Цитотоксичность Т- и НК-клеток

Помимо клинических испытаний, для сравнения цитотоксичности различных радионуклидов проводится большое количество исследований по измерению воздействия а-излучающих нуклидов на живые клетки [34, 14, 32, 26]. [c.376]

Клеточный иммунный ответ — это функция Т-лимфоцитов. Происходит образование эффекторных клеток — Т-киллеров, способных уничтожать клетки, имеющие антигенную структуру путем прямой цитотоксичности и путем синтеза лимфокинов, которые участвуют в процессах взаимодействия клеток (макрофагов, Т-клеток, В-клеток) при иммунном ответе. В регуляции иммунного ответа участвуют два подтипа Т-клеток Т-хелперы усиливают иммунный ответ, Т-супрессоры оказывают противоположное влияние. [c.51]

Метод выращивания клеток в монослое наиболее часто используется при анализе цитотоксичности в клеточных линиях, но иногда он используется при анализе чувствительности биопсий целого ряда опухолей разных типов. Главная проблема, возникающая при работе с биопсийным материалом, заключается Б том, что не всегда удается достигнуть адгезии и пролиферации опухолевых клеток, а кроме того, слишком часто наблюдается зарастание опухолевых культур клетками стромы (фибробласты и мезотелий). Важность этих проблем различна для разных типов опухолей (высока для карцином молочной железы, умеренна для опухолей яичников и малосущественна для глиом). [c.261]

Одним из наиболее широко распространенных тестов на цитотоксичность является определение способности одиночной клетки к образованию колонии. Это достигается простым разведением суспензии одиночных клеток, а выживание определяется подсчетом образуемых этими клетками колоний. В зависимости от времени удвоения изучаемых клеток и общей продолжитель- [c.280]

Система определения цитотоксичности должна воспроизводиться на клетках в культуре, прежде чем она будет применена к биопсийному материалу человека. [c.298]

Бьш синтезирован ряд производаых бетулиновой кислоты с целью выявить наиболее активный продукт для включения в липосомы. 1ри из них переданы в РОНЦ для определения их цитотоксичности по отношению к клеткам меланомы человека [c.157]

Внехромосомные экспрессирующие векторы млекопитающих обычно применяют для синтеза гетерологичных белков, использующихся в научных или медицинских целях. Они представляют собой челночные векторы с сайтами инициации репликации вируса животных и Е. со//-плазмиды. Регуляторные элементы транскрипции обычно происходят из генома вируса животных или из геномов млекопитающих. Для отбора трансфицированных клеток используют доминантные селективные маркерные гены. Некоторые системы отбора основаны на введении в среду возрастающего количества цитотоксичного соединения и позволяют получать клетки, содержащие большое число копий вектора, что увеличивает выход чужеродного белка. [c.155]

В результате связывания F -участка антитела с F -рецептором эффекторной клетки запускается реакция опосредованной антителами клеточной цитотоксичности. Активированная эффекторная клетка высвобождает вещества, лизирующие чужеродную клетку, с которой связан Fab-учзсток молекулы антитела. [c.211]

В совсем недавних исследованиях [1165] было установлено, что гидразид малеиновой кислоты в дозах, значительно превышающих остаточные количества, обнаруженные в продуктах питания, не оказывает явного влияния на ферменты микросом из печени крыс. Результаты этих исследований также позволяют предположить, что гидразид малеиновой кислоты не вызовет изменений в метаболизме других веществ, которые могут присутствовать в биологических системах. В еще более недавней работе, проведенной в Японии [1166] с клетками китайского хомяка in vitro, было показано, что гидразид малеиновой кислоты сам по себе вызывает слабую индуктивность цитотоксичности, но в то же время оказывает положительное цитогенетическое действие на клетки. Резюмируя все сказанное, следует заключить, что гидразид малеиновой кислоты является веществом, опасным для окружающей среды, и нуждается в дополнительном изучении, что согласуется с заключением Управления па контролю за качеством пищевых продуктов, медикаментов и косметических средств. [c.126]

Клетки-киллеры (один из типов Т8-лимфо-цитов) образуют меньшее количество лимфокинов, но они способны убивать зараженные вирусами, а также злокачественные клетки (рис. 14.39). Это происходит в результате химической атаки (цитотоксичности) или проды-рявливания их наружной мембраны. Киллеры распознают не части попавших извне антигенов, а чужеродные пептиды, возникающие в самом пораженном организме, например фрагмент вируса, образовавшийся внутри инфицированной им клетки и всплывший на ее поверхность, или мутантный белок, продуцируемый злокачественной клеткой. Кроме того, они атакуют и постепенно разрушают трансплантированные органы (разд. 25.7.13). [c.177]

Естественные киллеры — популяция клеток, обладающая естественной цитотоксичностью по отношению к клеткам-мишеням. Морфологически представляют собой большие гранулосодержащие лимфоциты. Являются клетками с эффекторной противоопухолевой, противовирусной и противопаразитарной активностью. [c.47]

Оценку цитотоксичности можно производить путем подсчета жизнеспособных клеток (разд. 8.2.4), но при большом числе проб этот метод утомителен, поскольку требует многих часов наблюдения клеток в микроскопе. Более простой метод, который недавно был автоматизирован благодаря введению коллектора надосадочной жидкости Titertek (см. приложение 3), основан на определении радиоактивного хрома, выделяемого клетками в среду при гибели. Коллектор надосадочной жидкости состоит из абсорбирующих цилиндров, расположенных таким образом, что они могут вставляться в лунки пластинки для микротитрования Titertek/Linbro (см. приложение 3). После того как надосадочная жидкость из лунок абсорбируется цилиндрами, их переносят в счетные флаконы и определяют количество радиоактивного хрома, выделяемого клеточным монослоем. [c.16]

Главным фактором при выборе ткани или линии клеток для дальнейшего исследования является природа процесса, который будет изучаться на этих клетках. Изучение таких общих клеточных процессов, как синтез ДНК, проницаемость мембран или определение цитотоксичности, может быть проведено на любых типах клеток. Исследование специализированных клеточных функций, таких как образование миотрубок, синтез антител или регуляция ферментов цикла мочевины, требует использования особых типов клеток, в которых происходит экспрессия этих функций. [c.13]

I. Кратковременные культуры (4—24 ч). Кратковременное поддержание клеток в суспензии для анализа чувствительности к препаратам возможно для клеток из любого источника. Если клетки получены из биопсийного материала опухоли человека, то тест-система имеет ряд теоретических преимуществ способность к росту не является лимитирующим фактором, поскольку рост в этой системе не требуется разрастание клеток стромы и клональный отбор сведены к минимуму, так что результаты могут быть получены быстро, что особенно важно, если испытание проводится с клиническими целями. Метод получил широкое использование в ФРГ при изучении чувствительности к ряду химиотерапевтических препаратов различных типов опухолей [13, 14]. Модифицированный метод с использованием либо клеток, либо фрагментов тканей был применен Силвестрини с сотрудниками [10] также для различных типов опухолей. В обоих вариантах исследовали включение нуклеотидов, меченных тритием, в ДНК или РНК. Ограничения этого метода заключаются главным образом в короткой продолжительности опыта это исключает возможность длительного воздействия лекарственных средств в течение одного или нескольких клеточных циклов. Следовательно, этим методом нельзя исследовать обратимость действия лекарства и остаточную цитотоксичность, что существенно ограничивает круг исследуемых препаратов. Было показано, что при использовании этой тест-системы получаются ложно-отрицательные результаты действия адриамици-на [14], хотя имелись сообщения об успешном применении системы при анализе действия других лекарств с иными механизмами действия [10]. [c.260]

В некоторых тестах на цитотоксичность, таких как поглощение красителя мертвыми клетками или высвобождение Сгили флуоресцеина из предварительно меченых клеток, результаты можно получить немедленно. Эти испытания относятся к тестам на жизнеспособность и предназначены скорее для предсказания выживаемости, чем для ее прямого измерения. В целом такие тесты хороши для идентификации погибших клеток, но приводят к завышенным результатам при оценке длительного выживания. Результаты большинства из них отражают нарушение целостности мембран и необратимую гибель клеток. [c.269]

V. Н-Аминокислоты. Синтез белка можно рассматривать как незаменимый метаболический процесс, без которого клетка теряет жизнеспособность, поэтому включение аминокислот в белки успешно используется в качестве оценки цитотоксичности. Наиболее распространены исследования клеток, растущих в монослое в лунках микротитровальных пластинок. В этом случае можно оценивать включение Н-лейцина [29] с помощью жидкостного сцинтилляционпого счетчика или включение S-метионина с помощью радиоавтографии [43]. [c.273]

Зависимая от антител клеточная цитотоксичность. Если инкубировать с лимфоцитами неиммунизированных животных какие-либо клетки, обработанные IgG-антителами против антигенов этих клеток, происходит гибель [c.146]

Пастеровской пипеткой в каждую лунку вносят по капле среды. Через 10 мин капли стряхивают так, чтобы клетки остались на дне лунок. Затем в лунки добавляют по 2 мкл кроличьего комплемента, адсорбированного клетками Xenopus. Панели встряхивают на вортексе и инкубируют при 37 °С без СОг. Действие комплемента останавливают, выдерживая панели 10 мин при 4°С, а затем клетки фиксируют, добавляя в каждую лунку по капле 5%-ного формальдегида в ЗФР. Через 5—10 мин все лунки осторожно накрывают покровным стеклом и просматривают в фазово-контрастном микроскопе. Процент цитотоксичности выражают отношением числа лизированных клеток, которые выглядят черными или серыми, к числу живых клеток, сохраняющих свои светопреломляющие свойства. [c.497]

Противоопухолевая активность пиранового сополимера и других полианионов связана не с их непосредственной цитотоксичностью, а, по-видимому, со способностью активировать макрофаги [43]. Активированные макрофаги избирательно поглощают опухолевые клетки в отличие от нормальных макрофагов. Полианионы стимулируют ретикуло-эндотелиальную систему, что является одним из механизмов противоопухолевого действия. Регулируя фармакокинетику полианионов ( пиранового сополимера), например выбором места введения, можно добиться их преимущественного накопления в органе-мищени и таким образом усилить противоопухолевое действие за счет активации макрофагов в тканях этой мищени [44]. Пирановый сополимер при этом должен иметь М > 15,5 тыс., в противном случае специфическая цитостатическая и цитолитическая активация макрофагов не будет иметь места. [c.24]

Лизосомотропия — эндоцитоз связанного с полимерным носителем ФАВ с последующим перевариванием в лизосомах и внутриклеточным выделением свободного ФАВ [123] по-видимому, не единственный механизм, обеспечивающий попадание ФАВ в опухолевые клетки. Описан синергизм действия хлорамбуцила и опухоль-специфического глобулина, когда вообще никакой химической связи между ФАВ и полимером (во всяком случае к моменту введения в организм) не было [125]. Связывание противоопухолевых ФАВ с опухоль-специфическими антителами в форме комплексов или ковалентных конъюгатов приводит к увеличению эффективности терапии в результате целевого транспорта цитотоксичного ФАВ [125]. Наибольший эффект достигнут при связывании ФАВ с полиглутаминовыми цепями, присоединенными к иммуноглобулину С [120]. Однако широкому применению иммунологически специфичных ФАП препятствует малая доступность соответствующих иммуноглобулинов. Первоначально казалось, что гибридомная техника позволит получать антитела против опухоль-специфических антигенов в необходимых количествах. Однако эти надежды пока не оправдались, в частности потому, что опухоль-специфические антигены подвержены изменчивости и к тому же детектируются не во всех случаях. [c.115]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология