Сукцинатдегидрогеназа

Рис. 36. Схема переноса электронов в дыхательной цепи митохондрий SDH - сукцинатдегидрогеназа, yt - цитохром, fp - флавопротеид

Другую группу важнейших коферментов дегидрогеназ представляют ФАД (флавинадениндинуклеотид) и ФМН (флавинмононуклеотид), которые являются производными рибофлавина (витамина В2) и катализируют отщепление водорода от групп -СН2-СН2- с образованием двойной связи. Примером может быть реакция превращения сукцината в фумарат, катализируемая сукцинатдегидрогеназой, коферментом которой служит ФАД. Схема действия ФАД (или ФМН) показана на рис. 16. [c.40]

Рис. 49. Установка для солюбилизации сукцинатдегидрогеназы

Примером конкурентного ингибирования может служить ингибирование сукцинатдегидрогеназы малонат-ионом. В этом случае катализируемая реакция — окисление сукцинат-иона до фумарат-иона [c.399]

Сукцинатдегидрогеназа (КФ 1.3.99.1) принадлежит к типичным ферментам, прочно связанным с внутренней мембраной митохондрий. Сукцинатдегидрогеназа, способная к реконструкции, представляет собой белок (м. м. ок. 100 000 Да), содержащий в своем составе флавинадениндинуклеотид, ковалентно связанный с полипептидом, 8г-атомов негемового железа и 8г-моль сульфида, освобождающегося при подкис-лении среды. Белок катализирует окисление сукцината искусственны- [c.415]

Обратимое ингибирование необходимо для нормального функционирования клетки и служит регуляции ферментов в различных видах, но чаще всего как конкурентное и неконкурентное. Пример конкурентного ингибирования - действие малоната на фермент сукцинатдегидрогеназу - показывает конкуренцию за связывание с АЦ фермента между субстратом (сукцинатом) и ингибитором (малонатом) [c.34]

Флавиновые ферменты принимают участие в окислении жирных к-т в окислит, декарбоксилировании пировиноградной и о-кетоглутаровой к-т окислении янтарной к-ты в цикле трикарбоновых к-т (сукцинатдегидрогеназа). [c.266]

Сравнение числа оборотов сукцинатдегидрогеназы в реконструированной системе и в изолированном состоянии. [c.418]

Сравнение чувствительности нативной и растворимой сукцинатдегидрогеназы к ингибиторам дыхания. [c.418]

Отделение и реконструкция компонентов дыхательной цеии (сукцинатдегидрогеназа). ............ . . . [c.509]

Одним из наиболее удивительных свойств ферментов является их высокая специфичность. В некоторых случаях специфичность по отношению к субстрату практически абсолютна. В течение многих лет полагали, что единственным субстратом для фермента уреазы является мочевина, а единственным субстратом для сукцинатдегидрогеназы — сук-цинат. Даже после долгих поисков удалось найти лишь одно или два соединения с очень близкой структурой, на которые действовали указанные ферменты [c.40]

Возникло предположение, что включение СО2 в сукцинат происходит также в животных тканях, н для проверки этого предположения Вуд исследовал метаболизм препарата печени голубя при этом для блокирования сукцинатдегидрогеназы был добавлен малонат (дополнение 9-В). К удивлению исследователя накапливающийся сукцинат не содержал изотопа С. Вскоре, однако, было показано, что СО2 включается в карбоксильную группу а-кетоглутарата, смежную с карбонильной группой. При последующем превращении в сукцинат этот карбоксил утрачивается (рис. 9-2), что и объясняет отсутствие С в сукцинате. В историческом плане примечательно, что эти наблюдения были неправильно интерпретированы большинством биохимиков того времени. Они согласились, что цитрат не принимает участия в цикле трикарбоновых кислот. [c.322]

Известны также случаи, когда флавиновый кофермент соединен с белком ковалентной связью сравни (27) . Первым из таких коферментов был изучен флавин сукцинатдегидрогеназы. [c.595]

Согласно более поздним данным [43], эта картина может быть более сложной. Так, обнаружено, что при определенных условиях сукцинатдегидрогеназа может сочетаться с цитохромами в отсутствие убихинона. Это указывает на то, что убихинон, по крайней мере в данном случае, играет иную роль, чем в прямой схеме транспорта электронов. [c.599]

Приготовление субмитохондриальных частиц, лишенных сукцинатдегидрогеназы. К 10 мл суспензии препарата Кейлина—Хартри осторожно при комнатной температуре добавляют 1 н. КОН до pH 9,3. [c.417]

Иммуномодулирующие свойства азолидов сульфокислот оценивали с использованием энзиматического теста с моноцитами периферической крови на выявление активности гликолитических ферментов а-глицерофосфатдегидрогеназы и сукцинатдегидрогеназы. [c.74]

При работе с изолированными компонентами дыхательной цени отсутствуют четкие функциональные критерии очистки (общая и удельная активности). Любой компонент дыхательной цепи (кроме первых, реагирующих с НАДН или сукцинатом, и последнего, реагирующего с кислородом) катализирует бисубстратную реакцию, в которой в качестве субстрата-донора и субстрата-акцептора электронов участвуют йелки, не полученные в индивидуальном состоянии. В такой ситуации единственным строгим критерием активности компонента, полученного в результате фракционирования, может слул<ить реконструкция. Для ее осуществления в идеальном случае необходимо было бы иметь, во-первых, препарат внутренних мембран митохондрий, специфически и полностью лишенный одного из компонентов, и, во-вторых, растворимый очищенный препарат этого компонента. Смешивание этих препаратов в этом случае должно приводить к появлению сукцинат-, или НАДН-оксидазной активностей, количественно соответствующих исходному нативному препарату дыхательной цепи. К сожалению, такая реконструкция в настоящее время осуществлена лишь в отношении цитохрома с и частично — сукцинатдегидрогеназы. Стандартным подходом, сыгравшим главную роль во фракционировании дыхательной [c.414]

В настоящей работе предлагается специфически удалить коэнзим Q из препарата субмитохондриальных частиц, убедиться в том, что при этом тормозится сукцинатоксидазная активность частиц и не происходит повреждения собственно сукцинатдегидрогеназы и цитохромоксидазы, а затем реконструировать сукцинатдегидрогеназную активность добавлением к экстрагированным препаратам убихинона или его гомологов. [c.421]

В настоящей работе предлагается получить частично очищенный препарат сукцинатдегидрогеназы и провести реконструкцию сукцина-юксидазы из растворимого фермента и мембран митохондрий, лишенных дегидрогеназной активности. [c.416]

Сукцинат убихинон-редуктаза (СУР) катализирует окисление сукцината убихиноном. По данным электрофореза, в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия фермент состоит из 3 —4 полипептидов. Субъединицы с молекулярными массами 70 000 и 28 000 Да представляют собой собственно сукцинатдегидрогеназу, в субстратсвязывающем центре которой происходит дегидрирование сукцината низкомолекулярные компоненты комплекса И (м. м. ок. 15 000 Да) придают сукцинатдегидрогеназе реактивность по отношению к убихинону, чувствительность к специфическим ингибиторам и, по-видимому, принимают участие в связывании фермента с мембраной. Выделение препарата СУР основано на экстракции фермента из мембраны с помощью неионного детергента тритона Х-100 и концентрировании препарата охлажденным ацетоном. Дальнейшее фракционирование сульфатом аммония и очистка на кальдий-фосфатном геле позволяют получить фермент в высокоочищенном состоянии с каталитической активностью около 25 мкмоль окисленного сукцината в 1 мин на [c.423]

Получение растворимой сукцинатдегидрогеназы. К 46 мл препарата Кейлина—Хартри (с. 407) добавляют 4 мл 0,6 М сукцината калия, суспензию деаэрируют продуванием азота в течение 15—20 мин. Колбу плотно закрывают и оставляют стоять на ночь при 0° С. На следующий день суспензию продувают азотом в течение 15—20 мин, доводят pH под слабым током азота до 9,35 (пользуются 1 н. КОН) и переносят в двухгорлую колбу, снабженную трубкой для пропускания азота (рис. 49). [c.416]

Убихинон цитохром с-оксидоредуктаза катализирует окисление добавленных гомологов убихинола цитохромом с с образованием окисленного гомолога и восстановленного цитохрома с. Комплекс представляет собой липопротеидный ансамбль, содержащий цитохромы Ь, си железо-серный белок, прочносвязанный убихинон и фосфолипиды. В литературе описаны два основных способа получения комплекса. Первый основан на фракционировании НАДН цитохром с-оксидоре-дуктазы солями в присутствии детергентов. Второй — на специфическом расщеплении сукцинат цитохром с-оксидоредуктазы при щелочных значениях pH на сукцинатдегидрогеназу и убихинон цитохром с-оксидоредуктазу. Препараты, получаемые обоими методами, практически не различаются ни по полипептидному составу, ни по каталитической активности. Оба препарата могут быть включены в состав протеолипо-сом, так что катализируемая ими реакция оказывается сопряженной с векторным перемещением протонов через осмотически активный барьер (второй пункт электрохимического сопряжения). [c.429]

Измерение активностей препарата. Подготовка препарата. Сукцинатдегидрогеназа способна связывать в активном центре оксалоацетат с чрезвычайно высоким сродством. Процесс диссоциации ингибитора очень медленный, особенно при низких температурах. В свази с этим при измерении любых активностей митохондриальных ферментов, в которых участвует дегидрирование сукцината, необходимо быть уверенным, что сукцинатдегидрогеназа находится в активном состоянии. С этой целью обычно поступают следующим образом препарат фермента преинкубируют с сукцинатом (конечная концентрация 10— 20 мМ, что много больще Ks) в условиях, при которых его валовое окисление невозможно (анаэробиоз, отсутствие добавленных акцепторов, присутствие цианида для блокирования цитохромоксидазы). Пре-инкубацию проводят при —30° С в течение 30 мин. За это время происходит полное вытеснение оксалоацетата из активного центра фермента. Этот процесс называют активацией сукцинатдегидрогеназы. [c.428]

М КОН до 10,5 и инкубируют при перемешивании 30 мин. Суспензию под током аргона переносят в герметически закрывающиеся пробирки ультрацентрифуги и центрифугируют 90 мин при 200 ООО Коричневато-желтый супернатант, содержащий растворимую сукцинатдегидрогеназу, сливают (супернатант после нейтрализации можно использовать в качестве разведенного препарата сукцинат феназинмето- [c.429]

В р-ции 6, катализируемой сукцинатдегидрогеназой, происходит превращение сукцината в фумарат. Фермент входит в состав более сложного сукцинатдегидрогеназного комплекса (комплекса II) дыхат. цепи, поставляя восстановит, эквиваленты, образующиеся в р-ции, в дыхат. цепь. [c.635]

Чрезвычайно активным флавинсодержащим ферментом митохондрий животных является сукцинатдегидрогеназа [реакция (8-49)]. Этот фермент не только сам прочно встроен в мембраны крист митохондрий, но и содержит флавин, прикрепленный к белку с помощью ковалентной связи. Недавно была выяснена химическая природа этой связи выделен модифицированный FAD, содержащий 8a-(N-3-ги тидил)-рибофлавин [103—105] [c.259]

К флавинсодержащим железо-серным белкам принадлежит ЫАОН-дегидрогеназа (реакция д, табл. 8-4) и сукцинатдегидрогеназа [реакция (8-49)]. Оба этих митохондриальных фермента переносят электроны, вероятно, при помощи связанных атомов железа на систему цито-хромов цепи переноса электронов (гл. 10) [130а]. [c.266]

NADH в этом случае контроль определяется не уровнем фосфорилирования адениннуклеотидной системы, а окислительно-восстановительным потенциалом ЫАО+-системы [21]. Активность сукцинатдегидрогеназы может зависеть от окислительно-восстановительного состояния убихинона (гл. 10, разд. Г). [c.325]

Однако в ферредоксине из Аго1оЬас1ег, содержащем 8 атомов железа, один кластер имеет =—0,42 В, а другой =+0,34 В из спектров ЭПР следует, что оба кластера, несмотря на сильные различия в их потенциалах, совершают переход между состояниями окисления —2 и —I (окисленное и суперокисленное состояние рис. 10-8 [49а]). Растворимая сукцинатдегидрогеназа млекопитающих содержит три железо-сериых кластера со зиачениями Е° —0,40 В, —0,005 В н +0,06 В. В этом ферменте центр с самым высоким потенциалом, по-вндимому, также совершает пере-х<у1, м у достояниями -г 2 ц —1 [уравнение (1041)] [49Ь]. [c.382]

Следующая стадия называется сукцинатдегидрогеназной. Акцептором водорода в данной реакции является ФАД. Поскольку он постоянно связан с белковой частью, то сукцинатдегидрогеназу (СДГ) часто называют флаво-протеином. Особенностью СДГ является абсолютная стереоспецифичность при отщеплении атомов водорода только в трянс-положении, в результате образуется только транс-изомер - фумаровая кислота. Другая особенность СДГ - связь с мембранами митохондрий, в то время как остальные ферменты ЦТК находятся в растворенном состоянии в митохондриальном матриксе. [c.84]

Если в среде появляется маланат (СООН—СНг—СООН), активность фермента заметно снижается. Маланат, таким образом, является конкурентным ингибитором сукцинатдегидрогеназы. Он, очевидно, связывается с активным центром фермента вместо янтарной кислоты. Антиметаболитом является также сульфаниламид. Он конкурирует с парааминобензойной кислотой. [c.35]

Биологическая химия Изд.3 (1998) -- [ c.149 , c.348 , c.349 ]

Микробиология Издание 4 (2003) -- [ c.354 , c.362 ]

Биохимия (2004) -- [ c.268 ]

Теоретические основы биотехнологии (2003) -- [ c.32 ]

Биохимия растений (1966) -- [ c.191 ]

Основы биохимии Т 1,2,3 (1985) -- [ c.142 , c.278 , c.487 , c.489 , c.519 , c.522 ]

Общая микробиология (1987) -- [ c.2 , c.5 , c.206 , c.232 , c.233 , c.241 ]

Метаболические пути (1973) -- [ c.21 ]

Основы биологической химии (1970) -- [ c.302 , c.351 , c.355 , c.365 , c.365 , c.379 ]

Биохимия растений (1968) -- [ c.65 , c.224 ]

Химия жизни (1973) -- [ c.119 ]

Стратегия биохимической адаптации (1977) -- [ c.289 , c.290 , c.293 ]

Загрязнение воздушной среды (1979) -- [ c.127 ]

Загрязнение воздушной среды (копия) (1979) -- [ c.127 ]

Химия биологически активных природных соединений (1976) -- [ c.401 , c.403 , c.404 , c.405 , c.434 , c.435 ]

Биология Том3 Изд3 (2004) -- [ c.0 ]

Ферменты Т.3 (1982) -- [ c.3 , c.46 , c.99 ]

Методы общей бактериологии Т.3 (1984) -- [ c.0 ]

Биохимия человека Том 2 (1993) -- [ c.123 , c.136 , c.175 , c.176 , c.221 ]

Биологические мембраны Структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами (2000) -- [ c.29 ]

Нейрохимия (1996) -- [ c.177 , c.178 , c.200 ]

Жизнь микробов в экстремальных условиях (1981) -- [ c.277 ]

Биоэнергетика Введение в хемиосмотическую теорию (1985) -- [ c.100 , c.101 , c.117 , c.118 ]

Физиология растений (1989) -- [ c.133 , c.143 , c.144 , c.169 ]

Структура и функции мембран (1988) -- [ c.15 , c.25 , c.251 , c.252 ]

Биологическая химия (2004) -- [ c.76 , c.230 , c.239 , c.241 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология