Гемоглобин седиментации

Приведем некоторые характерные значения констант седиментации рибонуклеаза— 1,6 S, -лактоглобулин — 2,8 S, гемоглобин и сывороточный альбумин — 4,3 S, фибриноген—7,9 S, мелкие вирусы— > 100 S. [c.188]

Фиг. 48. Молекулярные массы и коэффициенты седиментации окси-гемоглобина человека и миоглобина кашалота при различных концентрациях этих белков.

Рис. 140. Седиментация гемоглобина при центрифугировании с центробежной силой, равной 900 ООО (Сведберг [68]). Время между экспозициями 3 мин.

Дыхательные белки. Одним из наиболее поразительных фактов, обнаруженных при широком изучении дыхательных белков по всему животному царству, является тот факт, что пигменты, находящиеся в кровяных тельцах, состоят почти исключительно из небольших молекул с низкими константами седиментации. С другой стороны, пигменты, растворенные в плазме крови, отличаются высокими константами седиментации и значительными молекулярными весами. Гемоглобин позвоночных всегда имеет молекулярный вес 68 000, но он может обратимо диссоциировать при добавлении мочевины [75]. [c.540]

Коэффициенты седиментации и диффузии гемоглобина, приведенные к 20°, равны в воде 4 41-10 i сек и 6,3- 10 см - сек 1 соответственно. Зная, что г>=0,749 см -г" и Рн о 0,998 г-см при этой температуре, вычислить молекулярный вес бел ка. Если на 17000 г белка приходится 1 г-атом железа, то сколько грамм-атомов железа приходится па молекулу гемоглобина Ответ 68000 г-лоль" 4. [c.625]

Различие в электрофоретической подвижности гемоглобина А и 5 может объясняться изменением либо общего заряда Z, либо коэффициента трения / Сам по себе эффект трения (обусловленный изменением формы) выразился бы в том, что одно вещество двигалось бы медленнее другого во всем диапазоне pH. В рассматриваемом случае этого не происходило, судя по тому, что кривые зависимости электрофоретической подвижности от pH имели одинаковый угол наклона (рис. 5.4). Кроме того, другие физико-химические исследования, а именно определение скорости седиментации и свободной диффузии показали, что коэффициенты трения оксигенированных форм гемоглобина А и гемоглобина 8 были одинаковы. [c.91]

Все белки денатурируются под действием кислот или при нагревании, что проявляется в коагуляции и уменьЩенин растворимости, а также в потере специфических биологических свойств. Определение молекулярного веса белков является трудной задачей. Исходя из содержания железа в гемоглобине крупного рогатого скота, было найдено, что молекулярный вес этого белка лежит в пределах 16 000— 17 000. Молекулярный вес казеина, определенный по содержанию легко отщепляющейся серы, равен 16 000 и т. д. Подобные выводы, однако, справедливы лншь прн том условии, что данный белок однороден и содержит в своей молекуле только один атом того элемента, который используется для расчета молекулярного веса. Криоскопическое определение молекулярного веса затрудняется тем, что даже растворимые белки образуют коллоидные растворы наблюдаемое малое понижение точки плавления соответствует большому весу мицеллы. Более подходящими являются методы, основанные на определении скорости диффузии и вязкости. Помимо них практическое значение приобрел предложенный Сведбергом способ определения велич1п-1ы частиц по скорости седиментации в ультрацентрифуге. [c.396]

Коэффициенты седиментации и диффузии гемоглобина в воде, щиведенные к 20° С, равны соответственио 4,41-Ю-з с и 6,3-10- м /с. Зная, что г)=0,749 см /г и PHjO —0.998 r/ Ma при этой температуре, вычислить молекулярный вес белка. Если на 17 ООО г белка приходится I г-атом железа, то сколько грамм-атомов железа приходится на молекулу гемоглобина [c.622]

Полисомы были впервые обнаруя ены в ретикулоцитах кролика, участвующих в синтезе гемоглобина I64, 79, 86, 87, 93 — 95, 178]. Если осторожно разрушить оболочки ретикулоцитов, меняя осмотическое давление раствора, то полисомы высвобождаются в виде комплекса с коэффициентом седиментации 1703 по-видимому, они состоят из пяти рибосом на нити т-РНК. Этот комплекс можно обнаружить с помощью электронного микроско- [c.280]

Рис. 111. Коэффициенты седиментации и диффузии гемоглобина как функция рН12

В 1935 г. Мак-Ферлайн [2] сообщил, что результаты анализа смеси белков зависят от их общей концентрации. При повышении концентрации отношение медленных компонентов к быстрым, определенное по шлирен-диаграммам, возрастает. Педерсен [3, 4] связывал этот эффект с агрегацией. Джонстон и Огстон [5] установили, однако, что такое объяснение неверно. Они использовали окрашенный белок (гемоглобин) для визуального наблюдения его седиментации и сопоставления со шли-рен-диаграммой. Оказалось, что описанное явление является прямым следствием снижения коэффициентов седиментации с увеличением концентрации. [c.152]

Первый вопрос решался с помощью радиоактивно меченных аминокислот. Существенно то, что нам известно концевое звено цепи гемоглобина, содержащее КН2-группу, — это валин. Опыт ставился следующим образом препарат отмытых рибосом (большая часть, свьппе 80%, имеет константу седиментации 70 э) подвергался инкубации на среде с набором аминокислот и меченным С валином. Синтез шел сравнительно короткое время, что доказывает кинетический характер эксперимента. После извлечения синтезированного рибосомами белка у последнего определялась общая радиоактивность и активность N-кoнцeвoй аминокислоты путем реакции концевой аминогруппы с динитро-фторбензолом или фенилизотиоцианатом, отщепления меченой концевой группы и ее хроматографической очистки. Молекула гемоглобина (кролика) состоит из 670 аминокислотных звеньев, из которых 46 являются валинами, в том числе 4 валина — КНа-концевой группы (в молекуле гемоглобина содержится [c.453]

Размеры некоторых вирусов столь велики, а их седимента-ционные константы имеют столь высокие значения (от 150 S и, по крайней мере, до 275—350 S), что седиментация даже при относительно слабых гравитационных полях заканчивается довольно быстро. Например, при ускорении, равном 60 000 X ё, в течение 1 часа был получен вирус папилломы кролика 99,9%-ной чистоты [285]. Белки с размерами молекул, не превышающими размеры молекул гемоглобина, удается сконцентрировать в небольшом пространстве на дне пробирки в течение примерно 4 час. при относительной центробежной силе, соответствующей 100 000 — 200000X5 [21]- В благоприятных случаях можно достигнуть значительного разделения двух белков, седиментационные константы которых различаются в 2—3 раза. Для веществ, которые по скорости оседания мало отличаются друг от друга, может оказаться необходимым многократное ультрацентрифугирование однако следует помнить о том, что если можно изменить соотношение обоих компонентов, то часто увеличивается возможность успешного их разделения с помощью какого-либо иного метода, например химического фракционирования. Методы ультрацентрифугирования полезно применять для удаления смол, гликогена или других полисахаридов, которые часто имеют тенденцию соосаждаться с белками и затрудняют их кристаллизацию. [c.67]

Овомукоид ингибирует протеолитическую и эстеразную активность трипсина, измеренную, например, с такими субстратами, как денатурированный гемоглобин или этиловый эфир бензоиларгинина. Поскольку ингибируется приблизительно равный вес трипсина, то это при учете относительных молекулярных весов наводит на мысль о эквимолярном взаимодействии. В этом отношении овомукоид напоминает ряд других белков, которые обладают общим свойством ингибирования трипсина (см. обзоры [7, 60]). Выделение неактивного кристаллического вещества, содержащего эквимо-лярные количества фермента и ингибитора, при взаимодействии трипсина и ингибиторов из поджелудочной железы, соевых бобов и молозива коровы свидетельствует об образовании во всех этих случаях комплекса между ингибитором и трипсином. Образование подобного комплекса при взаимодействии овомукоида и трипсина подтверждается следующими фактами а) при электрофорезе смесь овомукоида и трипсина движется как один компонент, подвижность которого является промежуточной между подвижностью ингибитора и фермента (рис. 2) б) ультрацентрифугирование смеси дает один седиментационный пик с коэффициентом седиментации 3,8 по сравнению с величиной 2,6, которую получают при центрифугировании любого из двух компонентов комплекса [61, 12]. Однако молярное отношение 1 1 является лишь приблизительным, поскольку имеется доказательство существования комплексов, включающих более одной молекулы трипсина на молекулу [c.35]

Точность седиментационных измерений позволяет проводить с их помощью довольно тонкие опыты по распознаванию структурных отличий. Измерение коэффициента седиментации гемоглобина дает величину - 4,45 S. Индивидуальный коэффициент седиментации каждой из четьфех его субъединиц (две а и две ) равен примерно 1,77 0,055 S. С помощью теории Кирквуда — Райзмана (разд. 10.2) можно, оценить коэффициент седиментации тетрамера, зная свойства мономера. Если у тетрамера (t) и мономера (m) одно и то [c.240]

При инокулящш беременных овец спорами а.fumigatue отмечены незначительные изменения содержания гемоглобина, уровня седиментации эритроцитов и других показателей крови, но к концу беременно- [c.36]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология