Сывороточный седиментации

Коэффициентом седиментации служит Сведберг (С), причем 1 С=10 1 с. Приводим значения коэффициентов седиментации s o, w некоторых биологических частиц (в С) трипсин 3, сывороточный альбумин 4, фибриноген 8, каталаза 10, рибосомы 70—80, вирус полиомиелита 100, вирус гриппа 600. [c.155]

Приведем некоторые характерные значения констант седиментации рибонуклеаза— 1,6 S, -лактоглобулин — 2,8 S, гемоглобин и сывороточный альбумин — 4,3 S, фибриноген—7,9 S, мелкие вирусы— > 100 S. [c.188]

Константа седиментации для препарата бычьего сывороточного альбумина в водном растворе при 20° равна 4,29 5, коэффициент диффузии при той же температуре 6,1 10" см сек , а парциальный удельный объем 0,734 см 1г. Определите молекулярный вес этого альбумина. [c.197]

Рис. 110. Коэффициенты седиментации и диффузии сывороточного альбумина как функция рН1 <.

Следует отметить, что выводы, сделанные нами на основании вискозиметрических данных, можно подтвердить с помощью ряда других фактов. Например, данные по седиментации и диффузии , приведенные на рис. ПО, подтверждают то же заключение относительно разворачивания молекул сывороточного альбумина в кислом растворе, что и данные рис. 153. Исследуя изменения оптического вращения и деполяризации флюоресценции можно получить другие доказательства. [c.587]

Аппараты могут быть использованы для нанесения ограниченного количества клеток (максимум 10 клето(к) на поверхность градиента сыворотки, бычьего сывороточного альбумина или фиколла. При большом количестве клеток создаются проблемы на границе раздела градиента и образца, где клетки проваливаются в градиент. Этого можно избежать, если создавать промежуточный слой между клетками и градиентом. Главным недостатком седиментации в поле силы тяжести является длительность разделения. [c.167]

Процесс установления равновесия иногда занимает день или больше. Поскольку при таких больших сроках возможны денатурация или бактериальное загрязнение, искажающие результаты эксперимента, разработан ряд приемов, позволяющих ускорить установление равновесия. Длительность этого процесса прямо пропорциональна квадрату высоты столба жидкости. Если оиа равна 1—3 мм, процесс установления равновесия длится в течение нескольких часов. Для ячеек с высотой столба жидкости 0,8 мм это время при седиментации сахарозы, рибонуклеазы и бычьего сывороточного альбумина равно соответственно 15, 45 и 70 мин. Однако при таких размерах снижается точность и чувствительность к гетерогенности, хотя в этом случае можно работать при больших угловых скоростях. С помощью многоканальных ячеек производится одновременное определение нескольких концентраций при одинаковой температуре. К уменьшению времени достижения равновесия приводит также такой режим вращения ротора, при котором начальное значение скорости выбирается несколько завышенным и затем постепенно снижается. Концентрацию можно измерять с помощью интерференционного метода Релея, а молекулярный вес рассчитывать, используя значение градиента концентрации в точке перегиба (т. е. средней точке на фиг. 35, Л). Для обеспечения постоянства скорости, необходимого в некоторых экспериментах по седиментационному равновесию, лучше всего использовать магнитную подвеску стального р тора в высоком вакууме. В этих условиях скорость уменьшается всего на 1 об1мин за сутки. [c.194]

Однако в растворах макроионов, содержащих добавленный электролит, могут возникнуть два дополнитльных эффекта. Один из них (называемый вторичным эффектом заряда) появляется, когда какой-нибудь из ионов добавленного электролита имеет тенденцию отделяться от своего противоиона. В этом случае одно лишь присутствие соли вызывает появление электрического поля, которое будет увеличивать скорость седиментации, если более тяжелый ион соли имеет заряд, противоположный по знаку заряду. макроиона, и будет уменьшать ее, если имеет место обратная картина. Педерсен нашел, что введение 0,2М СзС1 увеличивает коэффициент седиментации сывороточного альбумина, для которого заряд макроиона отрицательный, тогда как добавление 0,2М уменьшает его. Этот результат, конечно, можно ожидать, так как Сз осаждается быстрее, чем С1, в то время как Л осаждается быстрее, чем Ы . Величина эффекта (с зарядом макроиона [c.431]

Наряду с этим происходит вытеснение легких компонентов из придонных областей кюветы, что приводит к увеличению их концентрации, и регистрируется на седиментационной диаграмме. Этот эффект был обнаружен еще в середине 30-х годов, но впервые правильное объяснение ему было дано Огстоном и Джонстоном [73]. Сущность этого явления легко может быть понята при рассмотрении седиментации бинарной смеси раствор легкого компонента может рассматриваться при этом как растворитель тяжелого. Неизбежный противоток растворителя при движении тяжелого компонента ко дну кюветы приводит к увеличению концентрации легкого компонента. При очень большом различии молекулярных весов компонентов этот противоток может реально наблюдаться как отрицательная седиментация легкого компонента. В монографии Шахмана [2] описана такая отрицательная седиментация сывороточного альбумина (5о 4,45) в присутствии сферических частиц вируса карликовой кустистости (. о 130), При седиментации полидисперсного полимера с непрерывным МВР эффект Огстона — Джонстона приводит к некоторому обогащению смеси легкими компонентами. При малых с этим обогащением обычно можно пренебречь. [c.474]

Противопневмококковые анти хела у лошади, свиньи, быка, а возможно, и у других видов имеют молекулярный вес около 900 ООО. Некоторые антитела в крови человека, вероятно, имеют молекулярный вес, величина которого лежит где-то между этими величинами (см. [1]). Зная константу седиментации в ультрацентрифуге, константу диффузии и отношение Перрена [10] между коэффициентом асимметрии и отношением осей вытянутого сфероида, можно рассчитать форму белковых молекул. Модели типичных молекул антител и (для сравнения) молекулы сывороточного альбумина человека приведены на фиг. 3. [c.15]

Рис. 142. Диаграмма седиментации сывороточного альбумина в 2,6-про-центном растворе клупеина [74].

Измерения с помощью ультрацентрифуги, произведенные Гейдельбергом, Педерсеном и Тизелжусом, послужили доказательством того, что антитела являются видоизмененными сывороточными белками. С тщательно очищенными препаратами были получены константы седиментации, подобные константам, определенным для сывороточного глобулина кроме того, иммунная активность оказалась связанной с тем веществом, константа седиментации которого измерялась. В сочетании с электрофоретическими измерениями оказалось возможным разделить глобулины с одинаковым молекулярным весом, но с различными электрохимическими свойствами. Оказалось, что фракция -глобулина, выделенная из сыворотки кролика, несет функции антител [84]. Пневмококковые антитела человека также связаны с фракцией -глобулина и по форме молекул значительно отличаются от сферической формы [85]. Зайберт, Педерсен и Тизелиус [86] показали, что полисахариды и белковые фракции, выделенные из различных фильтратов туберкулезных бацилл, имеют одинаковые константы седиментации (около 1,7 10" ). Они по существу однородны и имеют молекулярный вес около 9000. Для белков туберкулезных штаммов быка и человека было найдено, что молекулярные веса равны соответственно 10 000 и 32 000. [c.547]

Для получения градиента низкой плотности, стабилизирующего седиментацию клеток, различные лаборатории используют три основных реагента бычий сывороточный альбумин, сыворотку плода коровы и фиколл. В табл. 1 указаны эти реагенты и их концентрации, используемые для седиментационной среды. Бычий сывороточный альбумин и сыворотка плода коровы (Gib o, Гранд Айленд, США)—это белковые материалы, обладающие выраженными буферными свойствами. Первый из них мы получаем в виде лиофилизированпого препарата фракции V по Кону (Pentex, США), растворяем в сбалансированном солевом растворе Игла (см. разд. III, А) до концентрации 20%, фильтруем и храним при 4°С доводим pH до нужной величины с помощью [c.269]

При гельфильтрации на сефадексе Г-200 белков сыворотки крови обычно получают три основные фракции, соответствующие макроглобулинам, у-глобулинам и альбуминам с коэффициентом седиментации 198, 78 и 48 соответственно [328, 65]. При этом антитела находятся в двух фракциях, соответствующих глобулинам с 198 и 78, Однако О. В, Бароян с сотр, [5] обнаружили гельфильтрацией на сефадексе Г-200 низкомолекулярные вируснейтрали-зующие антитела в сыворотках больных клещевым энцефалитом. Они элюировались во фракция, соответствующей сывороточному альбумину,, и имели молекулярный вес 13 500. [c.137]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология