Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Преципитация в геле

    Реакция преципитации в геле двойная иммунодиффузия [c.528]

    В практическом отношении антитела преимущественно применялись для решения проблем идентификации и количественного определения веществ. Здесь имеется в виду использование белков как природных маркеров некоторых сырьевых материалов с целью распознавания их в продуктах питания для контроля качества. С этой целью изготовлены специфические иммунные сыворотки этих белков. Так, например, методы преципитации в геле послужили для обнаружения в пшеничной муке примесей ячменной муки [76] или в муке из твердой пшеницы примесей муки из мягкой пшеницы [90, 91]. Они могут быть использованы также для проверки отсутствия клейковины в кормовых рационах [7]. В такой стране, как ФРГ, где законодательство разрешает использовать в производстве пива только солод из ячменя и хмель, исключая особенно зерно риса и кукурузы как более дешевые источники крахмала, для контроля поступающего в продажу пива применили метод иммунохимической идентификации [98]. Иммунохимический подход (метод преципитации и RIA) также использовали для контроля запрещаемых законом в некоторых странах добавок в пиво препаратов протеаз как средства стабилизации [32]. В этих двух последних случаях проблема распознавания сложна, поскольку изготовление пива предусматривает вспенивание сусла при перемешивании, пастеризацию при стерилизации, т. е. происходит в условиях денатурации белков. Задача распознавания денатурированных бел- [c.112]


    Отметить результаты реакции преципитации в геле, поставленной с целью определения токсигенности дифтерийной палочки с помощью антитоксической сыворотки. [c.115]

    Этих недостатков лишена реакция преципитации в геле. [c.67]

    Реакция преципитации в геле (РПГ). РПГ основана на взаимодействии гомологичных АТ и АГ в агаровом геле с образованием видимых полос преципитации. АТ и АГ в результате встречной диффузии в гель образуют макромолекулярные иммунные комплексы, регистрируемые визуально в виде белых (опалесцирующих) полос (рис. 1.25, 1.26). [c.67]

    А. А. Королев с соавторами (1975) провели специальные исследования с целью изучения аллергических свойств АБС продуктов деструкции его озоном при пероральном введении в организм животных. Белые крысы в течение 2 мес получали АБС и продукты озонирования в дозах 1 и 10 мг/кг. Для определения сенсибилизации организма подопытных животных авторы применили реакции лизиса эритроцитов и лейкоцитов, преципитацию в геле, агломерацию лейкоцитов. Проведенными исследованиями было установлено, что как АБС, так и продукты деструкции его озоном в испытанных дозах не обладали аллергенными свойствами. [c.128]

    Реакция преципитации в геле (агаре). Чашки заливают агаром, в котором вырезают несколько луночек на равном расстоянии друг от друга. В центральную лунку вносят сыворотку, содержащую антитела, в остальные — различные испытуемые антигены или один и тот же антиген в различных разведениях. При диффузии реагентов в агаре в зонах оптимальных соотношений на месте встречи антигена и антител образуются мутные полосы —дуги преципитации (рис. 58). [c.116]

    Несмотря на то что методы преципитации в геле занимают значительное место в изучении и количественном определении антигенов, а также широко применяются для контроля специфичности и определения титра преципитирующих антител, предел чувствительности данных методов составляет около 5 мкг/мл, и их невозможно использовать для количественного определения антигенов небольшой мол. массы, которые образуют только нерастворимые комплексы. По этой причине возникла необходимость в разработке альтернативных методов количественного определения антигенов. В 1945 г. Кумбс и сотр. [c.12]

    Оборудование и материалы для методов преципитации в геле [c.198]

    Реакции преципитации в геле [c.366]

    Лабораторная диагностика. Материалом для обнаружения вируса или вирусного антигена служат мазки-отпечатки со слизистой оболочки носовой полости, отделяемое носоглотки, при летальных исходах — кусочки легочной ткани или мозга. Экспресс-диагностика основана на выявлении вирусного антигена с помощью РИФ разработана тест-система для ИФА. Для вьщеления вирусов используют куриные эмбрионы. Индикацию вирусов гриппа осуществляют при постановке реакции гемагглютинации. Идентифицируют выделенные вирусы поэтапно типовую принадлежность определяют с помощью РСК, подтип — РТГА. Серодиагностику проводят с помощью РСК, РТГА, PH в культуре клеток, реакции преципитации в геле, ИФА. [c.251]


    Реакция специфической преципитации между антигенами и антителами в жидкой или гелеобразной среде использовалась уже свыше полувека в самых разных методах. Пионерами методов, основанных на преципитации в геле, были Оудин [87], Ухтерлони [85], Грабарь и Уильямс [41]. Эти методы имеют множество модификаций с самым разнообразным их применением. [c.99]

    Некоторые методы требуют использования моноспецифических иммунных сывороток. Основной момент при этом — контроль моноспецифичности препаратов антител, который достигается методом специфической преципитации в геле между иммунной сывороткой и экстрактом, из которого иммуноген был очищен. Наличие более одной линии преципитации показывает, что сыворотка неспецифична. Трудность контроля нередко заключается в том, что моноспецифичность иммуносыворотки проверяется методами, имеющими определенный порог чувствительности (например, методом двойной диффузии), тогда как иммунная сыворотка используется при методах с намного более высокой [c.113]

    В 1905 г. Бекхольд, наслоив козью сыворотку на смешанную с желатиной кроличью антисыворотку к белкам козы, наблюдал в геле образование двух полос преципитации. Иммунологическая природа этого коллоидно-химического явления была раскрыта лишь спустя несколько десятилетий. На основе реакции преципитации в геле был разработан ряд новых методов исследования, которые не только позволили охарактеризовать иммунологические свойства белков, но и открыли новые перспективы их углубленного анализа. [c.18]

    Посевы помещают в атмосферу с 20 % Oj и инкубируют при 37 °С в течение 3 — 4 сут, а затем фильтруют через мембранные фильтры № 3 и 4. Полученный фильтрат объемом 10 — 15 мл смешивают с равным количеством теплого молока и скармливают котятам в возрасте 1 —2 мес или же вводят фильтрат им в желудок с помощью зонда. При наличии энтеротоксина через 30 — 60 мин у котят возникает рвота — основной признак отравления, а через 2 — 3 ч появляется понос, продолжающийся в течение 2 — 3 дней, в тяжелых случаях возможен летальный исход. Фильтрат можно вводить котятам внутрибрюшинно, после прогревания его при температуре 100 °С в течение 30 мин (для инактивации термолабильных фракций токсина). В настоящее время токсигенность выделенных культур стафилококков определяют в опыте in vitro с помощью реакции диффузной преципитации в геле (см. подразд. 1.4.2). [c.108]

    Очень тонкую дифференцировку сложных белковых смесей позволяет осуществить качественный иммунохимич. метод, основанный на выявлении преципитации в геле, где происходит взаимодействие антигенов и антител, диффундирующих навстречу друг другу. Еще большие возможности дает сочетание этого метола с электрофорезом в агаровом геле (тшуноэлектро-форетич. метод П. Грабаря). Последний метод позволяет выявить в сыворотке человека более 25 белковых фракций, различающихся по антигенным свойствам. [c.112]

    Реакция преципитации механизм, варианты постановки (кольцепреци-питаиия, преципитация в геле, иммуноэлектрофорез) и их диагностическое применение. [c.112]

    В случае постановки реакции преципитации с различными разведениями антигена можно установить титр преципитирующей сыворотки—максимальное разведение антигена, которое дает преципитацию с данной сывороткой. Одна из разновидностей реакции преципитации в геле позволяет определять токсигенность исследуемых бактерий (например, дифтерийной палочки) с помощью антитоксической сыворотки. Для этого в чашку Петри на питательную среду помещают полоску стерильной фильтровальной бумаги, пропитанную антитоксической противодифтерийной сывороткой. Затем чашку подсушивают в термостате и засевают испытуемыми культурами в виде штрихов, перпендикулярных к полоске бумаги, на расстоянии 0,6-0,8 см от ее края. В качестве контроля используют заведомо токсигенную культуру. Чашки инкубируют при 37°С в течение суток. При наличии токсигенной культуры в месте взаимодействия токсина с антитоксином образуются линии преципитации в виде дуг (рис. 59). [c.117]

    Для выделения антител используют высокоактивные итисыворотки с титром не менее 1 500 по реакции преципитации в геле РПГ , ие содержащие антитела к белкам нормальной сыворотки человека [c.270]

    Реакция преципитации в геле Преиипитац11я комплекса антиг ен-антитело непосредственно в инертном геле (как правило, агаре или агарозе) нашла широкое применение для анализа антигенов. Совреме1шые модификации метода основаны на том, что взаимодействие антигена и антитела происходит непосредственно в толще геля, куда реагирующие соединения поступают за [c.253]

    Иммуноэлектрофорез (ИЭФ) Электрофоретическое разделение АГ, диффузия с образованием дуг преципитации в геле Поликлональные, преци-питирующие 50—100 мкг/мл А Г 20—100 мкг/мл АТ То же, что и для ДДГ кроме того, необходимо оборудование для электрофореза [c.24]

    II. Линии и пики преципитации в гелях. Преципитат, полученный в геле, после отмывания и гомогенизации может быть использован для иммунизации. При этом легко и быстро получить моноспециф ические антитела, не прибегая к помощи трудоемких и требующих особых навыков методов выделения иммуногена. При проведении двумерного иммуноэлектрофореза (см. гл. 6) сложную смесь антигенов предварительно разделяют в одном направлении, а затем в другом (перпендикулярном первому) в слое агарозного геля, содержащего соответствующие антитела. Участки геля, где пики не перекрываются, можно аккуратно вырезать и использовать как очищенный комплекс для иммунизации. Данный метод применим к любому антигену, который мигрирует к аноду при pH 8,6 и содержится в исходной смеси в концентрации более 10— 20 мкг/мл, т. е. способен образовать видимый пик. Пример подобного подхода приведен на рис. 2.2. Для получения удовлетворительных результатов мы рекомендуем использовать следующую методику. [c.51]


    Активность антиаллотипических сывороток часто можно-тестировать в реакции преципитации в геле, однако не все сыворотки мышей содержат преципитирующие антитела. В качестве более чувствительного метода применяют реакцию пассивной гемагглютинации, которая, кроме того, легче поддается количественному учету. Можно обработать эритроциты формальдегидом, ковалентно присоединить к их поверхности иммуноглобулины нужного аллотипа и работать с одной и той же серией таких индикаторных клеток по меньшей мере в течение 6 месяцев. Постановка реакции гемагглютинации в микротитраторе позволяет за короткое время оттитровать большое количество индивидуальных сывороток. [c.213]

    Иное дело, когда эти методы используются для определения гомогенности антисыворотки или моновалентности ее антител. Здесь методы диффузии и преципитации в геле имеют определенные преимущества ввиду возможности образования, фиксации и окраски нескольких независимых зон (полос) преципитации для разных пар антиген — антитело, обнаруживающих себя при сочетании обследуемой антисыворотки с растворами разных антигенов. [c.124]

    В последние годы широкое применение получил метод серологической преципитации в геле. Большие преимущества этого метода, выполняемого на стеклах, состоят в следующем. Он позволяет разделять смесь молекул антигена и соответствующих антител благодаря различной скорости диффузии в геле, различной подвижности в электрическом поле (метод иммуноэлектрофореза) или же используя оба эти свойства. С помощью этого метода можно непосредственно сравнить два антигена, поместив их в соседние луикж на одной пластинке. Быть может, этот метод не столь чувствителен, как метод преципитации в пробирках, в смысле выявляемых концентраций вируса [1940]. Однако для постановки реакции этим способом, безусловно, требуются гораздо меньшие объемы реагентов. [c.366]


Смотреть страницы где упоминается термин Преципитация в геле: [c.207]    [c.101]    [c.102]    [c.114]    [c.3]    [c.258]    [c.196]    [c.256]    [c.59]    [c.113]    [c.219]    [c.575]    [c.584]    [c.3]   
Смотреть главы в:

Растительный белок -> Преципитация в геле




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Агар для метода преципитации в геле

Антигены преципитация в гелях

Антигены стандартные, использование в методе преципитации в геле

Контрольная антисыворотка для метода преципитации в геле

Оборудование и материалы для методов преципитации в геле

Преципитация в гелях, очистка иммуногена

Реакция преципитации в геле

Трафарет для метода преципитации в геле



© 2025 chem21.info Реклама на сайте