутствие необходимости предварит, очистки исследуемых в-в. [c.663]

В случае смесей из нескольких компонентов для получения спектров чистых составных частей (при отсутствии предварительной информации об их числе или составе) можно применять частичное фракционирование в совокупности с вычитанием спектров индивидуальных веществ [125]. В этом способе используется отношение спектров частично разделенных компонентов. Процесс разделения может состоять из частичного испарения смеси, пропускания ее через твердый адсорбент либо из частичной экстракции или осаждения одного компонента. Нет необходимости в высокой степени разделения и в знании поведения отдельных веществ. Первое, что нужно сделать в этом случае,- записать спектр смеси (рис. 5.22, а), позволить ей частично испариться и вновь записать спектр, с помощью ЭВМ получить отношение двух спектров, определить число плоских областей различной высоты, равное числу компонентов (рис. 5.22, б), и, наконец, математически установить спектр каждой из составных частей. Результат такого анализа смеси толуола, циклогексана и гексана показан на рис. 5.23. Эту процедуру удобнее всего проводить на интерференционном спектрофотометре с ЭВМ. Общий метод определения спектров чистых компонентов из спектров смесей бьш описан и использован для анализа полимеров Кёнигом и др. [158]. [c.195]

Для нахождения этих областей и одновременного использования их для количественного анализа смеси Хиршфельд [131] предложил рассматривать отношения оптических плотностей смеси до и после ее частичного фракционирования. Фракционирование, изменяющее исходное соотношение концентраций компонентов в смеси, может быть осуществлено частичной упаркой, перегонкой, экстракцией, неполным хроматографическим разделением и т. п. На графике 0/0/ = /(Х) (где О и )/ — оптические плотности смеси до и после фракционирования) области индивидуального поглощения выглядят как горизонтальные участки. Повторяя процедуру фракционирования не менее т—1 раз, получают систему уравнений Щ Решение этой системы позво- [c.92]

Когда варочное время увеличивалось до 22 ч, образовывался сульфированный тиолигнин лишь с 4,6% общей серы. Повышение температуры до 150°С в течение 8 ч дало продукт с 4,9% серы и 16,3 /о метоксилов. Это повышенное содержание метоксилов могло быть результатом частичного фракционирования, поскольку сульфоновая кислота была выделена посредством ее Р-нафтиламиновой соли. [c.476]

Кольтгоф и Гутмахер [76] попытались фракционировать сополимер стирола с бутадиеном (ЗВК), используя колонку из активированного угля (печная сажа филблэк-А ) и метод фронтального анализа Тизелиуса. Они осуществили частичное фракционирование, обнаружив при этом, что сорбируется преимущественно высокомолекулярное вещество. [c.330]

Разработан метод фракционирования ДНК бактерий и животных, основанный на взаимодействии с фиксированными на кизельгуре синтетическими или природными полинуклеотидами в виде соли с гексамминкобальт(П) [95]. Для этих целей используют денатурированную ДНК, поли-А, поли-1, поли-С, поли-U. Взаимодействие между компонентами смеси и иммобилизованным полинуклеотидом не связано с их комплементарно-стью и зависит от присутствия диоксана. Элюирование проводят в линейном градиенте концентрации диоксана в буферном растворе. В этих условиях на колонке с поли-1 удалось разделить комплементарные нити денатурированной ДНК Е. соИ, а на колонке с ДНК из клеток животных было проведено частичное фракционирование тРНК и рРНК [95]. [c.77]

Источником получения ДНК обычно является ви-лочковая железа (тимус) телят, т. к. в ее клетках ядра составляют больше половины объема. Для получения РНК удобнее всего использовать дрожжи. Н. к. всегда тесно связаны с белками в нуклеопротеидных структурах. Для их освобождения проводят денатурацию белков добавлением к взвеси клеток (предварительно вскрытых путем разрушения их оболочки ) р-ра фенола высокой концентрации, а также нек-рых детергентов (напр., додецилсульфата) или хлороформа. Обычно фенольная депротеинизация ведется так, что фенола дается большой избыток и после отстаивания или центрифугирования образуются два слоя внизу — фенол, насыщенный водой, сверху — вода, насыщенная фенолом. Денатурированные белки сосредоточиваются в нижнем слое и у границы раздела, Н. к.— в верхнем водном слое, откуда их осаждают спиртом. При фенольной экстракции возможно частичное фракционирование Н. к. на ДНК (растворяется преимущественно при pH9) и РНК (растворима и при рН5). Однако полностью отделить ДНК и РНК друг от друга удается только дополнительным воздействием специфическими гидролитич. ферментами ДНК-азой и РНК-азой. Эти ферменты добьхваются из поджелудочной железы рогатого скота, подвергаются тщательной очистке и кристаллизации. Действуя ДНК-азой, разрушают ДНК и получают чистую РНК. С помощью РНК-азы очищают ДНК от РНК. После ферментативной обработки полученные продукты снова подвергают фенольной депротеинизации с последующим осаждением Н. к. спиртом. [c.189]

Метод фракционирования эфиров целлюлозы был впервые применен Сапожниковым з, который уже в 1890 г. осуществил фракционное растворение нитратов целлюлозы путем последовательной обработки различными растворителями. Сапожникову впервые удалось показать, что нитрат целлюлозы является физически и химически неоднородным проду(ктом. Метод фракционирования применил также Настюков при йсследовании препаратов окисленной целлюлозы. Для фракционирования целлюлозы могут быть применены только ее растворы в комплексных растворителях или в концентрированной фосфорной кислоте. Препараты -целлюлозы с более низкой степенью полимеризации, в частности целлюлоза вискозного волокна, могут быть расфракционированы и из щелочных растворов. Частичное фракционирование целлюлозы обработкой растворами щелочей разной концентрации и при различной температуре может быть применено, и для высокомолекулярных препаратов целлюлозы. Этот метод фракционирования целлюлозы был впервые предложен Роговиным и Нейман . Он основан на том, что растворимость целлюлозы в растворах щелочей изменяется при изменении концентрации щелочи и температуры, при которых проводится обработка. Путем последовательной обработки целлюлозы растворами едкого натра разной конЬ,еН трации (целлюлоза лучше всего растворяется в 10%-ном растворе едкого натра) при различной температуре указанным исследователям удалось полностью расфракционировать целлюлозу вискозного волокна (со степенью полимеризации 300—350), и частично расфракционировать препараты природной целлюлозы. [c.33]

Частичное фракционирование целлюлозы с высокой степень ю полимеризации и полное фракционирование более низкомолщу - [c.33]

Были предприняты также попытки частичного фракционирования полидиснерсных ДНК и одновременно измерялась дисперсия распределения у фракций. Она оказывается всегда несколько меньше, чем у исходного образца, хотя все процессы фракционн- [c.259]

Установки такого типа принципиально просты и перспективны, так как обеспечивают эффективное звлечолпс т частичное фракционирование (разделение компонентов). Наряду с этим они имеют следующие недостатки относительно большой расход угля на истирание, процесс фракциоипроваппя трудно регули- [c.37]

Иятоми и др. [42] исследовали распределение ДФФ-Рз2 у американского таракана. И в этом случае больше всего радиоактивности содержалось в кишке, а меньше всего — в нервной системе. Однако в этом случае мальпигиевы сосуды отличались значительной радиоактивностью. В этой работе было предпринято частичное фракционирование метаболитов, однако данные об их идентификации не приведены. [c.312]

Значительный интерес для характеристики качества целлюлозы наряду с определением содержания а-целлюлозы представляет определение растворимости целлюлозы в 8—10%-ном растворе NaOH при 0°С, так как в этих условиях растворяются фракции полисахаридов со степенью полимеризации до 250. Параллельное определение растворимости целлюлозы в 17,5%-ном растворе NaOH при 20°С и в 10%-ном растворе NaOH при 0°С, представляющее, по существу, частичное фракционирование целлюлозы, может полнее характеризовать свойства целлюлозы и, в частности, наличие в ней низкомолекулярных фракций, чем одно лишь определение содержания а-целлюлозы. [c.179]

Частичное фракционирование целлюлозы с высокой степенью полимеризации и полное фракционирование более низкомолекулярных препаратов может быть достигнуто также поатедователь-ной обработкой целлюлозы медноаммиачным раствором, содержащим пониженное количество меди, недостаточное для полного растворения целлюлозы. Фракционирование может быть проведено также изменением концентрации меди в растворе при последовательных обработках целлюлозы медноаммиачным рас- [c.52]

При ультрафильтрации растворов ультрафильтры, помещенные в стеклянную оболочку, опускаются в масляную баню. При этом часто возникают трудности, связанные с засорением и частичным фракционированием. Растворы ряда полимеров фильтруются легко, в то время как другие имеют тенденцию засорять фильтр. К первой группе принадлежат полистирол, полиметилметакрилат и полипропилен. Почти невозможно провести ультрафильтрацию высокоразветвленного полиэтилена, содержащего микрогели. Трементоцци [44], однако, это удалось осуществить путем последовательного фильтрования сначала на грубых фильтрах, а затем на все более мелких и, наконец, ультратонких. Очевидно, что прежде всего при этом удалялась высокомолекулярная фракция полимера. [c.395]

В манометре делаются постоянными отсюда находят разность упругости пара между жидкостью и каучуком. Концентрация жидкости в каучуке может быть вычислена из высоты жидкости в калибрированной трубке с поправкой на испарение. Главная экспериментальная трудность возникает в случае неполной однородности используемой жидкости, когда каждая перегонка жидкости вызывает частичное фракционирование такое положение сразу отражается на воспроизводимости результатов. Этот метод применялся Джи и Трилором для [c.140]

В других приборах камерного типа осуществляются процессы, описанные под названиями электрофоретической конвекции [304, 305] или электродекантации [176, 306, 307]. В этих методах белок электрофоретически движется по направлению к мембране, где он и концентрируется концентрированный раствор белка под влиянием конвекции оседает на дно. Если в прибор помещена смесь двух белков с разными изоэлектрическими точками, а величина рН раствора соответствует изоэлектрической точке одного из компонентов, то этот компонент передвигаться не будет, в то время как второй компонент будет перемещаться описанным выше образом ко дну аппарата. При конструировании такого аппарата [308] важно, чтобы горизонтальный путь белковых частиц (по направлению к мембране) был коротким прочие размеры аппарата должны быть относительно большими, что необходимо для повышения его емкости. Так как при использовании этого метода за один опыт можно выделить только один белок (или группу белков), то в случае сложных смесей требуется многократное повторение таких операций. Рассматриваемый прибор, однако, является относительно простым и дешевым. Емкость, прибора может быть сделана весьма большой разделяющая способность его также весьма значительна. Кирквуд и его сотрудники с успехом осуществили частичное фракционирование ряда смесей, состоящих из родственных друг другу белков с весьма близкими изоэлектри-.ческими точками [309 — 314]. [c.70]

Таблица 2 иллюстрирует изменение химического состава фаз при последовательном вымораживании 3 л воды истока р. Москвы до получения концентрата со степенью концентрирования 13. Характерно, что при лробном вымораживании pH фазы льда повышается, а pH концентрата понижается до 3,85 против исходного значения 4,31), что, по-видимому, связано с ростом концентрации органических кислот в маточном растворе. При дальнейшем вымораживании (степень концентрирования выше 10—13) наблюдается появление в концентрате темно-коричневого хлопьевидного осадка высокомолекулярных соединений. Очевидно, что дальнейшее концентрирование вымораживанием вряд ли целесообразно ввиду длительности операций и частичного фракционирования органических веществ за счет высаливания полимерных высокомолекулярных соединений. [c.149]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология