Молекулярный вес, определение помощью ультрацентрифуги

Определение молекулярной массы при помощи ультрацентрифуги принципиально можно осуществить либо в состоянии равновесия, либо по скорости осаждения макромолекул. Если г - расстояние в момент I от частицы до оси вращения, а со -угловая скорость, то изменение химического потенциала раствора в результате осаждения можно выразить следующим образом [c.46]

Метод определения молекулярной массы при помощи ультрацентрифуги разработан Сведбергом, который сконструировал специальную центрифугу с центробежным ускорением до Определение молекулярной массы [c.109]

Таблица 42. Частичная (молекулярная) масса белковых веществ, определенная с помощью ультрацентрифуги

В ряде случаев константа седиментации зависит от концентрации полимера. При этом установлена линейная зависимость между и с. Поэтому перед определением молекулярного веса вещества с помощью ультрацентрифуги находят несколько значений константы седиментации для различных концентраций, строят график в координатах [c.73]

Методы седиментационного равновесия и приближения к нему являются абсолютными методами определения молекулярной массы [93, 94]. Под действием сил тяготения Земли обычно не наблюдается оседание (всплывание) макромолекул с М 10 , так как силы притяжения к Земле значительно меньше сил, действующих на них со стороны растворителя. Поэтому в результате теплового движения макромолекулы равномерно распределены по всему объему. Для того чтобы макромолекулы с первоначальным равновесным распределением переходили к новому распределению, создают сильное центробежное поле с помощью ультрацентрифуг различных конструкций. [c.137]

Получение функции распределения высокодисперсных систем при помощи ультрацентрифуги было реализовано Сведбергом и его сотрудниками и в особенности Ринде Такие определения, как и определения молекулярных весов (по седиментационному равновесию) коллоидов, основаны на измерении концентраций в центрифугируемой пробе на различном удалении от оси вращения. Такого рода измерения до сих пор осуществляются, например, посредством фотографирования вращающейся кюветы и последующего фотометрирования фотографий, полученных через различное время после начала центрифугирования. [c.22]

Определение молекулярного веса производится методами, обычно применяемыми для высокополимеров, — путем измерения осмотического давления, с помощью ультрацентрифуги, вискозиметрическим методом и т. д. Применение этих методов в случае высших полиоз связано с рядом трудностей, обусловленных нестойкостью растворов (выпадение полиоз в осадок, ассоциация молекул). Для получения более надежных данных полярные группы молекул высокополимеров иногда предварительно защищают , переводя полиозы в алкильные (метильные) или ацильные (ацетильные) производные, что препятствует ассоциации определения проводят в неводных растворителях (хлороформ, дихлорэтан и т. д.). [c.699]

Молекулярный вес некоторых белков, определенный при помощи ультрацентрифуги [c.12]

МНОГО полезного в технику ультрацентрифугирования. В этом обзоре описаны многие важные экспериментальные детали — конструкция кювет, оптические системы и пр., — а также теоретические основы метода.) Существует несколько методов определения молекулярного веса с помощью ультрацентрифуги. Ниже мы рассмотрим наиболее важные из них, начиная с классического метода, основанного на измерении скорости седиментации. [c.65]

Наиболее сложным, но зато и самым надежным представляется метод исследования высокополимерных соединений с помощью ультрацентрифуги (Свед-берг). Этот метод получил название седиментационного метода определения молекулярного веса. [c.367]

МОЛЕКУЛЯРНЫЙ ВЕС НЕКОТОРЫХ БЕЛКОВ, ОПРЕДЕЛЕННЫЙ ПРИ ПОМОЩИ УЛЬТРАЦЕНТРИФУГИ [c.264]

Частичный (.молекулярный) вес белковых веществ, определенный с помощью ультрацентрифуги [c.355]

Б. Определение молекулярного веса с помощью ультрацентрифуги может быть осуществлено двумя способами по скорости седиментации и по седиментационному равновесию. [c.63]

С помощью ультрацентрифуги был определен молекулярный вес белков. [c.51]

Молекулярный вес определен при помощи ультрацентрифуги. [c.140]

Определение молекулярного веса при помощи ультрацентрифуги является наиболее всесторонним методом, так как при этом наряду с определением размера молекул можно определить степень полидисперсности исследуемого продукта и получить представление о форме молекул. Этот метод разработан Сведбергом, который сконструировал специальную ультра центрифугу с очень большим числом оборотов, благодаря чему возникает огромная центробежная сила, превышающая во много раз (в 10 — 10 раз) силу тяжести. Нри измерениях в ультрацентрифуге исследуемый раствор помещается в прозрачный сосуд, который закрепляется в дискообразном роторе, приводимом в быстрое вращение. Изменение концептрации раствора, происходящее под влиянием центробежной силы, регистрируется фотографически по абсорбции света исследуемым раствором или по изменению показателя преломления. [c.31]

Определение молекулярного веса при помощи ультрацентрифуги производится двумя способами 1) на основании исследования распределения концентраций раствора после установления седиментационного равновесия и 2) по исследованию скорости седиментации. [c.31]

Книга представляет собой второй том издания, посвященного физическим методам анализа, изучению строения и идентификации органических соединений (I том вышел в 1950 г.). Во втором томе изложены вопросы измерения и регулирования температур, калориметрии, микроскопии, определения давления пара и определения молекулярного веса с помощью ультрацентрифуги. Каждая глава содержит теоретический раздел, описание приборов и методов исследований. [c.4]

При выводе этих выражений предполагается, что ни конвекция, ни электростатическое поле, возникающее вследствие разделения ионов, не действуют на частицы. В современных ультрацентрифугах регулирование температуры устраняет конвекцию при применяемых концентрациях, а электростатические потенциалы могут быть снижены до ничтожной величины благодаря применению соответствующих буферов. Анализы, проводимые с помощью ультрацентрифуги, представляют собой поэтому один из немногих основных методов определения абсолютного значения молекулярного веса или размера частиц. [c.464]

Определение с помощью ультрацентрифуги дает для различных белков сильно отличающиеся величины молекулярного веса 70 000 для сывороточного альбумина, 38 000—41 000 для лактальбумина, 41800 ДЛЯ лактоглобулина, 44 ООО для яичного альбумина, 167 ООО для глобулина сыворотки крови, 208 000 для легумина, 75 000—375 000 для казеина, 2 000 000 для гемоцианина из O topus vulgaris, 6 650 000 для гемоцианина улитки. Насколько эти данные соответствуют истинному молекулярному весу, а не весу мицеллы, судить трудно. [c.396]

Молекулярно-кинетические методы основаны на перемещении макромолекул относительно растворителя и сводятся, в конечном счете, к определению соответствующей силы грения К этой группе методов относятся определение молекулярного веса по скорости яиффузии, с помощью ультрацентрифуги и по вязкости растворов. [c.425]

Одной из особенностей коллоидных растворов поверхностноактивных веществ является их способность к образованию мицелл. Молекулярный вес образующихся мицелл, так называемы мицел-лярный вес, составляет обычно несколько десятков тысяч. Значение средневесового мицеллярного веса ПАВ можно определить различными методами, которыми пользуются и для нахождения молекулярного веса полимеров. Сюда относятся методы, основанные на измерении светорассеяния растворами ПАВ и на определении диффузионной способности мицелл, а также метод седиментационпого анализа с помощью ультрацентрифуги. Наиболее эффективным и вместе с тем относительно простым методом оценки размеров коллоидных частиц в растворах является метод светорассеяния. С помощью этого метода определяют значение мицеллярного веса ПАВ в данной работе. Вывод теории светорассеяния применительно к разбавленным растворам ПАВ, содержащим мицеллы, размер которых не превышает /20 длины волны видимого света, может быть записан в следующей форме [c.122]

Разработаны химические методы определения величины полинептидных цепей белковой молекулы. Эти методы основаны на использовании особого реагента (динитрофторбензола), который соединяется со свободной а-амино-грунной аминокислотного остатка, стоящего на конце нолипептидной цепи, с образованием окрашенного комплекса этот комплекс можно выделить и идентифицировать после того, как белок подвергнется гидролизу на составляющие его аминокислоты (в том числе и на конечную аминокислоту с присоединенной к ней окрашенной группой). Так, лизоцим, белок, содержащийся в слезах и яичном белке и обладающий свойством уничтожать бактерии, имеет, как было установлено ири помощи ультрацентрифуги, молекулярный вес около 14 ООО и состоит примерно из 125 аминокислотных остатков. Применение описанного метода позволило показать, что имеется лишь одна свободная а-аминогруппа, и на этом основании был сделан вывод, что данная молекула состоит из одной нолипептидной цепи. Если эта полипептид-ная цепь была бы растянута, то ее длина составляла бы около 450 А. Однако, как установлено при помощи ультрацентрифуги, дифракцией рентгеновских лучей и другими методами исследования, молекула лизоцима по форме близка к шару с диаметром около 25 А. Отсюда следует, что нолипептидная цепь не может быть вытянутой, а должна быть скрученной, ибо только тогда молекула приобретет сферическую форму. [c.487]

Фракционный состав. Фракционный состав полиамидов был определен Бреслером, Коршаком, Павловой и Финогеновым [2] при помощи ультрацентрифуги. Они показали, что действительное распределение по молекулярным весам резко отличается от того, которое предусматривает теория Флори, так как является более резким и с углублением реакции мало изменяется. [c.252]

Для полистирола характерна разветвленность цепи, что доказывается сравнительно большим расхождением между молекулярным весом, определенным вискозиметрическим методом и установленным при помощи ультрацентрифуги, или по осмотическому давлению растворов. При, этом чем выше температура полимеризации, тем больше расхождение (Шульц и Гуземан), г. е. тем больше разветвленность цепи полистирола. [c.418]

Из физических методов определения молекулярного веса применимы следующие осмотический с помощью ультрацентрифуги диффузионный диализ ультрафи тьтрация вискозиметрический. [c.69]

Измерения с помощью ультрацентрифуги требуют значительных затрат на оборудование. Определение скорости седиментации и константы диффузии дают средневесовое значение молекулярного веса или веса частиц исследуемого вещества. Эти измерения, кроме того, позволяют сделать вывод о молекулярном распределении и о форме частиц полимера в данном растворе. [c.157]

При помощи ультрацентрифуги возможно определение молекулярного веса и степени полидисперсности различных высокомолекулярных соединений. До сих пор при помощи ультрацентрифуги широко изучались протеины. При этом было найдено, что многие природные белки в основном являются полп-дисперсными, а величина частиц, выраженная в единицах молекулярного веса, составляет число, кратное 17 600. При исследовании. полистиролов было обнаружено, что молекулярные веса, найденные с помощью ульграцентрифуги, вполне совпадают с молекулярными весами, найденными осмотическим методом для тех же препаратов. [c.59]

Из аналитических методов следует назвать метод ультра-центрифугирования, основанный на определении скорости седиментации макромолекул в растворе, помещенном в сильное центробежное поле, и метод турбидиметриче-ского титрования, основанный на измерении возрастания оптической плотности раствора при осаждении полимера из раствора постепенным добавлением не растворяющей полимер жидкости (осадителя). Определение молекулярного состава, как и средней степени полимеризации, с помощью ультрацентрифуги дает наиболее точные результаты, однако требует дорогого и сложного оборудования. Турбидиметрическое титрование в существующем виде позволяет получить лишь приближенную характеристику распределения по молекулярным весам. Более подробно об этих методах можно прочитать в специальной литературе [1—3]. [c.302]

Результаты определения. Данных о молекулярном весе природной недеструктированной целлюлозы очень мало. Это обусловлено тем, что даже при применении самых лучших методов выделения и очистки целлюлозы она деструктируется. Например, величина СП = 3000 уже рассматривается как полученная в результате деструкции. При очень тщательном проведении эксперимента получают СП = 10 ООО, а по данным советских авторов —до 15 000. Обычная волокнистая целлюлоза имеет СП = 6000— 7000. Целлюлоза в первичной стенке клетки характеризуется СП = 1500— 3000. Степень полимеризации древесной целлюлозы (при осторожном ее выделении) равна 3000. При измерении СП с помощью ультрацентрифуги получены более высокие значения — до 11 ООО для хлопка и до 36 ООО для льна (по данным Гралена). [c.44]

В случае гомомолекулярного полимера, содержащего макромолекулы одинаковой длшш, все три средних значения молекулярного веса будут равны друг другу. Но если полимер не однороден, полидиснерсен, то их значения будут не одинаковы. В этом случае числовой средний молекулярный вес можно найти, пользуясь такими методами криоскопическим, эбулиоскопическим, осмотическим или же определением концевых групп. Средний весовой молекулярный вес определяют при помощи вязкости, светорассеяния и седиментации. Средний седиментационный молекулярный вес определяют при помощи ультрацентрифуги. [c.251]

Рис. 121. Дифференциальная кривая расиродолония по молекулярным весам сополимера стирола и бутадиена, определенная при помощи ультрацентрифуги [65]

Измерения с помощью ультрацентрифуги, произведенные Гейдельбергом, Педерсеном и Тизелжусом, послужили доказательством того, что антитела являются видоизмененными сывороточными белками. С тщательно очищенными препаратами были получены константы седиментации, подобные константам, определенным для сывороточного глобулина кроме того, иммунная активность оказалась связанной с тем веществом, константа седиментации которого измерялась. В сочетании с электрофоретическими измерениями оказалось возможным разделить глобулины с одинаковым молекулярным весом, но с различными электрохимическими свойствами. Оказалось, что фракция -глобулина, выделенная из сыворотки кролика, несет функции антител [84]. Пневмококковые антитела человека также связаны с фракцией -глобулина и по форме молекул значительно отличаются от сферической формы [85]. Зайберт, Педерсен и Тизелиус [86] показали, что полисахариды и белковые фракции, выделенные из различных фильтратов туберкулезных бацилл, имеют одинаковые константы седиментации (около 1,7 10" ). Они по существу однородны и имеют молекулярный вес около 9000. Для белков туберкулезных штаммов быка и человека было найдено, что молекулярные веса равны соответственно 10 000 и 32 000. [c.547]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология