Разделение продуктов мочи

Разделение тиамина и продуктов его метаболизма в моче и клетках [c.186]

После того, как разделение вещества произошло, бумагу вынимают из камеры и сейчас же простым карандашом отмечают на ней фронт растворителя. Затем бумагу высушивают — на воздухе или в сушильном шкафу, смотря по изучаемым веществам, и обрабатывают соответствующими реактивами, вызывающими окрашивание выделенных веществ. Для некоторых веществ можно еще до окрашивания просмотреть хроматограмму под ультрафиолетовым светом (под черной лампой, в темном помещении). Например, многие продукты обмена триптофана в моче человека обладают интенсивной флюоресценцией различного цвета. Далее, по характеру флюоресценции, по положению пятен (Rf) и по характеру их окрашивания различными реактивами, можно с большой точностью решить, что это такое. Для количественного же определения можно или извлечь окрашенные пятна соответствующим растворителем и дальше сравнить их в колориметре со стандартными растворами тех же веществ или же определить интенсивность окрашивания в фотометрической установке. Часто также делают полоску бумаги более широкой и наносят не одно пятно, а 2—3—4 и более с промежутками между ними в 2,5 см. После проявления растворителем разрезают бумагу вдоль, соответственно каждому исходному пятну, и окрашивают одну из полосок, принимая, что распределение веществ на всех полосках одинаково. Тогда, соответственно представляющему интерес пятну вещества, вырезают из других полосок лежащее на том же уровне место и извлекают из него неокрашенное вещество, которое затем можно подвергнуть любой обработке. [c.109]

И. X. применяется для разделения катионов металлов, напр, смесей лантаноидов и актиноидов, 2г и НГ, Мо и W, КЬ и Та последние разделяют на анионитах в виде анионных хлоридных комплексов в р-рах соляной и плавиковой к-т. Щелочные металлы разделяют на катионитах в водных и водно-орг. средах, щел.-зем. и редкоземельные металлы-на катионитах в присут. комплексонов. Большое значение имеет автоматич. анализ смесей прир. аминокислот на тонкодисперсном сульфокатионите.в цитратном буфере при повыш. т-ре. Аминокислоты детектируют фотометрически после их р-ции с нингидрином или флюориметрически после дериватизации фталевым альдегидом. Высокоэффективная И. X. (колонки, упакованные сорбентом с размером зерен 5-10 мкм, давление для прокачивания элюента до 10 Па) смесей нуклеотидов, нуклеозидов, пуриновых и пиримидиновых оснований и их метаболитов в биол. жидкостях (плазма крови, моча, лимфа и др.) используется для диагностики заболеваний. Белки и нуклеиновые к-ты разделяют с помощью И. X. на гидрофильных высокопроницаемых ионитах на основе целлюлозы, декстранов, синтетич. полимеров, широкопористых силикагелей гидрофильность матрицы ионита уменьшает неспецифич. взаимод. биополимера с сорбентом. В препаративных масштабах И. х. используют для вьщеления индивидуальных РЗЭ, алкалоидов, антибиотиков, ферментов, для переработки продуктов ядерных превращений. [c.264]

Вольтамперометрический детектор с последовательной конфигурацией электродов аналогичен флуоресцентному При этом продукт реакции, образовавшийся на рабочем электроде, расположенном выше, детектируется вторым электродом, расположенным ниже Гото и сотр [22] сконструировали субмикро-литровую пленочную ячейку с двумя стеклоуглеродными электродами, расположенными последовательно Эта ячейка была успешно использована для селективного детектирования катехоламинов, индоламина и их метаболитов в моче человека Детектирование основывалось на электрохимической обратимо-указанных соединений [21-23] На рис 4-17 показаны хроматограммы катехоламиновых метаболитов, содержащихся в оче двух здоровых людей Разделение проводилось на микро- олонке, заполненной кремнеземом, модифицированным ОДС, применением детектора с последовательной конфигурацией Электродов [24] Пробу мочи подкисляли, вводили гидрохинон Качестве внутреннего стандарта и экстрагировали этилацета- [c.117]

Катионообменный метод получил важное практическое применение при определении радиоактивных загрязнений, например, Sr-90 в непле Бикини [34], в почве [27], в воде [1], в воздухе [17], в рыбе [64, 70], в молоке [30,45, 48], в костях, молочных продуктах, растениях и почве [87] кальция — в слюде [4] Ва-140 — в воде [1 ], в костях, молочных продуктах, растениях и почве. Катионообменные разделения используются при радиохимическохм определении стронция, бария [18] и радия [62] в моче. [c.314]

Классическая схема группового отделения редкоземельных элементов от других продуктов ядерного расщепления была разработана с связи с так называемым Плутониевым проектом . Эта схема была разработана для препаративных целей, но она представляет интерес и с аналитической точки зрения. Следует отметить, что для препаративных целей предложена новая схема, основанная на сочетании ионообменного и других способов разделения (см., например, [77]). Применяемые аналитические методы основаны на том, что редкоземельные элементы хорошо поглощаются катионитами из солянокислого раствора. Шуберт, Рассел и Фароби [78, 79 ] вы -делили иттрий из мочи, подкисленной до 0,1М НС1. Подкисление препятствует выпадению осадка и разрушает комплексы иттрия с компонентами мочи. В начале одно- и двухзарядные катионы элюируют соляной кислотой (например, 0,8М [27]). Иттрий элюируется последним 6Ж соляной кислотой. Определение иттрия в костях п в яичной скорлупе основано на том же принципе [27]. [c.326]

Высокая летучесть силильных производных дает возможность проводить газохроматографическую идентификацию и определение многих сложных и нестабильных молекул в различного рода биологических субстратах после превращения их в метиловые эфиры. Примером может служить разделение и идентификация ТМС-производных стероидов в моче (рис.УП.4), а также холестерина и родственных ему соединений (рис. УП.5). В последнем случае можно, в частности, определять холестерин (С27Н45ОН) в молочном жире [35]. Жиры предварительно омыляют (метанол и КОН), экстрагируют продукты реакции растворителем с последующим превращением стеролов в ТМС-производные, которые разделяют на кварцевой капиллярной колонке (30 м X 0,22 мм) с силиконовой НЖФ при 280°С. [c.291]

НОСТЬ метода хроматографии с обращенной фазой продемонстрирована Твитчеттом с сотр. [45] при разделении метаболитов тетрагидроканнабинала (вероятно, являющихся конъюгатами) из мочи кролика на сорбенте Раг11з11-5-005 до и после ферментного и щелочного гидролиза. По результатам хроматографии можно судить об образовании менее полярных продуктов гидролиза. [c.198]

Авторы работы [67] выделили из мочи и идентифицировали З-метокси-4-оксиминдальную кислоту—важный продукт. метаболизма норадреиалина и адреналина. Кислоту экстрагировали из мочи этилацетатом, раствор концентрировали, осушали и наносили непосредственно на пластинки с силикагелем О. При элюировании смесью изопропанол—этилацетат—гидроксид аммония—вода (45 30 17 8) разделение заканчивается через 90 мин. Полуколичественное определение можно провести, срав- [c.396]

Вотиз и Чатторай [131] применили ГХ для количественного определения эстрогенов, разделенных методом ТСХ. При тонкослойном хроматографировании они использовали три растворяющие системы. Первая из них, смесь бензол—этилацетат (1 1), применялась для разделения смесей эстрогенов на четыре различные группы однако если в пробах содержались большие количества андрогенов, то для извлечения этих соединений использовали смесь петролейный эфир—дихлорметан— этанол (10 9 1). Третий растворитель — смесь петролейного эфира и метанола (9 1) использовали в тех случаях, когда нужно было очистить пробу до введения ее в газовый хроматограф. Пластинки для ТСХ покрывали слоем силикагеля G и сушили 3 ч при комнатной температуре. Затем, чтобы удалить примеси из силикагеля, в частности железо, их предварительно элюировали смесью метанол—концентрированная соляная кислота (9 1). После такой обработки пластинки активировали при 105°С. Пробы мочи гидролизовали кислотой, после чего по методу Брауна [132] разделяли на фенольную и нефенольную фракции. Пятна соединений эстрогеновой фракции после разделения элюировали этанолом, растворитель удаляли, а остаток ацетилировали, растворяя его в смеси пяти частей уксусного ангидрида и одной части пиридина. Эту смесь выдерживали час при 68°С, после чего добавляли к ней 5 мл дистиллированной воды, интенсивно перемешивая стеклянной палочкой . Ацетилированный продукт тщательно экстрагировали петролейным эфиром и промывали полученный экстракт сначала 8 %-ным раствором бикарбоната натрия, а затем водой. После этого петролейный эфир выпаривали досуха, прибавляли свежий петролейный эфир в таком количестве, чтобы можно было перенести полученный раствор в пробирки емкостью по [c.310]

Тачстоун и др. [138] определяли содержание эстриола в моче беременных женщин методом прямой денситометрии продукта его реакции с красителем прочный фиолетовый, соль В эта реакция проводилась после разделения на слоях силикагеля [119]. Те же авторы [139] применяли ТСХ на силикагеле, пропитанном 10 %-ным раствором фосфомолибденовой [c.311]

В том числе нижнюю фазу смеси бензиловый спирт—уксусная кислота—вода (3 1 3) (Rf. люмихром 0,91, рибофлавин 0,46, рибофлавннилглюкозид 0,24) и смесь уксусная кислота—2-бутанон—метанол—бензол (5 5 20 70). Пятна соединений детектировали при облучении УФ-светом при очень маленьком содержании люмихрома в пробе необходимо предварительно дважды элюировать пластинку, чтобы удалить флуоресцирующие примеси из силикагеля. Хеуорт и др. [109] определяли в моче рибофлавин и продукты его метаболизма на слое силикагеля, элюируя пробу смесью толуол—метанол—уксусная кислота (10 9 1). Мешающие разделению компоненты удаляли предварительной очисткой — осаждением и хроматографированием на колонке. Содержание рибофлавина (/ /0,44) определяли методом флуоресцентной денситометрии. Исмайель и Ясса i[110] выделяли рибофлавин из лекарственных составов на силикагеле смесью хлороформ—98 %-ный этанол—вода (50 25 1), затем элюировали его с пластинок ацетатным буферным раствором с pH 4 и измеряли поглощение элюата при 444 нм. [c.424]

В результате ранее проведенных исследований по проникновению, разрушению и выведению из организма животных фосфорор-ган1 ческих инсектицидов было установлено, что наибольшие количества продуктов распада этих соединений накапливаются в моче и выводятся с ней. Поэтому для хроматографирования была взята м ча животных (морских свинок), которым за 1—1,5 часа до забоя вводился диметил-4-нитрофеннлтиофосфат, меченый Р" или Мочу без предварительной обработки наносили на полоску бумаги и после высыхания хроматографировали, как описано выш . Полученные хроматограммы экспонировали с рентгенопленкой для получения радиоавтографов. Во всех случаях продукты распада одновременно содержали серу и фосфор, чего не должно было быть при окислении. Однако, как уже отмечалось, независимо от того, произошло окисление или нет, сера на хроматограммах должна отделяться от фосфора, по крайней мере, на самом последнем этапе гидролиза. Очевидно, что смесь изоамиловый спирт—муравьиная кислота—вода не вызывает такого разделения. Для выяснения этого вопроса была взята другая смесь бутанол— уксусная кислота—вода. Известно, что в этой смеси ортофосфор-ная кислота несколько удаляется от точки нанесения. Радиоавтографы хроматограмм мочи, полученные с применением растворителя бутанол—уксусная кислота—вода, представлены на рис. 6. [c.91]

Smith и др. (1953) определяли 4,6-динитроортокрезол и его метаболиты в моче кроликов с помощью хроматографического разделения, элюции и последующего спектрофотометрирования в ультрафиолетовой области спектра. Полярографический метод определения динитроортокрезола и продуктов его превращения в биологических средах описан Г. А. Хохольковой (1965). [c.267]

Этим способом были приготовлены колонны с полярной жидкой фазой ОУ-225 (полиметилпропилнитрилсилоксан) для разделения стероидов, выделенных из мочи [39]. Анализ стероидов проводился также в работах [63—71]. Предложен также способ получения высокоэффективных стеклянных капиллярных колонн для анализа стероидов, органических кислот и продуктов метаболизма лекарств [c.153]

Глсшная проблема, которая решается нефронами почек, заключается в разделении потока веществ, поступающих из крови, на два потока разного химического состава все ценное для организма (глюкоза, аминокислоты, витамины и др.) возвращается в кровь, а конечные продукты обмена направляются в мочу. Конечно, при этом происходит некоторая утечка и полезных веществ плазмы, но их концентрация в окончательной моче невелика. Если в крови концентрация какого-либо вещества увеличивается, то и с мочой его выводится больше. Другой причиной увеличения скорости выведения веществ является нарушение функции почек. При этом нарушение избирательности реабсорбции может быть специфичным (например, для какой-нибудь одной аминокислоты) или общим. Последнее наблюдается, в частности, при воспалительных заболеваниях почек. Таким образом, при любой болезни, сопровождающейся изменением состава крови или нарушением выделительной функции почек, изменяется состав мочи, причем часто характерным для данной болезни образом. На этом основано применение анализа мочи для диагностики болезней. Наиболее часто в моче измеряют концентрацию глюкозы, креатинина, кетоновых тел, билирубина, уробилина, белков. Во многих специальных случаях определяют и другие вещества, как минеральные, так и органические. [c.398]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология