Гаптены гомологичные

Б. Ингибирование реакций гомологичными и гетерологичными гаптенами [c.658]

В большом числе экспериментов Полинг с сотрудниками определили сродство гомологичных и гетерологичных гаптенов по отношению к антителам, исходя из предела разведения, в котором они еще растворяли определенное количество осадка, образованного антителом и гомологичным антигеном. Оптимальное количество гомологичного контрольного антигена добавлялось к антисыворотке в присутствии различных количеств гаптена, а образовавшийся осадок определялся химическими методами. На рис. I показаны результаты одного из таких опытов, , . i [c.659]

Теперь мы в состоянии изучить влияние тех или иных известных изменений химического состава перекрестно реагирующих антигенов на их серологическую специфичность. Допустим, что мы, заменили метаниловую кислоту, которую применяли для получения азо-сыворотки курицы (КМ), другим ароматическим амином, который обозначим М. Тогда при испытании КМ с нашей антисывороткой к белкам лошади с присоединенной метаниловой кислотой реакция произойдет лишь в том случае, если М окажется настолько сходным с М, что соединится с анти-М. Если,- например, М — это ж-аминобензойная кислота или jn-аминофениларсиновая кислота положительная реакция произойдет, правда, количество преципитата будет меньше. Это показывает, что антитела к метаниловой кислоте. Хотя и лучше адаптированы к гомологичному антигену, способны реагировать как с другими гаптенами, так и с другими кислотными группами в жега-положении. Если мы внесем более существенные изменения в молекулу гаптена, введя кислотную группу в пара-положение или применив гаптен вообще без кислотной группы,, то реакция либо будет слабо выражена, либо вовсе не произойдет. Схематически это можно изобразить так (схема III) [c.21]

При испытании близких по строению гаптенов с одной и той же системой антиген — антитело наибольшей подавляющей способностью обычно обладает гомологичный гаптен. Другие гаптены подавляют реакцию сильнее или слабее в зависимости от степени их сходства с гаптеном, который содержался в антигене, использованном для иммунизации [c.27]

Наиболее сильная преципитация была получена с гомологичным антигеном (табл. 5), но отмечались ТАБЛИЦА 5 Перекрестные реакции глицинового и лейцинового гаптенов [20] [c.54]

Третья группа доказательств получена в опытах с применением реакции задержки. Ландштейнер установил, что реакция антител к данному пептиду обычно лучше подавляется гомологичным гаптеном, чем [c.56]

Подавление гетерологичной реакции гомологичным гаптеном [20] [c.57]

Подобного рода проблемы очень часто возникают, например, при разработке методов иммуноферментного анализа лекарственных препаратов, стероидных и белковых гормонов. В зависимости от способа получения антисыворотки антитела могут быть специфичны либо только к одному лекарственному препарату (гап-тену), либо к целой группе близких по структуре химических соединений. В этих случаях распространен способ оценки специфичности, основанный на сравнении связывания антител в данной концентрации (или в определенном разведении иммунной сыворотки) одного и того же количества гомологичного и гетерологичного гаптена. При этом концентрация образовавшегося иммунного комплекса для гомологичного гаптена принимается равной единице, а связывание всех гетерологичных гаптенов оценивается как доля от соответствующего связывания гомологичного гаптена. [c.37]

Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что наблюдаемые различия в аффинности антител обусловлены, в основном, значениями константы скорости диссоциации. Это было наглядно продемонстрировано в экспериментах с серией гомологичных гидрофобных ДНФ-лигандов, в которых десятикратное увеличение константы аффинности для двух перекрестно реагирующих лигандов обусловлено различием в константах скоростей диссоциации, а не ассоциации. Эти и другие результаты показывают, что именно константа скорости диссоциации определяет сродство антитела к гаптену. Этот вывод, однако, нельзя считать окончательным, поскольку количество экспериментальных данных, полученных к настоящему времени, ограничено. [c.51]

Примечание. 1. Особое внимание следует уделять преципитирующей сыворотке. Чем выше ее преципитирующий титр, тем чувствительнее реакция. Однако не все сыворотки, которые преципитируют с полным антигеном, реагируют с гаптеном поэтому каждую серию сыворотки нужно протитровать с заведомым гаптеном, полученным из патогенной гомологичной культуры. [c.159]

Весьма характерно, что молекулы антител, содержащихся в антисыворотках, не отличаются абсолютным подобием. Они различны по силе реакции с данным гаптеном и по специфичности. Это легко показать в нашем случае, если вначале добавлять к ан-тиметаниловой сыворотке белок, к которому присоединен один из перекрестно реагирующих гаптенов, до тех пор, пока не прекратится реа1 ,ия, а затем прибавить к обработанной сыворотке гомологичный или другой родственный гаптен. Для того чтобы в смеси не осталось растворимых комплексов антиген — антитело, сыворотку можно обработать гаптенами, присоединенными к нерастворимым структурам (строме), остающимся после лизиса эритроцитов и удаления гемоглобина. Сыворотка, обработанная с целью удаления всех антител, способных реагировать с данным антигеном, называется адсорбированной (истощенной). Вот результаты таких опытов [23] (схема IV) [c.22]

Видно, что в каждом случае после полной адсорбции антисыворотки белком с присоединенным гетерологичным гаптеном она сохраняет значительную способность преципитировать антигены с гомологичным гаптеном. Обычно сохраняется некоторая способность реагировать и с другими гетерологич-ными гаптенами. Каждый гаптен, очевидно, соединяется с той фракцией молекул антител, к которой имеет наибольшее сродство. Большинство молекул антител реагирует лучше всего с гомологичным гаптеном, причем подавляюшая часть их после адсорбции гетерологичным гаптеном сохраняется. Сходные результаты получили Хукер и Бойд [17] и Ландштейнер и Ван-дер-Шеер [25] с яичными альбуминами различных видов, хотя здесь истинная природа химического сходства, обусловливающего перекрестную реакцию, неизвестна. [c.23]

Это значит, что каждый гаптен подавляет преципитацию только гомологичного антитела и антигена. На соединение гаптенов со своими специфическими антителами указывает способность антитела препятствовать прохождению гаптена через диализационную мембрану, которая в иных условиях для негр проницаема. [c.27]

Другие доказательства того, что антитело специфично по отношению ко всему пептиду, были получены при адсорбции антисыворотки. При этом вначале проводится реакция антисыворотки с гетерологичным гаптеном до тех пор, пока не перестает образовываться преципитат, а затем уже такая адсорбированная сыворотка используется для реакции с гомологичным гаптеном. После адсорбции антисыворотки против —ГГЛ ГГ соответствующими антигенами остаются антитела, которые реагируют с гомологичным гаптеном, но не со сходными гантенами. Исключение составляет слабая реакция с —ЛЛГ. Проведенные для сравнения опыты с разбавленной антисывороткой показали, что эти изменения в реактивности не обусловлены одним лишь уменьшением общего содержания антител. [c.56]

Для получения информации о связи химического строения с иммунологической специфичностью в системах углевод — антиуглевод применяют следующие типы иммунологических исследований а) количественное осаждение близкородственных полисахаридов гомологичными антисыворотками с последующим построением кривых осаждения [9, 10] б) количественное осаждение гетерологичными или перекрестно реагирующими антисыворотками [11 — 13] в) ингибирование осаждения в гомологичных или перекрестно реагирующих системах олигосахаридами или простыми сахарами [6—8, 11] г) специфическое связывание олигосахаридов с антителом, определяемое методом равновесного диализа [14] д) связывание комплемента и ингибирование связывания комплемента [15, 16] е) получение искусственных антигенов с углеводными детер-минантными группами конденсацией простых сахаров известного строения с белками через азофенильную группу и сравнение специфичности появляющихся антител с известными изменениями в структуре введенных групп [17, 18] или использование, гаптенного ингибирования для выяснения специфичности антисыворотки [19—22]. [c.431]

Мышей иммунизировали конъюгатом N1P-OA (N1P — гаптен 4-гидрокси-З-йод-5-нитрофенилуксусная кислота, ОА — овальбумин кур, использованный как носитель для гаптена). При переносе клеток селезенки примированных мышей в организм сингенного облученного хозяина развивается анти-КЧР-ответ только при использовании гомологичного антигена (NIP-овальбумина). Прсдукиия антител к NIP отсутствует, если в качестве носителя использован гетерологичный белок (бычий сывороточный альбумин — BSA, сывороточный альбумин человека — HSA). При введении интактным мышам клеток селезенки от мышей, примированных к NIP-OA и BSA, ответ развивается как к NIP-OA, так и к NiP-BSA. Р.сли из клеток селезенки мышей, иммунизированных BSA, удалить Т-клетки, то оставшаяся популяция В-клеток не способна отвечать на NIP-BSA, хотя реактивность к NIP-OA сохраняется. Сделан вывод о том, что Т-клетки реагируют на носитель, в то же время В-клетки отвечают на гаптен [c.245]

В некоторых видах иммуноферментного анализа в качестве одного из реагентов используют гаптен, меченный ферментом. Если связывание в таком конъюгате аналогично способу пришивки в конъюгате гаптена с белком-иосителем для получения антител, то говорят, что в анализе используют гомологичные антитела. Если же структура ножки и способ пришивки гаптена в обоих случаях различны, то говорят о гетерологичных антителах. Применение того или иного вида антител или конъюгатов в нммунофер- [c.16]

Метод Ухтерлони проверяют антисыворотку по отношению к (1) гомологичному гаптену и носителю, (2) гаптеиу и другому носителю, (3) другому гаптену на том же носителе, конъюгированному с помощью той же химической реакции, (4) одному носителю (гл. 6). [c.94]

Весьма часто приходится сталкиваться с таким типом замыкания , при котором первичные антитела узнают носитель в составе комплекса [гаптен — носитель] (тип А). Нам удается преодолеть эту проблему благодаря использованию альбумина, выделенного из организма — донора первичных антител, в качестве носителя для гаптена. При этом ни в одном из препаратов мы ни разу не обнаружили присутствия антител к гомологичному альбумину. Для решения проблем, связанных с замыканием типа [антиген — изотип-специфический антиглобулин] (тип Б) или [антиген — мостиковые антитела] (тип В), необходимо проводить адсорбционную очистку антиглобулинов. Часто приходится сталкиваться с побочным узнаванием человеческого IgG мостиковыми козьими антителами против кроличьих иммуноглобулинов. Для предотвращения взаимодействий такого типа необходимо провести аффинную очистку мостиковых антител на колонке с иммобилизованным человеческим IgG. [c.216]

Правильность нашей интерпретации процессов, происходящих с молекулой IgG при образовании иммунного комплекса с антигеном, подтверждается также работами по изучению кинетики этой реакции. Исследовали интенсивность и поляризацию флуоресценции в процессе реакции между гаптеном флуоресцеином (Г) и гомологичным антителом (АТ) (Levison е. а., 1975) в статическом режиме и методом остановленного потока. При этом обнаружено, что процесс идет в два этапа [c.34]

Обладая способностью связываться со специфическими молекулами антител, гаптены ие образуют преципитатов, так как имеют только один центр связываиия. Поэтому для выявления такой специфической реакции приходится использовать тот или иной косвенный метод. Иногда с этой целью можпо использовать торможение гаптеном преципитации с гомологичным полным антигеном. В следуюш ем разделе обсуждаются опыты с мечеными пептидами, полученными из структурного белка ВТМ. После реакции Таких меченых пептидов с аптисывороткой осаждали глобулиновую фракцию 50%-иым раствором сульфата аммония. Измеряя радиоактивность преципитата, можно определить количество определеиного пептида, связанного с белком аптител [1970]. [c.369]

Патологические аутоантигены — тоже сложные белки. Возникают в организме при некоторых инфекционных и соматических заболеваниях. Различают, например, вирусные трансплантационные антигены , накапливающиеся на мембране клеток, ожоговые , лучевые аутоантигены. Во многих случаях их формированию, вероятно, предшествует появление гаптенов, которые, соединяясь с гомологичными белками, преобразуют их в чужеродные. В результате появляются аутоантитела к собственным клеткам, что приводит к развитию аутоимл нных болезней (тиреоидит, ревматоидные артриты и др.). [c.24]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология