Полумикроколонки

Полумикроколонка для ионного обмена [2990]. [c.482]

Колонки малого объема называют по-разному Чаще всего употребляют термин колонки малого внутреннего диаметра Однако колонки следует классифицировать не по диаметру внутреннего канала (внутреннему диаметру), а по объему, так как колонкам с одинаковым свободным объемом соответствует одинаковый объем пика, независимо от диаметра канала Поэтому колонку, объем которой составляет одну сотую или меньше объема обычной колонки, мы рекомендуем называть микроколонкой, а колонку объемом примерно в одну десятую объема обычной колонки, - полумикроколонкой [c.22]

Микро- и полумикроколонки подробно описаны в гл 3 От обычных колонок их отличают следующие особенности [c.22]

Концентрация определяемого компонента в максимуме пика для микроколонок в 100, а для полумикроколонок в 10 раз больше, чем для обычных колонок [c.22]

Очень важно также то обстоятельство, что полумикроколонки в настоящее время изготавливаются несколькими фирмами и что эти колонки совместимы с большинством обычных хроматографических насосов Имеются также в продаже соответствующие детекторы (преимущественно УФ-спектрометры) и системы ввода пробы [c.22]

Таблица 3 1 Термины, используемые для описания различных полумикроколонок

Полумикроколонки необходимо отличать от настоящих микроколонок, объем которых составляет менее 1/100 объема обычных колонок В соответствии с таким определением, к типичным полумикроколонкам относятся колонки следующих размеров [c.78]

Размер пробы, которую можно ввести в колонку, не сни- жая эф(1)ективность разделения, зависит от объема колонки Поскольку последний пропорционален квадрату внутреннего диаметра колонки, допустимый объем вводимой пробы быстро падает с уменьшением этого диаметра На рис 3-28 показана зависимость между массой введенной пробы и эф( )ективностью колонки В полумикроколонку 1,5 мм (внутр диам) х 250 мм), заполненную силикагелем с привитым ОДС, вводили бензол (к 4,5) Как следует из указанной зависимости, при [c.80]

В табл 3-4 приведены характеристики рекомендуемых принадлежностей, а в табл 3-5 - рекомендуемые насадочных материалы и методики заполнения полумикроколонок [c.86]

Поскольку одним из важнейших преимуществ флуоресцентного детектора является его высокая чувствительность, то на практике объем кюветы определяется об мом пика исследуемого вещества В системах, оснащенных полумикроколонками, при детектировании умеренно удерживающихся пиков ( к 3 - 6) кюветы объемом 3-6 мкл не дают сколько-нибудь заметного уширения пиков В то же время чувствительность детектирования повышается благодаря высокой концентрации определяемого компонента в выходящем из колонки пике Однако вследствие уменьшения облучаемого объема раствора применение меньших кювет (объемом порядка 1 мкл) ведет к потере этого выигрыша в чувствите. ьности [c.106]

На рис 4-10 сравниваются хроматограммы, полученные с различными кюветами Все хроматограммы соответствуют одному и тому же количеству детектируемого компонента Хроматограммы а - в получены на одной и той же полумикроколонке, а приведенная для сравнения хроматограмма г-на обычной колонке На хроматограммах а к б (кюветы объемом 1,5 и 3 мкл) пики хорошо разделены и имеют удовлетворительную форму Что касается хроматограммы в (объем кюветы [c.109]

В табл 4-2 указаны пределы обнаружения антрацена на четырех хроматограммах, изображенных на рис 4-11 Как следует из таблицы, минимальные детектируемые концентрации пропорциональны облучаемому объему элюата Пределы обнаружения (минимальные детектируемые количества вещества) также пропорциональны облучаемому объему в тех случаях, когда размывание пика незначительно В результате применение кюветы объемом 7 мкл дает не столь большое повышение чувствительности, как можно было бы ожидать исходя из соотношения объемов Предел обнаружения при применении обычной колонки и кюветы объемом 7 мкл превышает предел обнаружения для полумикроколонки с кюветой объемом 1,5 мкл, хотя первая кювета повышает чувствительность по концентрации в 4 раза При использовании кюветы в 7 мкл в сочетании с полумикроколонкой удается детектировать до 0,14 пг антрацена, при замене же полумикроколонки в той же системе на обычную колонку чувствительность ухудшается в 5 раз Разумеется, необходимо отметить, что если детектируемый Ник выходит очень быстро (т е если к мало), то применение кюветы объемом 7 мкл влечет за собой заметное размывание пика Однако при разделении методом обращенно-фазовой хроматографии соединений типа антрацена это маловероятно [c.109]

Вычислено из хроматограмм приведенных на рис 4-11 " ПМ полумикроколонка (250 мм х 1 5 мм (внутр Диам ) насадка - сили кагель с частицами размером 10 мкм модифицированный ОДС). О - обычная колонка (250 мм х 4 6 мм (внутр диам ) насадка та же) [c.110]

Как уже указывалось выше, основные преимущества микро- и полумикроколонок - это небольшой расход растворителя и более высокая чувствительность, обусловленная снижением объемной скорости подвижной фазы Сочетание таких колонок с вольтамперометрическими детекторами имеет следующее преимущество при малой объемной скорости повышается эффективность работы электродов, и даже при уменьшении объема ячейки детектора ожидать уменьшения чувствительности не приходится [c.112]

Если мы применим полумикроколонку, описанную в табл 2-1 (250 мм X 1,5 мм (внутр диам), 10 ООО теор тарелок), то при скорости подвижной фазы 0,1 мл/мин (1,667 10" смЗ/с) объем пика компонента с к равен 24 мкл, а для этого пика равна 3,72 с Если допустимое размывание пи-ка, обусловленное вкладом реактора, не должно превышать 10%, т е О (оь)/ и < то вычисление максимального вклада реактора в вариацию времени по уравнению (I) дает [c.147]

Как уже указывалось выше, при применении полумикроколонок безнасадочные открытые капиллярные реакторы пригодны в тех случаях, если продолжительность реакции составляет от одной до десяти секунд, если же продолжительность реакции составляет от нескольких секунд до примерно одной сотой секунды, то целесообразнее использовать насадочные реакторы [c.152]

Следует отметить, что если в микро-ВЭЖХ используется обычная соединительная трубка внутренним диаметром 0,25 мм, то ее максимально допустимая длина равна 1/(2,5) найденных выше величин, т е 0,7 см для полумикроколонки и 0,07 см для микроколоики Очевидно, что в реальных условиях трубками такой длины пользоваться невозможно [c.39]

На рис 2-13 изображена зависимость между максимальной длиной и внутренним диаметром соединительной трубки при 3%-ном вкладе трубки в объем различных пиков Как видно из рисунка, в микро-ВЭЖХ для соединения узла ввода пробы, колонки и детектора необходима трубка, внутренний диаметр которой ни в коем случае не должен превышать 0,1 мм Вполне пригодна для этой цели трубка с внутренним диаметром 0,05 мм Ранее было предложено присоединять колонку непосредственно к детектору и узлу ввода пробы [7, 33] Однако соединительные трубки обеспечивают большую, гибкость системы, поэтому их использование целесообразно даже в микро-ВЭЖХ (для полумикроколонок необходимы соединительные трубки внутренним диаметром не более 0,1 мм, для микроколонок - соединительные трубки внутренним диаметром не более 0,05 мм) Разумеется, эти трубки должны быть как можно короче и даже небольшие мертвые объемы в фитингах недопустимы В табл 2-8 указана максимально допустимая длина трубок для пиков разных объемов [c.40]

В настоящее время получили распространение колонки внутренним диаметром 4,6 мм и длиной 25 - 30 мм Они также относятся к полумикроколонкам Смысл этой классификации состоит в том, что для всех полумикроколонок объем неудерживаемого пика равен примерно 10 мкл При одном и том же объеме пика могут применяться любые системы ВЭЖХ, дающие одинаковое инструментальное размывание полосы (суммарный объем внеколоночного пика) При этом размывание пика не зависит от размеров колонки [c.78]

Достаточно, например, установить в прибор миниатюрный кран-дозатор с вводимым объемом 1-3 мкл и детектор с проточной микрокюветой объемом 1 - 2,5 мкл Что касается насоса, то большинство обычных насосов для ВЭЖХ обеспечивают подачу элюента со скоростями, приемлемыми для полумикроколонок (100 - 300 мкл/мин) Таким образом, замена обычной на полумикроколонку не требует никаких специальных приспособлений, необходимых при работе с микроколонками, объем которых составляет менее 1/100 объема обычных колонок [c.79]

Рис 3-27 Сравнительная чувствительность анализа иа полумикроколонке и на обычной колонке для ВЭЖХ Подвижная фаза ацетоиитрил/вода (/5/25) детектор УФ длина волны 250 нм О 005 ед погл на всю шкалу [c.79]

Как было показано в гл 2, для проб одинаковой массы при одинаковых условиях хроматографирования концентрация компонента в максимуме пика, элюированного из полумикроколонки, в 10 раз выше, чем в пике, элюированном из обычной колонки [60] На рис 3-27 сравнивается чувствительность анализа при разделении по методу ВЭЖХ на полумикроколонке и обычной колонке Поскольку в приборе с полумикроколонкой используется УФ-детектор с кюветой в 5 мм, а в хроматографе с обычной колонкой - такой же детектор с кюветой в 10 мм, то, как показывает прямое сопоставление, чувствительность полумикросистемы выше в 5 раз [c.80]

Поскольку объем полумикроколонки равен примерно 1/10 объема обычной колонки, объемная скорость элюента, необходимая для достижения одинаковой с обычной колонкой линейной скорости, также составляет около 1/10 объемной скорости, применяемой в обычной колонке Благодаря этому при одних и тех же условиях и одной и той же ожидаемой продолжительности анализа расход растворителя при разделении на полумикроколонке составляет всего около 10% объема растворителя, необходимого для разделения на обычной колонке Применительно к рутинному анализу это означает суш ествен-ную экономию ресурсов лаборатории Если же применяемый в качестве подвижной фазы растворитель очень дорог или опасен для людей и окружаюш ей среды, то снижение его потребления имеет еш е более важное значение Экономически немаловажно также и то обстоятельство, что количество насадки, необходимое для заполнения полумикроколонки, не превышает 10% того количества насадки, которое расходуется при заполнении обычных колонок [c.81]

Готовые колонки для полумикро-ВЭЖХ в настоящее время выпускаются многими фирмами [61 ] Однако ассортимент их по сравнению с ассортиментом колонок для обычной ВЭЖХ более скуден, поэтому исследователю часто приходится изготавливать полумикроколонки самому, пользуясь обычными материалами [c.83]

Насос, применяемый для набивки полумикроколонок, должен обеспечивать подачу растворителя с объемной скоростью порядка нескольких миллиметров в минуту при давлении до 500 кг/см Для этой цели пригодно большинство коммерческих насосов для ВЭЖХ Если для набивки колонки используется циркуляционный насос, работающий при постоянном расходе, а не пневматический насос постоянного давления, то достигаемое давление сильно зависит от сопротивления системы потоку Последнее изменяется во времени в процессе набивки, поскольку максимальная объемная скорость для насосов этого типа обычно не превышает 10 мл/мин В результате реальное давление часто не может достигнуть заданной величины из-за слишком малого сопротивления потоку до тех пор, пока в колонку не будет введено достаточное количество насадочного материала После этого сопротивление колонки становится достаточно большим, давление в насосе достигает заданной величины и скорость потока регулируется автоматически [c.85]

Для заполнения полумикроколонок пригодны практически любые насадочные материалы При надлежащем качестве заполнения характеристики полученной полумикроколонки не отличаются от характеристик обычной колонки с такой же насадкой Поэтому все насадки, разработанные для обычной ВЭЖХ, пригодны без каких-либо изменений и для полумикро-ВЭЖХ [c.88]

В качестве справочного материала в приложении приведен перечень насадок, опубликованный Маджорсом [66] Из них только насадки на полимерной основе применяются в полумикро-ВЭЖХ относительно редко Однако это не означает, что они менее пригодны для полумикро-ВЭЖХ Просто до последнего времени в этой области ЖХ более популярны были такие распространенные насадочные материалы, как силикагель или силикагель, модифицированный ОДС Пористые полимеры, ионообменные смолы и насадки для эксклюзионной хроматографии также являются хорошими материалами для заполнения полумикроколонок В работе Хиби и сотр [67], например, описано разделение методом эксклюзионной хроматографии на полумикроколонках с полимерной насадкой [c.88]

Благодаря вышеописанным преимуществам микро-ВЭЖХ, в частности высоким концентрациям выходящих из колонки компонентов и малой объемной скорости, свойства пробы и рас творителя существенно разнятся, что облеЛает детектирование определяемых компонентов любым из известных методов Ниже рассмотрены принципы работы спектрального УФ-, флуоресцентного и вольтамперометрического детекторов в сочетании с микро- и полумикроколонками [c.92]

Еще одна важная причина, стимулирующая переход аналитиков на полумикро-ВЭЖХ, - это высокая э( )фективность полумикроколонок На рис 7-39 показаны две хроматограммы одного и того же раствора, одна из которых получена на полумикроколонке внутренним диаметром 1,5 мм, а вторая - на обычной колонке диаметром 4,6 мм Если в обоих случаях насадочный материал один и тот же, то для переноса условии обычной ВЭЖХ непосредственно на полумикро-ВЭЖХ нужно, [c.196]

На рис 7-40 показана хроматограмма, полученная при исследовании методом полумикро-ВЭЖХ противосудорожных средств На полумикроколонке внутренним диаметром 1,5 мм, заполненной силикагелем, модифицированным группами С18, разделены фенобарбитал, фетиноин и карбамазепин Для этих препаратов характерен узкий эффективный интервал концентраций в крови и весьма разнообразный у различных индивидуумов спектр метаболитов Кроме того, избыточные дозы этих лекарственных средств могут давать различные вредные побочные эффекты Поэтому определение их концентрации в крови имеет исключительное значение для установления оптимальной дозы [c.197]

Рис 7-46 - 7-48 иллюстрируют разделения различных смесей, полученные в режиме градиентного элюирования [31],На рис 7-46 представлена хроматограмма Каккоп1о - традиционного японского лекарственного средства, приготавливаемого из трав Разделение проводилось на полумикроколонке внутренним диаметром 1,5 мм В лекарственной траве содержится множество компонентов, и осуществить их полное разделение можно только методом ВЭЖХ с градиентным элюиро аниеь [c.204]

Нитрогептан [43]. Приготовленный, как указано выше, рас-створ трифторнадуксусной кислоты в ацетонитриле прибавляют в течение 80 мин при энергичном перемешивании к суспензии 47 г (0,55 моля) бикарбоната натрия в растворе 2 г карбамида, 12,9 г (0,1 моля) ди-н-пропнлкетоксима и 200 мл ацетонитрила. Как во время прибавления, так и еще 1 час после него раствор нагревают до слабого кипения. Затем его выливают в 600 мл холодной воды и обрабатывают, как описано в предшествующем синтезе. В результате фракционирования продукта реакции на полумикроколонке [76] получают 9,3 г (64%) 4-нитро-гептана с т. кип. 58—60°/3 мм. [c.152]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология