Эксклюзия

На рис. 26 показана схема процесса эксклюзии. Молекулы размером А и больше, являясь запретными , не удерживаются гелем и вымываются объемом растворителя Уо, находящегося снаружи частиц геля. Молекулы размером В и меньше полностью проникают в поры и элюируются объемом полного проникновения У , равным объему [c.71]

Применение молекулярно-ситовой хроматографии. Можно выделить следующие основные области применения молекулярно-ситовой хроматографии. Прежде всего молекулярно-ситовая хроматография используется для отделения очень крупных молекул от очень мелких. Это означает, что молекулярная масса первых находится за пределами границ эксклюзии данного геля, в то время как последние диффундируют в гель беспрепятственно. [c.79]

Все молекулы, размер которых больше размера пор сорбента, не могут попасть в них (полная эксклюзия) и проходят по каналам между частицами. Они элюируются из колонки с одним и тем же удерживаемым объемом, равным объему подвижной фазы Уо. Коэффициент распределения для этих молекул равен нулю. [c.41]

Связь между удерживаемым объемом и молекулярной массой (или размером молекул) образца описывается калибровочной кривой (рис. 2.16). Каждый сорбент характеризуется своей калибровочной кривой, по которой легко оценить область разделяемых на нем молекулярных масс. Точка А соответствует пределу эксклюзии, или мертвому объему колонки Уо. Все молекулы, масса которых больше, чем в точке А, будут элюироваться одним пиком с удерживаемым объемом Уо. Точка В отражает предел проникания, и все молекулы, масса которых меньше, чем в точке В, также будут выходить из колонки одним пиком с удерживаемым объемом У1. Между точками А и В располагается диапазон селективного разделения. Соответствующий ему объем У1=У1-Уо часто называют рабочим объемом колонки. Отрезок СО представляет собой линейный участок калибровочной кривой, построенной в координатах Ук—1дМ. Этот участок описывается уравнением [c.41]

Недостаточный диапазон разделения имеются высокомолекулярные фракции, попадающие в область эксклюзии. Необходимо добавить колонку с более крупными порами. [c.46]

Имеются фракции, попадающие в область эксклюзии колонка II не участвует в разделении. Необходимо заменить ее на колонку с более крупными порами, чем у колонки I. [c.46]

Гели с наиболее мелкими порами, имеющие предел эксклюзии до 5000, часто используют для разделения малых молекул. Диаметр пор самых мелкопористых сорбентов (типа ц-стирогеля 100 А) в набухшем состоянии составляет около 3 нм, степень их набухания является наиболее высокой, а круг пригодных подвижных фаз более узок, чем для гелей с крупными порами. Ограничения в выборе подвижных фаз подробнее рассмотрены в разд. 2.4.4. [c.103]

Как правило, в хроматографии редко осуществляется какой-то один механизм разделения —адсорбция, распределение, ионный обмен или эксклюзия чаще в разделении в большей или меньшей степени участвуют несколько механизмов одновременно. [c.265]

Прн экспериментах по ультрацентрифугированию из константы седиментации прн знании стоксовского радиуса можно вычислить отношение осей///д. Под стоксовским радиусом понимают радиус молекулы при наименьшей площади ее поперечного сечения. Он может быть получен из гель-хроматографической константы эксклюзии (г — эффективный диаметр пор) [c.363]

Обменная емкость. Приведенные данные соответствуют приблизительно максимальным значениям, получаемым при хроматографии малых ионов. На обменную емкость макромолекул могут влиять многие факторы, например pH, ионная сила, явления молекулярной эксклюзии и т. д. [c.433]

КМ КМ-сефадекс С-25 КМ-сефадекс С-50 КМ-сефароза L-6B КМ-биогель А О-СНа-СООН Сефадекс G-25 Сефадекс 0-50 Сефароза L-6B Биогель А (4% агарозы) 4.5 + 0,5 4.5 + 0,5 0,12 + 0,02 0,02 + 0,05 10 45 Набухшая смола Набухшая смола Слабая кислота. рК 4. Противоион Ыа. Противоион Ыа. Предел эксклюзии 1 10. [c.438]

Интервал фракционирования и предел эксклюзии (Mf [c.440]

Большее по значению число в каждой паре-это предел эксклюзии. Интервалы фракционирования определены по (а) пептидам или глобулярным белкам и (б) декстранам, представляющим собой макромолекулы более вытянутой конфигурации. [c.441]

Смола С одержание агарозы в геле. % Диаметр гранул набухшей смолы, мкм Интервал фракционирования н предел эксклюзии (j f) Рекомендуемое рабочее давление Скорость протекания , см/Л [c.443]

Наибольшее число в каждой паре-это предел эксклюзии. [c.443]

Ю 500000-> 10 (предел эксклюзии для частиц-диам. 300-400 нм) [c.444]

Марки гелеЙ и фирма-изготовитель Предел эксклюзии, МВ Диапазон фракционирования веществ по МВ Поглощение воды, мл/г [c.165]

Цдя подавления нежелательных для Э. х. явлений ионной эксклюзии и ионообменной сорбции модифицируют пов-сть сорбентов (для придания ей нейтрального з яда при pH > 4), увеличивают ионную силу р-рителя, ослабляя кулоновские взаимод., добавляют орг. р-рители, смещая тем самым рА полиэлектролита или изоэлектрич. точку у полиамфолитов. С др. стороны, ионообменную сорбцию и ионную эксклюзию можно использовать для разделения нейтральных макромолекул, полианионов и поликатионов одного размера. Поскольку диссоциация полиэлектролитов увеличивается с разбавлением их р-ров, то при Э. X. макромолжулы на краях хроматографич. колонки, где их концентрация мала, диссоциируют и движутся по колонке не по законам Э.х., а по законам ионообменной сорбции и ионной эксклюзии в зависимости от заряда пов-сти сорбента и макромолекулы, что приводит к искажению формы кривой зависимости V и М (рис. 4), а также позволяет диагаостировать наличие того или другого процесса. [c.412]

Жддкостная хроматография, основанная на распределении, — наиболее широко распространенный метод по сравнению с методами, использующими ад-сорбщио, ионный обмен и молекулярную эксклюзию. Методом распределительной хроматографии обычно определяют незаряженные полярние соединения с относительной молярной массой до 3000. Современные варианты позволяют определять также высокомолекулярные соединения. [c.274]

Рис. 5.3-19. Удерживание и градуировка в гель-хроматографии. а—удерживание стандартных соединений в диапазоне молекулярной эксклюзии с величнами К от О до 1 и относительными молекулярными массами от 10 до 1(Я. Последний (пятый) пик соответствует соединению, имеющему химические взаимог ействия с сорбентом б — логарифмическая зависимость между молекулярной массой и объемом удерживаг ния (элюирования) стандартных соединений в—определение молекулярной массы на основании хроматограммы неизвестной пробы. Для этого элюирование должно проводиться в тех же условиях, что и градуировка (объем вводимой пробы, скорость потока).

Точно определенный диапазон эксклюзии между мертвым объемом и суммой мертвого объема и объема пор Vo + Vp обеспечивает малые времена удерживания, определяемые коэффициентом распределения К. Получаются узкие пики, что позволяет проводить их правильную колююственную обработку. Поскольку, как правило, проба не вступает ни в какие химические или физические взаимодействия, ее компоненты элюируются без потерь. Следовательно, данный метод пригоден для препаративного разделения. В то же время, проба не влияет на разделяющую колонку, как это происходит в других видах жидкостной хроматографии. [c.292]

Из-эа узкого диапазона эксклюзии (значение А от О до 1) П1йсовол емкость в гель-хроматографии ограничена (см. табл. 5.1-4). Более того, не могут быть разделены вещества близкого размера, например юомеры. Считается, что разделение на основании молекулярных масс может быть успешным только при различии масс как минимум на 10%. [c.292]

Неподвижными фазами, применяемыми в ТСХ, служат те же материалы, что и в ВЭЖХ для разделений, основанных нв адсорбции, распределении (нормально или обращенно-фазовом), ионном обмене и эксклюзии. Эти материалы в внце мелко размолотых частиц наносятся на плоские пластины размером 5 X 10,10 X 20 или 20 х 20 см. При размере частиц 20 мкы достигается толщина слоя от 200 до 250 мкм. Во время развития хроматограммы при ее длине 12см в течение 25 мин достигается около 200 стадий разделения. [c.293]

Ионная эксклюзия. Поры силикагелей, погруженных в растворы электролитов, стремятся не допустить ионы внутрь. Этот эффект использовался для сравнения размеров ионов с использованием определенного силикагеля с известным диаметром пор. Маатман и др. [194] опубликовали больщой материал по этому вопросу, но здесь цитируются только наиболее типичные статьи. По-видимому, можно было бы определять неизвестный размер пор силикагелей, если применять данный метод, используя ионы известного размера. См. также раздел Отрицательная адсорбция .) [c.691]

Развитию основных положений теории удерживания препятствовал тот факт, что в зависимости от условий основное влияние на удерживание и селективность может оказывать одно из перечисленных ниже явлений (илн совокупность этих явлений) [260] 1) "сольвофобные" взаимодействия между анализируемым веществом и органическими группами на поверхности 2) "силанофильные" взаимодействия между анализируемым веществом и доступными силанольными группами на поверхности сорбента 3) взаимодействие между сорбентом и анализируемым веществом, растворенным преимущественно в органическом модификаторе элюента такой процесс наблюдается и в НФ ЖХ при расслаивании раствортеля 4) специфические взаимодействия с определенными компонента.ми растворителя (вторичные равновесные процессы) 5) явления эксклюзии вследствие стерических или электростатических эффектов. [c.74]

Эти ионообменники получают на основе носителей для гель-фильтрации - поперечно-сшитых декстранов (сефадекс) или агароз (сефароза СЬ, биогель А). Они обладают свойствами ионообменников и гель-фильтрующих материалов и гораздо меньшей обменной емкостью к молекулам, превышающим по своим размерам предел эксклюзии ионообменника в условиях эксперимента. Из-за наличия заряженных групп степень набухания таких смол и, следовательно, предел эксклюзии варьируют в зависимости от pH и ионной силы (нехарактерным для гель-фильтрующих материалов образом). [c.437]

ДЭАЭ ДЭАЭ-сефадекс А-25 ДЭАЭ-сефадекс А-50 ДЭАЭ-сефароза L-6B ДЭАЭ-биогель А i-0- Hj- H2-NEt2 Сефадекс G-25 Сефадекс G-50 Сефароза L-6B Биогель А (4% агарозы) 3.5 + 0,5 3.5 + 0,5 0,15 + 0,02 0,02 0,005 5 28 Набухшая смола Набухшая смола Основание средней силы. рК, 9,5 Предел эксклюзии Г 1 О [c.438]

Наибольшее число в ка ждом интервале-предел эксклюзии. [c.444]

Прн мечания. 1—3. Пределы эксклюзии определены на белках (или декстрана.х). Гели поставляются в виде простерилизованных водных суспензий, содержащих 0,02% азида натрия в качестве антисептика. 4—21. Диапазон фракционирования определен на белках. Гелн поставляются в виде суспензий в растворе, содержащем ЗДТА (0,001 М) и ЫаЫз (0,02%). В отличие от агароидных гелей других фирм, зерна данных гелей имеют [c.171]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология