Триптофан проба

Окислителем служит ЫаЫОг или кислород воздуха. При определении триптофана реактивами служит 4-диметиламинобензальдегид [62, 63] и ванилин [64]. Реакция с триптофаном используется, например, для определения акролеина [3]. Пары акролеина поглощают из пробы воздуха 2 мл охлажденной льдом смеси, состоящей из 100 мл хлористоводородной кислоты (пл. 1,19), 40 мл воды и 20 мл этилового спирта. К пробе прибавляют 0,2 мл 0,2%-ного раствора триптофана в ОД н. хлористоводородной кислоте и нагревают 30 мин при 40—50 С. Оптическую плотность фиолетового раствора измеряют при 590 нм. Таким способом определяют 2—20 мкг акролеина в 2 мл раствора. [c.163]

Ксантопротеиновая проба. Концентрированная азотная кислота реагирует с белком, содержащим бензольное кольцо (например, триптофан, тирозин). Образуется желтое окрашивание. При добавлении щелочи желтый цвет переходит в оранжевый. [c.333]

Гидролиз пищевых продуктов. Чаще всего при определении аминокислотного состава пищевых продуктов используют кислотный гидролиз в 6 н. растворе НС1, проводимый в запаянных ампулах при температуре ПО—120°С в продолжение 22—24 ч [38, 48, 61]. Необходимо отметить, что гидролиз — наиболее несовершенная операция в аминокислотном анализе, так как в белках содержится несколько лабильных аминокислот (треонин, серин, цистин, метионин, гистидин, триптофан, тирозин), которые, по мнению многих авторов, заметно разрушаются даже при кратком кислотном гидролизе другие (валин, лейцин, изолейцин), наоборот, с трудом высвобождаются из полипептидных цепей при длительных сроках гидролиза (в течение 70—80 ч). Поэтому для определения истинных количеств аминокислот в белках при особо точных исследованиях гидролизуют несколько (3—4) проб белка при различных сроках (20—80 ч). Путем построения графиков зависимости количества аминокислот от длительности гидролиза находят истинное значение содержания лабильных аминокислот, экстраполируя кривую к начальному моменту гидролиза. [c.190]

Пробу Гопкинса — Кола с триптофаном используют для того, чтобы отличить казеин от соевого волокна. [c.222]

Каи и Вайман [9] сравнивали содержание аминокислот в сточных водах и стоках. Пробу объемом 1 л, содержащую свободные аминокислоты, упаривали при 40 °С и сухой остаток экстрагировали этанолом. Полученные данные соответствуют результатам, приведенным в работах [6, 7]. При определении связанных аминокислот 1 л пробы упаривали досуха при 60 °С и полученный остаток гидролизовали 25 мл 6 н. НС1 при кипячении с обратным з о-лодильником в течение 12—18 ч. Продукты гидролиза упаривали досуха, растворяли в воде, затем обесцвечивали активным углем и фильтровали. При гидролизе в кислой среде разрушается триптофан, поэтому гидролиз проводили кипячением с обратным холодильником с 50 мл 14%-ного раствора гидрооксида бария в течение 18 ч. Полученный гидролизат фильтровали и обесцвечивали, как описано выше. [c.564]

Определение качественного и количественного аминокислотного состава белков и пептидов проводят после их гидролиза кислотой или щелочью. Оба вида гидролиза разрушают некоторые аминокислоты. При щелочном гидролизе частично разрушаются цистеин, серии, треонин и происходит частичная рацемизация некоторых аминокислот. При гидролизе соляной кислотой (5,7 н., 105—110° С), которая обычно используется при кислотном гидролизе пептидных связей, практически полностью разрушается триптофан. В связи с этим содержание триптофана в пробах обычно определяют после щелочного гидролиза или спектрофотометрическим методом Кроме того, наблюдаются значительные потери оксиаминокислот (серина, треонина, тирозина), се-русодержащих аминокислот (цистеина, метионина) и частично пролива. При этом степень разрушения аминокислот зависит от чистоты и концентрации НС1, используемой для гидролиза, а также длительности и температуры гидролиза. Следует отметить, что примеси альдегидов при кислотном гидролизе приводят к значительной потере тирозина, а также цистеина, гистидина, глутаминовой кислоты и лизина, а примеси углеводов в больших концентрациях — к разрушению аргинина. [c.123]

Влажный остаток (120—130 г) суспендируют посредством механического перемешивания в 1,2—1,3 л дестиллированной воды и прибавляют горячий 20%-ный водный раствор гидрата окиси бария до тех пор, иока смесь не станет и не будет оставаться щелочной по фенолфталеину (на что требуется около 120 мл). Затем при перемешивании пропускают быстрый ток сероводорода, пока ртуть полностью не будет осаждена (примечание 8). Осадок отфильтровывают и промывают водой до тех пор, пока проба фильтрата не перестанет давать с бромной водой реакцию на триптофан (примечание 9). Из соединенных фильтратов удаляют барий прибавлением точно эквивалентного количества разбавленной серной кислоты (примечание 10) и отфильтровыванием выпавшего сернокислого бария. Затем фильтрат выпаривают в вакууме приблизительно до 80 мл. [c.475]

Требуется приблизительно такое количество сернокислой окиси ртути, чтобы полностью осадить триптофан, что устанавливается пробой с глиоксиловой кислотой по Гипкинсу-Колу. [c.477]

Диамантштейн и Эрхарт [5] использовали этот метод для обнаружения в моче продуктов обмена триптофана, например у больных хронической миелозой, которым давали триптофан. Они наносили 50—80 мм пробы мочи и проводили хроматографический анализ, используя в большинстве случаев восходящий метод и кислый растворитель (Зр, см. стр. 298). Предварительное концентрирование мочи не требуется. Природные неорганические и органические компоненты мочи не оказывают влияния на величины Rf. [c.303]

Особое значение пробы имеют в тех случаях, когда вещества содержатся в малых количествах — в природных объектах. Так, существуют цветные реакции, позволяющие быстро определить, какие аминокислоты входят в состав образца белка. Одна из кислот— тирозин — окращивает раствор азотнокислой ртути в азотной кислоте в красный цвет, а фосфомолибденовую кислоту — в синий, другая — триптофан — синеет в присутствии так называемого реактива Эрлиха и т. д. Есть еще одна сфера применения цветных реакций, соверщенно перекликающаяся с интересами Шерлока Холмса,— криминалистика. Ведь для изучения следов, оставленных преступником, как раз и нужно уметь обнаружить вещество там, где его, казалось бы, вовсе нет. Оказалось, что поверхность любого предмета, соприкасавщегося с металлом, захватывает немного его атомов. Проявляя эти следы 8-оксихинолином (широко применяемый в аналитической химии реактив на металлы иное название— оксин), при облучении ультрафиолетовым светом можно обнаружить флуоресценцию, цвет которой зависит от природы металла сталь проявляется характерным темно-пурпурным цветом, медь — светло-пурпурным, а алюминий — желтым. Если же на руке подозреваемого в преступлении обнаружены следы стали, да вдобавок их рисунок соответствует отпечатку на ручке пистолета, найденного на месте преступления, то дальнейшее — понятно. Рекорд этого метода с его-помощью оказалось возможным обнаружить след монеты, брошенной на лист бумаги. [c.31]

Недостаток пиридоксина вызывает увеличение выведения мочой ксантуреновой кислоты, особенно если пища богата триптофаном или если дать нагрузку этой аминокислотой. Качественная проба на ксанту реповую кислоту по Липковскому, Робозу и Хагену — С ми ту чрезвычайно проста ею часто и пользуются в случаях, где подозревают дефицит витамина Ве. [c.400]

I. Гидролизат (объем пробы 6 тл) 1-аргИНИН 2-ЛИЗИН 3-ПрОЛИН 4-триптофан, леЙ1 , изолейцин, валин, аланин, фенилаланин, гистидин, метио-яин, тирозин, оксипролин, треонин, се-рин, глиц Н 5-цистин, глутзминовая кислота, аспарагиновая кислота. [c.278]

Цветные пробы, используемые для обнаружения индивидуальных аминокислот, таких, как оксипролин, триптофан, фенилаланин, метионин, цистин, глицин и аланин, приведены Зальцбергом и Фергусом [203] см. т. 1, стр. 296—301. [c.226]

Б. На поверхность агара с полной средой высевают пробы из семи разных культур Е. oll. П сле инкубации делают отпечаток выросших на этой чашке колоний либо на чашки с минимальным агаром, к которому добавлен триптофан или лейцин, либо на чашку с индикаторным агаром с ЭМС с лактозой (на котором бактерии La i- образуют красные, а бактерии La — — бесцветные колонии). Характер роста бактерий на чашках-репликах показывает, что эти семь культур обладают следующими фенотипическими признаками [c.145]

Для микроопределения триптофана в белках и бактериях предложена модификация колориметрического метода Сюлливана и Гесса [397]. Образование соединения с желто-зеленой флуоресценцией при действии на триптофан непосредственно в белках хлорной кислоты в присутствии бихромата при комнатной температуре является, повидимому, специфической реакцией [401]. Описано применение этой пробы в более ранней модификации для количественного определения триптофана в негидролизованных белках, дающее результаты с точностью до 5% [350 а]. Определение лизина по окраске, образуемой фенольным реагентом после бромирования, хотя и не специфично, однако было использовано с соответствующей поправкой на гистидин при исследовании основной фракции, выделенной на пермутите [360]. [c.162]

Положительную пробу дают а) простые спирты вплоть до гептанола (исключение метанол) б) альдегиды и метилкетоны в) фенолы г) производные анилина д) некоторые полиоксисоединения—проппленгликоль, триметиленгликоль и пинакон е) некоторые сахара—фруктоза, сорбоза, сукроза, О-арабиноза и О-ксилоза ж) некоторые аминокислоты—цистин, тирозин и триптофан. Предел идентификации 1—5 мг. [c.394]

В некоторых системах полные ревертанты можно отличить от двух других классов по чувствительности к тому или иному ингибитору обмена веществ, такому, например, как аналог, ингибирующий рост подавлением синтеза мРНК, кодирующей синтез ферментов. Так, для системы биосинтеза триптофана в качестве аналога, обладающего таким эффектом, может служить 5-метил-триптофан. При низких концентрациях этот ингибитор не тормозит синтез триптофана у полных ревертантов, однако практически полностью прекращает его в штаммах, которые синтезируют триптофан в ограниченных количествах. Чтобы показать это, наносят по 10 —Ю клеток исследуемых штаммов на минимальный агар в чашки (разд. 13.9.10 или 13.9.15). Так же как в случае пробы на обратные мутации, наносят каплю раствора 5-метилтриптофана (1 мкг/мл) на стерильный диск фильтровальной бумаги. Зона торможения роста вокруг диска бумаги будет значительно больше для частичных ревертантов и супрессированных штаммов, чем для полных ревертантов. Можно также нанести клетки разных штаммов с обратными мутациями прямо в чашки на минимальный агар, содержащий 5-метилтриптофан (0,01 мкг/мл), и сравнить скорости их роста с наблюдаемыми на минимальном агаре без аналога. [c.34]

Уо определяли хроматографированием синего декстрана 2000 определяли, добавляя триптофан к хроматографируемой пробе. Все белки восстанавливали и карбокси метилировали —СКВг — фрагменты белка, полученные после расщепления его цианбро [c.389]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология