Дезоксирибонуклеиновые кислоты определение молекулярного вес

Молекулярный вес нативной дезоксирибонуклеиновой кислоты, определенный методом светорассеяния [103, 104], составляет около 7-10 —9-10 . Это показывает, что средний квадратичный радиус вращения молекулы меньше, чем ожидаемый при линейной палочковидной форме следовательно, молекула дезоксирибонуклеиновой кислоты имеет либо извитую, либо разветвленную конфигурацию. Показано, что радиус уменьшается с 6500 до [c.249]

Работа 57. Определение молекулярной массы дезоксирибонуклеиновой кислоты методом вискозиметрии [c.99]

Из-за сильного межмолекулярного взаимодействия для растворов дезоксирибонуклеиновой кислоты характерна неньютоновская вязкость [ПО], т. е. значительная зависимость вязкости от скорости сдвига, особенно при высоких значениях pH, когда растворы кислоты часто обладают гелеподобными свойствами. Вязкость сильно зависит от небольших изменений pH и ионной силы она уменьшается при понижении pH или при повышении ионной силы. Поэтому вязкость не может служить критерием молекулярного веса, хотя определения вязкости используются в радиационно-химических исследованиях дезоксирибонуклеиновой кислоты. [c.250]

При проглаживании полимерного раствора в определенном Направлении макромолекулы многих полимеров ориентируются в той или иной степени по направлению движения, проявляя эффект двулучепреломления в потоке. Если в процессе сушки осуществляют непрерывное проглаживание раствора, то следует ожидать некоторой ориентации молекул в высушенной пленке. Степень ориентации ряда полимерных пленок очень высока. Макромолекулы высокоориентированных полимеров в растворе имеют вид прямолинейных жестких палочек. Даже при довольно низких концентрациях (10% и менее) такие растворы превращаются в жидкие кристаллы, обладающие самопроизвольным двулучепреломлением. Из них довольно трудно готовить изотропные пленки. В качестве примера можно привести растворы вируса табачной мозаики в воде, дезоксирибонуклеиновой кислоты в воде и растворы некоторых синтетических полипептидов, таких, как ноли-7 -бензил-Ь-глутамат, в неполярных растворителях. После высушивания растворов, поверхность которых проглаживали ровным лезвием, также получают пленки, отдельные части которых обнаруживают сильный эффект двулучепреломления. Полимеры высокого молекулярного веса ориентируются, как правило, легче, чем полимеры низкого молекулярного веса. [c.38]

Определение молекулярного веса нуклеиновых кислот (полинуклеотидов) седиментационным методом на ультрацентрифуге дает величины от 200 ООО и менее до нескольких миллионов. При полном гидролизе нуклеиновых кислот ядра клетки установлено наличие трех групп составных частей этих так называемых дезоксирибонуклеиновых кислот (они обычно обозначаются как ДНК). Это — фосфорная кислота, Д-2-дезоксирибоза (т. е. Д-рибоза, у которой второй углеродный атом несет второй водородный атом вместо гидроксила, кн. I, стр. 461) и смесь четырех гетероциклов двух пуриновых — аденина и гуанина и двух пиримидиновых — тимина и цитозина (см. стр. 349, 361). Полный гидролиз нуклеиновых [c.711]

Общими усилиями генетиков, биологов, химиков, физиков доказано, что ген есть не гипотетическая, а вполне конкретная молекулярная структура. Гены — это ни что иное, как определенные линейно расположенные участки нити дезоксирибонуклеиновой кислоты хромосом, включающие сотни следующих друг за другом нуклеотидов [c.471]

Рассмотрим кратко вопрос о том, какие виды нуклеиновых кислот содержатся в клетке и какую роль в синтезе белка играет каждый из них. Молекулы дезоксирибонуклеиновых кислот (ДНК) предназначены для хранения на-медственной информации и передачи ее прн делении клетки. Дезоксирибонуклеиновые кислоты характеризуются очень высоким молекулярным весом (до нескольких десятков миллионов) и существуют в форме двунитчатых спиралей, соединенных друг с другом водородными связями (рис. 29). ДНК всегда находится в ядре клетки и благодаря своему высокому молекулярному весу не может проникнуть через оболочку ядра и попасть в цитоплазму. Содержащаяся в ДНК наследственная информация включает сведения о всех необходимых организму белках. Эта информация зашифрована последовательностью чередования четырех нуклеотидов аналогично тому, как информация, заключающаяся в какой-нибудь книге, зашифрована определенной последовательностью 32 букв алфавита. [c.456]

Германе и Германе мл. 1 использовали метод раесеяния света для определения молекулярных весов 41 различного препарата дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), из которых почти все были получены из одного н того же источника—грудных желез теленка. Полученные ими величины находн-,чиеь в пределах от 2- 10 до 36- 10 . Возможно, что некоторые из препаратов, исследованных Германсом и Германсом мл,, были не полностью очищены от белка, с которым ДНК ассоциирована в природе. Тем не менее типично отсутствие совпадения данных по молекулярным весам ДНК, полученных в разных лабораториях. Возможно, что большинство исследованных препаратов было в некоторой степени деструктировано. [c.339]

К сожалению, в действительности это сделать довольно трудно. Метод рассеяния света, применяемый для определения размеров макромолекул, наиболее точен по ряду причин при измерениях под малыми углами рассеяния. Особенно важно проводить измерения света, рассеянного под малыми углами, при изучении растворов синтетических и биологических высокомолекулярных соединений молекулярного веса выше 3—5 млн. (например, дезоксирибонуклеиновая кислота). Однако до сих пор лишь некоторым авторам удалось провести измерения интенсивности света, рассеянного под углами до 16° (угол отсчитывается от направления падающего пучка). Серийные приборы для измерения рассеянного света работают обычно в диапазоне углов 30—150°. Поскольку подобная проблема важна и в собственно методе рассеяния света, можно отослать интересующегося читателя к монографии В. Н. Цветкова, В. Е. Эскина и С. Я. Френкеля Структура макромолекул в растворах (изд-во Наука , М., 1964), к главе Рассеяние света в растворах полимеров этой монографии, а также к оригинальным работам Бенуа, Зимма и Доти.— Прим, перев. [c.178]

Окончательное установление первичной структуры дезоксинуклеиновых кислот связано с рядом проблем, еще труднее разрешимых, чем в случае рибонуклеиновых кислот, и достижений в этой области пока еще мало. Тем не менее достигнут некоторый успех в определении последовательности оснований в одиночной цепи олигодезоксинуклеотидов. Такие продукты распада легко получаются в результате обработки дезоксирибонуклеиновых кислот дезоксирибонуклеазами. Панкреатическая дезоксирибонуклеаза [350] (дезоксирибонуклеаза I) активна в нейтральном растворе, требует присутствия магния или некоторых других двухвалентных катионов и имеет минимальный молекулярный вес 61566 [351]. Этот фермент катализирует гидролиз ДНК до сложной смеси, из которой с помощью хроматографии на бумаге, электрофореза [352] и ионообменных методов [353] были выделены дезоксинуклеозид-5 -фосфаты ( 1 %), ряд динуклеотидов (- 16%), тринуклеотиды и более высокомолекулярные олигодезоксинуклеотиды с 5 -фосфатной группой на конце. Хотя специфичность действия дезоксирибонуклеазы I не установлена полностью, ясно, что расщепление происходит по связи —3 - О — Р. Изучение динуклеотидов, содержащих как пуриновые, так и пиримидиновые основания, указало на то, что такие соединения являются почти исключительно 5 ф—Пир—З ф—5 Пур, изомерная же последовательность 5 ф—Пур—З ф—5 Пир фактически отсутствует. Предположение, что ферментом атакуются преиму- [c.421]

Наиболее важными классами природных соединений этого типа являются фосфатиды и нуклеиновые кислоты. В последнее время были достигнуты значительные успехи главным образом в изучении химии нуклеиновых кислот, что вполне понятно, если иметь в виду бурное развитие молекулярной биологии. Рибонуклеиновые и дезоксирибонуклеиновые кислоты состоят из цепей полинуклеотидов, в которых индивидуальные нуклеозиды связаны друг с другом фос-фодиэфирными связями. Различные нуклеозиды располагаются в соответствующих цепях в определенном порядке, который, как предполагают, представляет собой код наследственных признаков и свойств. Согласно другим представлениям, нуклеиновые кислоты в организмах непрерывно ресинтезируются в результате сложных [c.501]

Определение молекулярного веса нуклеиновых кислот (полинуклеотидов) седиментационным методом на ультрацентрнфуге дает величины от 200 000 и менее до нескольких миллионов. При полном гидролизе нуклеиновых кислот ядра клетки уста1Ювлено наличие трех групп составных частей этих так называемых дезоксирибонуклеиновых кислот (они обычно обозначаются как ДНК). Это — фосфорная кислота, D-2-дез-оксирибоза (т, е. й-рибоза, у которой второй углеродный атом несет второй водородный атом вместо гидроксила, кн. I, стр. 432) и смесь четырех гетероциклов двух пуриновых — аденина и гуанина и двух пиримидиновых— тимина и цитозина (см. стр. 319, 329). Полный гидролиз нуклеиновых кислот клеточной плазмы, так называемых рибонуклеиновых кислот (РНК), также дает фосфорную кислоту, /)-рибозу (вместо )-дезоксирибозы) и смесь тех же аденина, гуанина, цитозина и, кроме того, урацила. Тимин (метильный гомолог урацила) в них отсутствует. [c.673]

Генетическое кодирование аминокислотных последовательностей в белках. Известно, что последовательность аминокислот в каждом белке определяется последовательностью мононуклеотидных строительных блоков в отдельных отрезках линейной молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК). Определенные триплеты мононуклеотидов в цепи ДНК, так называемые кодоны, соответствуют определенным аминокислотам. Последовательность кодонов в ДНК коллинеарна аминокислотной последовательности кодируемой ею полипептидной цепи. Участок молекулы ДНК, кодирующий одну полную полипептидную цепь, называется цистроном или геном. В настоящее время накоплено много сведений о белках и их биологической активности на основе исследования молекулярных взаимодействий между генами и белками, поскольку [c.381]

Расширению наших представлений о форме молекул может также способствовать применение электронной микроскопии, вкратце упомянутое в предыдущем разделе. Однако важно помнить о том, что поверхностное натяжение может привести к серьезным нарушениям формы молекулы при высушивании раствора, которое необходимо для элек-тронно-микроскопического исследования. Тем не менее этот метод настолько тщательно отработан, что при известной осторожности позволяет получить надежные результаты. На электронно-микроскопических фотографиях можно было наблюдать переходы типа спираль — клубок в нуклеиновой кислоте [37]. Другим методом, который позволяет создать некоторое представление о форме чрезвычайно больших макромолекул, является авторадиография. Для этой цели образец помечается радиоактивным изотопом и очень разбавленный раствор его высушивается на подложке, которая приводится в тесный контакт с фотографической эмульсией. При выдерживании в течение времени, достаточного для того, чтобы распалось большое число радиоактивных атомов в каждой молекуле образца, изображения распадающихся атомов будут обрисовывать форму молекулы при условии, что молекула растянута и что ее размеры велики по сравнению с разрешающей способностью эмульсии. Высококачественное изображение препарата дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), полученное с помощью этого метода Кейрнсом [38], приведено на рис. 5. В данном случае но изображению может быть измерена только длина молекулы (52 х), так как толщина ее, очевидно, намного меньше разрешающей способности этого метода. Сравнительно недавними работами этого же автора [39] было показано, что молекулы ДНК, находящиеся в бактериальном вирусе, намного больше даже тех молекул, которые изображены на рис. 5, поскольку длинные молекулярные цени в растворах неизбежно разрушаются [40, 41]. Однако стенки частицы вируса можно разрушить химически, что позволяет молекулам ДНК осаждаться на мембране, которая затем может быть высушена и изучена с помощью авторадиографии. Этот метод является, по-видимому, наиболее надежным методом определения молекулярного веса таких хрупких молекул. [c.34]

Методы фракционирования низкомолекулярных оли-годезоксирибонуклеотидов уже давно разработаны [72], тогда как определение молекулярных масс высокомолекулярных дезоксирибонуклеиновых кислот пока еще не применяется в повседневной работе. [c.274]

Параллельно с анализом структуры ДНК изучались особенности ее ферментативного синтеза, приведшие в 1958 г. к обнаружению, в том числе, фермента ДНК-полимеразы. В 1959 г. С.Очоа и его ученику А.Корнбергу были присуждены Нобелевские премии за открытие механизмов биологического синтеза рибонуклеиновой и дезоксирибонуклеиновой кислот . Хотя в настоящее время в молекулярной биологии более широкое применение находят несколько иные ДНК полимеразы с улучшенными свойствами (либо позже обнаруженные в природе, либо слегка измененные или даже сконструированные исследователями), сами принципы ферментативного построения новых молекул ДНК in vitro остались неизменными. И уникальную возможность саморазмножения молекул ДНК при определенных условиях в системе in vitro с учетом комплементарности азотистых оснований также смело можно отнести к одной из ее важных черт. [c.9]