Орозомукоид

Расчет показывает, что орозомукоид содержит 7—8 таких или близких по строению цепей и, таким образом, относится к гликопротеинам типа HI. [c.577]

Недавно Спиро [122] осуществил последовательное периодатное окисление фетуина. Метод состоял в повторной обработке белка перйодатом, восстановлении борогидридом натрия и мягком кислотном гидролизе (0,05 н. серная кислота, 80°, 1 час), причем весь цикл операций повторялся несколько раз. По окончании каждого цикла белок анализировали на содержание оставшихся сахаров. На первой стадии количественно исчезала сиаловая кислота, причем никакие другие моносахариды при этом не окислялись. На втором этапе почти полностью окислялась галактоза, а другие моносахариды не затрагивались. Эти данные вместе с результатами измерения количества поглощенного перйодата и образования других продуктов окисления позволили сделать заключения о строении трех гетеросахаридных остатков, входящих в состав белка. Аналогичным образом было выполнено исследование орозомукоида [123]. [c.252]

Несмотря на то что белки вызывают большой интерес как потенциальные ХНФ, помимо альбумина в настоящее время исследован еще только один белок — протеин плазмы крови человека, так называемый кислый а -гликопротеин (АГП) или орозомукоид, присутствующий в плазме в концентрации 55—140 мг на 100 мл. Установлено, что АГП — основной белок в организме человека, способный связывать катионы [93]. [c.137]

Применение всех перечисленных приемов позволило определить природу связи между углеводной и пептидной частью в нескольких гликопротеинах. В настоящее время твердо установлено наличие О-гликозидной связи через оксиаминокислоты (тип Р) для муцинов подчелюстных желез, групповых веществ крови, комплекса гепарина с белком и др. и N-aцил-гликозиламинной связи через аспарагиновую и, вероятно, глутаминовую кислоту (тип Е) для овальбумина, орозомукоида и других гликопротеинов. Знаменательно, что для образования указанных гликопептидных связей необходимо присутствие специфических аминокислот — оксиаминокислот и двухосновных кислот, которые обязательно входят в состав природных гликопротеинов в количествах, иногда значительно превышающих их содержание в обычных белках. [c.573]

Из а,-глобулиновой фракции при фракционировании растворами сульфата аммония или спиртом выделен кислый гликопротеин, названный а -мукопротеином или орозомукоидом. Он имеет молекулярный вес около 44 ООО и содержит примерно 16% нейтральных сахаров (галактоза, [c.576]

Для биосинтеза смешанных биополимеров, содержащих олигосаха ридные цепи, существуют две возможности включение в состав полимера уже готовой олигосахаридной цепи или ее ступенчатое наращивание в составе биополимера. В пользу первой возможности говорит выделение из молока нескольких уриднндифосфатдисахаридов и трисахаридов, содержащих остатки N-ацетилглюкозамина, галактозы, фукозы и N-ацетилнейраминовой ки лoты " . Близость структуры выделенных УДФ-трисахаридов и углеводных цепей фетуина и орозомукоида позволяет [c.614]

Предполагать, что эти нуклеозиддифосфатолигосахариды могут участвовать в биосинтезе гликоиротендов. С другой стороны, имеются данные о включении остатка N-ацетилнейраминовой кислоты из цитидин-5 -фосфо-N-ацетилнейраминовой кислоты (см. стр. 394) в орозомукоид и муцин подчелюстной железы овцы, обработанные нейраминидазой . Этот факт указывает, по-видимому, на возможность ступенчатого наращивания олигосахаридной цепи в составе биополимера. Подтверждением этому служат результаты, полученные при ингибировании биосинтеза гликопротеинов плазмы под действием пуромицина среди накапливающихся предшественников, содержащих радиоактивный ацетилглюкозамин, не обнаружены УДФ-олигосахариды, а найден только УДФ-М-ацетилглюкозамин . [c.615]

Подобная связь присутствует в орозомукоиде, по-видимому, также в овомукоиде, 7-глобулинах, фибриногене и некоторых других гли-копротеинах. [c.184]

Основное количество гликопротеинов находится в крови млекопитающих. Среди гликопротеинов сыворотки крови обнаружены альбумины и глобулины, в том числе иммуноглобулины, играющие важную роль в создании иммунитета, фибриноген и протромбин, участвующие в процессе свертывания крови, орозомукоид и другие. Содержание углеводов в них составляет от 1 до 40%. [c.90]

Углеводная часть -гликопротеинов плазмы крови характеризуется большим разнообразием моносахаридов. Среди них найдены галактоза, манноза, фукоза, гексозамины. В состав подавляющего большинства изученных в настоящее время гликопротеинов входят сиаловые кислоты, например орозомукоид содержит 9—12% сиаловых кислот, а-гли-копротеин — до 6 % [c.91]

Наиболее изученным гликопротеином плазмы крови является орозомукоид (аркислый гликопротеин). Он найден в крови человека, быка, лошади, свиньи и др. Содержание углеводов в нем 40—41% [74]. [c.92]

Сходное строение с орозомукоидом имеет а-глобулин, выделенный из плазмы крови теленка, — фетуин. Его молекулярная масса 45 ООО— 49 700. Некоторые детали строения фетуина выяснены в результате ферментативного и частичного кислотного гидролиза. Под действием мейраминидазы или 0,25 н. серной кислоты (80 °С 1 ч) отщепляются сиаловые кислоты. При более жестком кислотном гидролизе гликопеп-тида, полученного деструкцией фетуина протеолитическими ферментами, выделен дисахарид [c.92]

Единица нейраминидазы — это количество фермента, необходимое для выделения 1 мкг К-ацетилнейрамйновой кислоты из орозомукоида при pH [c.163]

Бурн и сотр. [138] разделили сахара в буферных растворах бората как на бумаге, так и на листах из стекловолокна. Эйлар и Джинлоз [56] применили этот метод для идентификации сахаров в орозомукоиде. [c.209]

В настоящее время большинство описанных выше приемов вытеснены методами хроматографии и электрофореза. Применяли адсорбцию на смеси древесного угля с целитом с последующим элюированием водным этанолом [24, 251, однако полученные результаты не всегда воспроизводимы [26]. Другие авторы удаляли аминокислоты и низшие пептиды с помощью дауэкса-50 X 8 или зеокарба 225, трехмерная структура которых почти полностью исключает возможность сорбции гликопептидов [6, 25]. Хорошее отделение гликопептидов от аминокислот и других пептидов было достигнуто путем хроматографии продуктов протеолитического расщепления орозомукоида на колонке с бумажным порошком со гмесью к-пропанол — этанол — вода — уксусная кислота (5 15 5 0,75) в качестве растворителя [27]. Во многих случаях высокую степень очистки дает электрофорез на колонках типа описанных Поратом [28], в которых в качестве удерживающей фазы используется целлюлоза, подвергнутая этанолизу. Ли и Монтгомери [19] подвергали такую целлюлозу обработке борогидридом натрия, что приводило к более инертному материалу с низким электроэндоосмотическим фактором. [c.242]

Некоторые общие проблемы возникают как при метилировании гликоз-аминогликанов, так и для гликопептидов, поскольку последние содержат остатки К-ацетилгексозаминов. Полное метилирование хондроитинсульфата В достигается путем шести последовательных обработок диметилсульфатом в щелочном растворе (реагент Хеуорзса) [128] при температуре 0—5°. Было показано, что при этом главным, если не единственным изменением в молекуле полисахарида является 0-метилирование [129, 130]. Обработка реагентом Хеуорзса в воде орозомукоида, а также полного ацетата выделенного из него гетеросахарида приводит к глубокой деструкции углеводного фрагмента [22, 127]. Однако при введении в систему четыреххлористого углерода реакция протекает более гладко, но еще не количественно [131, 132]. Полное метилирование достигается при обработке реагентом Хеуорзса в водном ацетоне и затем по методу Пурди и Ирвина [133, 134], т. е. иодистым метилом и окисью серебра. Позднее Брэгг и Хок [58] метилировали орозомукоид по существу таким же методом, но их результаты не согласуются с данными предыдущих исследователей возможные причины такого различия будут рассматриваться ниже. Метод метилирования по Хеуорзсу с прибавлением четыреххлористого углерода успешно использовали для метилирования некоторых гликозаминогликанов [135, 136]. [c.255]

В случае электрофоретической гетерогенности орозомукоида [24] и [Зг-гликопротеина из плазмы [25] различные компоненты этих гликонротеинов отличались по содержанию в них сиаловой кислоты. В какой-то степени то же можно сказать и об овомукоиде. Содержание сиаловой кислоты в минорном компоненте овомукоида [12] равно 4%, в то время как целый препарат содержал 0,5—1,0% сиаловой кислоты, что, несомненно, обусловливает сравнительно низкую изоэлектрическую точку минорного компонента, соответствующего, по-видимому, наиболее отрицательно заряженной электрофоретической фракции, описанной Биром и сотр. [23]. Другие фракции, полученные с немощью электрофореза, не были четко разделены препаративными методами, за исключением наименее отрицательно заряженной фракции, поэтому характеристики этих фракций до сих пор неизвестны. Поскольку компонент с высоким содержанием сиаловой кислоты содержит не всю сиаловую кислоту, присутствующую в препаратах овомукоида, разница между некоторыми другими компонентами овомукоида может быть также обусловлена различием в содержании в них сиаловой кислоты. Возможны и другие различия. [c.27]

Используя другие условия гидролиза (0,05 н. серная кислота, 120°, 2 час), Спиро [27] выделил сходный дисахарид, содержащий галактозу и N-ацетилглюкозамин, расщепляющийся -галактозидазой, но нечувствительный к мягкой обработке щелочью. По хроматографической подвижности он соответствовал 2-ацетамидо-2-дезокси-4-(0-р-в-галактопиранозил)-в-глюкозе (N-ацетиллактозамину) — соединению, которое было выделено из смеси продуктов мягкого кислотного гидролиза некоторых других глико-протеинов сыворотки [36, 37]. Этот дисахарид при опрыскивании трихлорацетатом бензидина дает окрашивание того же оттенка, что и N-ацетиллактозамин. Выход N-ацетиллактозамина из фетуина составляет 10% теоретического, что соответствует примерно половине количества этого вещества, выделенного из орозомукоида, однако при этом условия гидролиза были иными [36]. Выделен также деацетилированный дисахарид, но в значительно меньшем количестве. Кроме того, были получены олигосахариды, содержащие маннозу и глюкозамин, в которых последний был редуцирующим концевым остатком [38]. [c.64]

Основываясь на дальнейших успехах в изучении белков физическими методами, а также на результатах обширной работы, проведенной Коном и сотрудниками, по фракционированию плазмы крови человека, Шмид [18, 19] получил гликопротеин, гомогенный при электрофорезе и ультра-центрифугировании. Это вещество было названо -кислый гликопротеин . Б]го можно было получить в кристаллической форме в виде свинцовой сопи, оно составляло несколько больше 50% от серомукоида Занетти, Байуотерса и Римингтона. Выделение сходного вещества, названного орозомукоид , явилось результатом тщательного исследования различных фракций, полученных фракционированием плазмы человека сульфатом аммония [3, 20]. Несмотря на то что дальнейшее фракционирование этого вещества, как было указано выше, не только возможно, по и уже проведено, большая часть данных о физических, химических и биологических свойствах была получена для (-кислого гликопротеипа , или орозомукоида. Результаты этих исследований будут описаны в последующих главах. [c.69]

Как уже обсуждалось во вступительной части, значительное число работ по изучению химической структуры -кислого гликопротеипа проводилось на препаратах, которые не обладали такой степенью очистки, которой добиваются в настояш,ее время, выделяя веш ества, называемые -кислый гликопротеин и орозомукоид . Это особенно касается изучения их углеводных компонентов. Некоторые углеводные компоненты чистого -кислого гликопротеипа никогда не были выделены из очищенного препарата и охарактеризованы химическим путем. До сих пор остаются некоторые сомнения относительно их строения и оптической изомерии. [c.77]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология