Сывороточный альбумин коэффициент диффузии

Предположив, что молекулы сывороточного альбумина имеют сферическую форму, вычислить их радиус, зная, что коэффициент диффузии при 20° С равен 6,15-10 см /с. Коэффициент вязкости воды при этой температуре равен 0,001 Па-с. [c.624]

В качестве примера приведем измерения Вебера , проведенные на сывороточном альбумине. Измерения деполяризации, сделанные вблизи изоэлектрической точки белка, дают коэффициенты вращательной диффузии, которые согласуются с коэффициентами, определенными другими методами (табл. 29). Из этого вытекает, что флюоресцирующее место (в этом случае молекула красителя, соединенная с молекулой белка) является неспособным к независимому движению. Когда pH уменьшается, наблюдается резкое увеличение степени деполяризации, т. е. вращательное движение флюоресцирующего места становится облегченным. В то же самое время, как было показано на рис. 110, наблюдается увеличение поступательного коэффициента трения, которое в отсутствие других данных можно объяснить предположением, что либо сывороточный альбумин принимает новую удлиненную жесткую конформацию или что его структура становится рыхлее (набухает) и приближается к структуре гибкого клубка. В любом случае это должно сопровождаться увеличением вращательного коэффициента трения молекулы в целом. Наблюдаемое увеличение свободы вращения флюоресцирующего места должно, следовательно, соответствовать увеличению свободы внутреннего вращения, т. е. это означает, что новая конформация сывороточного альбумина является рыхлой, гибкой структурой. [c.512]

Рис. 101. Зависимость коэффициента диффузии бычьего сывороточного альбумина от концентрации. Символ указывает на то, что D был определен из уравнения (21-24) по методу высота—площадь, т. е. по высшей точке и площади пика .

Рис. 110. Коэффициенты седиментации и диффузии сывороточного альбумина как функция рН1 <.

Для растворов белков вопрос осложняется электростатическим взаимодействием между молекулами и их влиянием на молекулы воды. Вязкость белковых растворов поэтому зависит от pH. Повышение кислотности вызывает увеличение объема молекул сывороточного альбумина и у-глобулина человека, в то время, как инсулин, Р-лактоглобулин, трипсин, химотрипсин рибонуклеаза, яичный альбумин и другие белки не изменяют при этом своих размеров (Ж. Янг и Ж. Фостер). Таким образом, путем измерения одной вязкости нельзя определить молекулярный вес белков. Однако, комбинируя измерение вязкости с другими методами, можно определять размеры и форму белковых молекул. Так, Полсон показал, что величина D Ai[t)] является величиной постоянной для белковых молекул. Здесь D — коэффициент диффузии. [c.173]

Рассматривая, наконец, данные, приведенные в табл. 29 для сывороточного альбумина, мы должны заметить, что сывороточный альбумин является по всем критериям (как, например, в табл. 16 и 21) компактной молекулой. Коэффициент диффузии сывороточного альбумина (см. табл. 16) указывает, что его гидродинамическая частица может быть представлена продолговатым эллипсоидом с 6 =0,2 и а/6=4,9 соответствующие размеры составляют 2а= 168 А и 26=34 А. Данные по вязкости в табл. 21 указывают, с другой стороны, что соответствующий эллипсоид с 6i=0,2 должен иметь а/6=3,3, т. е. 2а=129 А, 26=39 А. (Отсутствие согласия между двумя рядами размеров наблюдается независимо от выбора 6j.) При обсуждении этих данных было отмечено, что выбор значения 0,2 для параметра б был сделан произвольно, и возможность того, что гидродинамическая частица сывороточного альбумина является фактически сферой с гораздо большей величиной б , не может быть исключена. В рассматриваемых измерениях сферическая форма немедленно отпадает, поскольку для сферы никакого двойного лучепреломления не может наблюдаться. Кроме того, длины, рассчитанные при помощи коэффициентов вращательной диффузии, зависят относительно мало от выбранной величины aib. Три значения были рассчитаны при предположении, что а Ь=А [используя не уравнение (25-9), а более полную форму уравнения Перрена, применимую при а/Ь<5], и расчеты привели, как показано, к длине около 190 А. Если мы положим а/Ь=2, то эта величина будет составлять около 155 А, а если теперь взять максимальное значение а Ь, допускаемое коэффициентом диффузии (а/6=6,5, см. табл. 17), то она станет равной 210 А. Любая из этих длин является, очевидно, сонме- [c.506]

Константа седиментации для препарата бычьего сывороточного альбумина в водном растворе при 20° равна 4,29 5, коэффициент диффузии при той же температуре 6,1 10" см сек , а парциальный удельный объем 0,734 см 1г. Определите молекулярный вес этого альбумина. [c.197]

Тогда возникает вопрос, каким образом ориентационный эффект проявляется в случае некоторых типичных жестких частиц растворенного вещества. Известно, что вирус табачной мозаики имеет стержневидную форму длиной около 3000 А и диаметром 150 А [705]. Использование уравнения (VI-72) приводит к коэффициенту вращательной диффузии в воде (т]о = 0,01 пуаз), равному около 6-10 сек . Это вполне приемлемый порядок величин при градиенте скорости 10 сек- угол гашения должен уменьшиться на 8° по сравнению с предельной величиной, составляющей 45°. С другой стороны, можно подсчитать, что сывороточный альбумин человека, размеры молекулы которого аппроксимируются эллипсоидом с 1 = 75 А, 2 = 20 А [706], имеет в водном растворе Dr = == 1,5-10 се -1. Эта величина настолько высока, что эксперимент по определению двойного лучепреломления в потоке практически невозможен, так как ламинарный поток нельзя поддерживать при градиентах скорости, необходимых для создания заметного ориентационного эффекта. Применение очень высоких градиентов скорости должно также привести к накоплению тепла за счет трения жидкости со скоростью, которая бы затруднила сохранение термодинамического контроля. Можно отметить, что использование вязких растворителей облегчает изучение ориентации, так как эти растворители уменьшают Dr и, таким образом, позволяют использовать соответственно более низкие значения градиента скорости. [c.246]

Различная степень набухания ионообменных смол в воде (и в водных растворах), зависящая от степени сшитости ионита, числа и свойств ионогенных функциональных групп, приводит к различию в проницаемости зерен сорбентов для ионов больших размеров. Повышение степени набухания ионитов вызывает повышенную способность для ионов больших размеров проникать в зерна и поглощаться сорбентами. Так, например, ионы органических веществ с молекулярным весом порядка 500—1000 могут быть сорбированы с огромными емкостями, превышающими вес сухого сорбента при коэффициентах набухания ионитов (отношении объема набухшей смолы к объему сухой смолы) порядка 3—4. Емкость сорбции тех же веществ на сильносшитых сорбентах, полученных при введении 10—20% дивинилбензола в смолу, составляет всего лишь миллиграммы на грамм сорбента. На этой основе созданы системы сорбентов с постепенно изменяющейся пористостью (проницаемостью). Так, сульфокатиониты типа СБС с коэффициентом набухания 1,2—1,4 сорбируют лишь аминокислоты и низкомолекулярные пептиды те же катиониты с коэффициентом набухания 1,7—2 сорбируют уже пептиды с молекулярным весом порядка тысячи наконец, катиониты СБС с коэффициентом набухания 4 поглощают сотни миллиграмм инсулина в расчете на грамм сорбента, не сорбируя сывороточные альбумин и глобулин [16]. Избирательная сорбция инсулина из белковых растворов проводится в колонке, заполненной набухающей сульфосмолой с зернами диаметром 0,2—0,5 мм. Медленная диффузия молекул белков в столь большие зерна сорбента не приводит к равновесию даже в течение многих часов. В связи с этим емкость сорбции зависит существенным образом от времени контакта раствора и сорбента. При значительных временах эксперимента сорбентом начинает поглощаться уже заметное количество белков большего молекулярного веса, что ухудшает избирательность сорбции инсулина. [c.197]

Изменяются и молекулярно-кинетические свойства белков, зависящие от величины и формы их частиц. При денатурации таких белков, как сывороточный альбумин и глобулин, яичный альбумин и р-лактоглобулин, под действием различных денатурирующих факторов — крайние значения pH, обработка мочевиной и др. — сильно увеличивается удельная вязкость, наблюдается увеличение коэффициента диссимметрии и величины двойного личепреломления в потоке, а также уменьшение константы диффузии. Все это служит указанием на то, что при денатурации глобулярных белков происходит увеличение асимметрии белковой молекулы, обусловленное переходом от упорядоченной компактной глобулы к беспорядочному клубку. [c.190]

Противопневмококковые анти хела у лошади, свиньи, быка, а возможно, и у других видов имеют молекулярный вес около 900 ООО. Некоторые антитела в крови человека, вероятно, имеют молекулярный вес, величина которого лежит где-то между этими величинами (см. [1]). Зная константу седиментации в ультрацентрифуге, константу диффузии и отношение Перрена [10] между коэффициентом асимметрии и отношением осей вытянутого сфероида, можно рассчитать форму белковых молекул. Модели типичных молекул антител и (для сравнения) молекулы сывороточного альбумина человека приведены на фиг. 3. [c.15]

Как показало кинетическое исследование [269] явления массопереноса бычьего сывороточного альбумина (БСА) в двух разных анионообменных колонках (Resouг e-Q и Т8К-СЕЬ-ВЕАЕ-5РЛ ), концентрационная зависимость общего коэффициента скорости массопереноса показывает, что при хроматографическом разделении в колонках и анионообменниках происходят несколько процессов продольная дисперсия, массоперенос из жидкости в частицу, диффузия внутри частиц и адсорбционно-десорбционные процессы. В колонке Resouг e-Q диффузия внутри частиц дает основной вклад в уширение полосы по сравнению с уширениями от других процессов. Коэффициент диффузии по поверхности БСА имеет положительную концентрационную зависимость, которой, по-видимому, можно объяснить линейную зависимость коэффициента скорости массопереноса от концентрации БСА. С другой стороны, в колонке Т8К-ОЕЬ-ВЕАЕ-5РЛ вклад адсорбции/десорбции имел почти такую же величину, как вклад из-за диффузии внутри частиц. В целом кинетика массопереноса на этих двух анионообменниках имеет некоторые отличия. Авторы делают вывод, что положительная концентрационная зависимость коэффициента диффузии по поверхности может быть объяснена моделью гетерогенной поверхности. [c.440]