Непрямое Уф-детектирование в КЭ

На этом основании некоторые авторы практически все методы с электрохимическим способом детектирования промежуточных продуктов относят к числу непрямых методов их исследования, с чем трудно согласиться. [c.198]

Как можно показать с помощью теоретических выкладок, использование ионов буфера с большими молярными коэффициентами экстинкции приводит к более чувствительному детектированию. Молярный коэффициент экстинкции в УФ-спектре имидазола в максимуме при 205 нм составляет 5000. Имидазольный буфер можно использовать в области от 190 до 220 нм для непрямого детектирования, т.е. область применения ограничена нижней УФ-областью. Вследствие того, что многие вещества также поглощают в УФ-области, при детектировании могут возникать помехи. Расширение области непрямого детектирования в сторону более высоких длин волн и/или в область более щелочных значений pH достигается 4-аминопиридином (4-АП). В максимуме поглощения при 205 нм 4-АП обладает молярным коэффициентом экстинкции 15500, при 245 нм - около 15600. При 254 нм существует еще один пик с экстинкцией около 14000. Это примерно в три раза больше, чем молярный коэффициент экстинкции имидазола при 214 нм. Подвижность 4-АП примерно такая же, что и у имидазола. Преимущество 4-АП проявляется в том, что ом применим в более широкой области длин волн - даже при 270 нм можно проводить непрямое детектирование. Кроме того, буфер 4-АП можно использовать до значений pH 10.1 без уменьшения чувствительности буферной системы вследствие исчезновения заряда 4-АП. [c.61]

В таблице 19 приведены другие буферные системы, применяемые для разделения катионов с непрямым детектированием. По подвижностям ионов пробы можно выбрать подходящий разделяющий буфер. Значения рКз берутся из литературы или определяются титрованием. Соответствующие УФ-спектры важнейших буферных компонентов представлены на рис. 51. [c.61]

Рис. 51. УФ-спектры буферных веществ, которые можно применять для непрямого детектирования катионов. УФ-спектры веществ,

Из этого видно, что и при непрямом детектировании можно работать в линейной области. [c.65]

Эти явления более подробно рассмотрены в главе "Непрямое УФ-детектирование", поскольку при этом способе детектирования часто необходимо использовать маленькие концентрации буфера. [c.20]

Пробы, не обладающие поглощением в УФ-области, можно обнаружить с хорошей чувствительностью на коммерческих УФ-детекторах с помощью непрямого УФ-детектирования. Для этого к буферу добавляют электролит, обладающий УФ-поглощением, подвижность которого близка к подвижности разделяемой пробы. Количество добавленного вместо пробы электролита (механизм вытеснения) должно быть чрезвычайно мало из-за соблюдения условия необходимой электронейтральности, так что буфер в данном случае будет обладать более высокой прозрачностью, что выражается в появлении отрицательного пика. Это схематично представлено на рис. 28. Примеры применения даются в разделе, посвященном анализу ионов. Чувствительность обнаружения при непрямом УФ-детектировании зависит от молярного коэффициента экстинкции добавляемого фонового электролита, поглощающего в УФ-области, и соответствует чувствительности обнаружения нормального УФ-поглощения. [c.39]

Это будет показано на примере калибровочной кривой натрия при определении ионов металла с применением непрямого УФ-детектирования. В то время, как линейная область при использовании высоты пика для количественного определения очень мала, и кривая уже при 4 ppm выходит в область насыщения, при представлении зависимости площади пика от концентрации корреляционная зависимость линейна. Причиной нелинейности калибровочной кривой с высотами пиков является, кроме всего прочего, треугольная форма пиков. Как можно показать теоретически, только при гауссовой форме пиков концентрация пропорциональна как площади пика, так и его высоте. При других формах пика интегрирование обязательно для того, чтобы получить линейную калибровочную кривую. [c.44]

Вещества, которые во всей УФ-области обладают небольшим коэффициентом экстинкции, часто необходимо вводить в высокой концентрации, для того, чтобы получить сигнал этого соединения в детекторе. Однако для такой пробы разделительная система часто бывает перегружена и интенсивность пиков так мала, что невозможно практическое применение такого разделения. Существенно чувствительнее такие вещества могут анализироваться при использовании других принципов детектирования (детектирование по электропроводности, потенциометрическое детектирование). Но поскольку до настоящего времени нет других детекторов для рутинных исследований в коммерческих приборах КЭ, непрямое Уф-детектирование в КЭ имеет особенное значение. [c.53]

Непрямое Уф-детектирование анионов [c.53]

Непрямое Уф-детектирование катионов [c.58]

Сопоставление методов прямого и непрямого Уф-детектирования [c.64]

Сопоставление нижней границы детектирования (НГД) и верхней границы линейной области удается провести при анализе некоторых аминов, плохо поглощающих в УФ-области. Аналогичные измерения со щелочными или щелочно-земельными ионами провести невозможно из - за их слишком малого УФ-поглощения. Из данных, приведенных в таблице 21, видно, что эта ионы при 200 нм можно детектировать прямым способом. В боратном буфере анализ длится до 5 мин. Непрямым УФ-детектированием при 254 нм с эфедрином в качестве буфера нижняя граница детектирование уменьшается в 50 раз (примерно до 1 мг/л). Линейная область в методе прямого УФ-детектирование распространяется от 1.4 до 1.6 десятичных порядков, а при непрямом УФ-детектировании -от 1.7 до 2.0 десятичных порядков. [c.64]

Детектирование Прямое УФ 200 нм Непрямое УФ 254 нм [c.65]

Рис. 48. Разделение щелочных и щелочно-земельных ионов в буферной системе имидазола. Условия прибор КЭ - Waters Quanta 4000 капилляр 75 мкм, 50/56 см. Поле 446 В/см, буфер -5 мМ имидазол/серная кислота, pH 4.0 ввод пробы гидростатический, 30 с, непрямое детектирование 214 нм проба - катионный стандарт с 1 мг/л каждого калия, натрия, магния, бария, кальция и 0.5 мг/л лития.

Рис. 52. Разделение катионов в воде, взятой с поверхности озера Байкал. Условия прибор КЭ МННроге Waters Quanta 4000 капилляр 75 мкм, 54/60 см поле 446 В/см буфер - 5 мМ имидазол/серная кислота, pH 4.5 ввод пробы гидростатический, 30 с. Непрямое детектирование, 214 им. Проба -байкальская вода I -калий, 2 - натрий, 3 кальции, 4 -магний. Количественные

Рнс. 8.11. Хроматограмма катионов щелочных металлов. Непрямое детектирование (А = 220 нм). Колонка Тфах 8СХ 4,6x120 мм. Скорость потока 0,5 мл/мин [c.287]

Непрямое детектирование используется при определении хлорид- и сульфат-ионов, ионов калия и натрия, а также aлIiфaтичe киx аминов, карбоновых кислот, некоторых сахаров. Так как ионная сила ведущего электролита в процессе разделения остается постоянной, в зоне, где находится непоглощающий ион, уменьшается концентрация поглощающего иона. Обмен происходит строго эквивалентно, на электрофореграмме наблюдаются обратные (отрицательные) пики, площади которьгх пропорциональны концентрациям определяемых ионов. Косвенное УФ-детектирование является универсальным вариантом детектирования, позволяя регистрировать все присутствующие в анализируемом растворе компоненты. [c.352]

Хроматография с непрямым (косвепиьш) детектированием хроматографический метод с использованием элюента, дающего постоянный отклик детектора, который ослабевает при прохождении через детектор раиделснных веществ, не дающих такого отклика [78]. [c.35]

Возможно также непрямое флуоресцентное детектирование, при этом речь может идти об универсальной методике детектирования, если имеется в распоряжении подходящий флуорофор без эффекта тушения. [c.40]

Непрямое УФ-детектирование Ионы металлов, амины, органические и неоганичес-кие ионы, сахара Имеются в коммерческих приборах [c.43]

В КЭ техника непрямого УФ-детектирования описана уже давно, еще до того, как стали известны ее большие возможности. Только позднее, в работах Джандика (Jandik) и Джонса (Jones) были выяснены преимущества применения непрямого УФ-детектирования в КЭ. Наряду с короткими временами анализов для многих анионов этот метод показал чрезвычайно низкую границу обнаружения в области концентраций от 0.1 мг/л и ниже. [c.53]

Рис. 43. Разделение смеси анионов в случае В. Условия 75 мкм, 42/50 см поде - 600 В/см, детектирование непрямое, 10 см, 30 с буфер 5 мМ хромат/серная кислота, pH 6.8 пробы анионный стандарт, детектируются

Методом непрямого УФ-детектирования можно обнаружить также и катионы. Впервые разделение катионов этим методом описано Ф.Форетгом в 1990 году. В его статье было показано, что метод КЭ при разделении лантанидов по эффективности, [c.58]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология