Коферменты в препаратах ферментов активности

При очистке фермента всегда полезно установить еще вначале пределы pH и температуры, в которых он стабилен. Утрата ферментом активности во время очистки может свидетельствовать о необходимости добавления какого-то дополнительного кофактора или кофермента. Эту возможность следует проверить с помощью весьма простых методов, таких, как диализ или добавление комплексообразующих агентов в сочетании с детально разработанными методами идентификации неорганических ионов и органических соединений. Присутствие прочно связанных кофакторов и коферментов, а также наличие простетических групп легче определить в том случае, когда фермент уже почти очищен. Тогда можно получить достаточно четкие спектры поглощения раствора фермента и спектры испускания озоленного препарата. [c.99]

В 1913 г. появилась фундаментальная работа Л. Михаэлиса и М. Л. Ментена по ферментативной кинетике. В 1922—1928 гг. Р. Вильштеттер и его ученики, усовершенствовав метод избирательной адсорбции и последующей элюции, достигли блестящих успехов в получении ферментативных препаратов высокой степени очистки. Последние были в сотни и тысячи раз активнее исходных носителей ферментов. Вместе с тем Р. Вильштеттер, добиваясь высокоочищенных ферментных препаратов, на последних стадиях очистки терял какие-то в то время неизвестные вещества (коферменты) и фермент утрачивал свою активность. [c.123]

К настоящему времени идентифицировано около двух тысяч ферментов. Из них многие выделены в виде чистых гомогенных препаратов и свыше 150 получены в кристаллическом виде. Оказалось, что ферменты состоят либо целиком, либо в основном из белков, т. е. являются полимерами, образованными из аминокислот и имеющими определенную пространственную структуру полипептидных цепей. В состав небелковой части фермента могут входить ионы металлов и некоторые органические вещества. Если последние обладают каталитической активностью, входя в активный центр фермента, то их называют коферментами. Например, в состав окислительных ферментов входят органические соединения железа (так называемый гем). [c.301]

Термолабильные биохимические препараты требуют особенно тщательного обращения и специальных условий хранения. Ферменты и коферменты, нуклеозиды и нуклеотиды и многие другие представители этого класса соединений быстро портятся при хранении в комнатных условиях. Для сохранения их свойств и активности большинство биохимических препаратов хранят в холодильниках при температуре от -1-4 до —20 °С. Однако даже при соблюдении всех условий хранения наблюдается постепенное снижение активности препаратов. [c.156]

Активность ферментных препаратов определяется по их действию на соответствующий субстрат в условиях, оптимальных для активности изучаемого фермента (оп-тй мальная концентрация субстрата, pH среды, температура, коферменты и т. д.). За ферментативным действием можно наблюдать по исчезновению субстрата либо появлению продуктов катализируемой реакции. [c.134]

Представление о коферментах было впервые введено Г. Бертраном в 1897 г. Исследуя препараты окислительного фермента лакказы, он обнаружил, что ее зола содержит заметные количества марганца (8б). Каталитическая роль марганца в процессах окисления органических кислот и масел уже была известна. Бертран попытался доказать, что активность оксидаз связана с присутствием в них марганца. [c.141]

Успех модельных экспериментов с участием пиридоксаля и ионов металлов в дублировании многих ферментативных реакций а-аминокислот позволил предположить, что ионы металлов могут играть важную роль и в соответствующих ферментативных реакциях. Однако в действительности это, по-видимому, не так получены высокоочищенные препараты ферментов, требующие пирн-доксальфосфат, но не нуждающиеся для проявления полной активности в ионах металла [124]. Функция иона металла в модельной системе состоит, вероятно, в поддержании правильной геометрии промежуточного имина и тем самым в облегчении делокализацни заряда. В ферментативной реакции эту функцию выполняет сам фермент. За исключением этой особенности, складывается впечатление, что роль пиридоксальфосфата очень близка к роли пиридоксаля в модельной системе. Поскольку реакция образования холофермента из кофермента и апофермента заключается в образовании имина пиридоксальфосфата с е-аминогруппой лизина, образование имина (153), участвующего в ферментативной реакции, должно происходить в результате переаминирования, имеющего место в присутствии аминокислотного субстрата схема (98) . [c.641]

Ртутьсодержащие препараты подавляют активность ферментов и коферментов, взаимодействуя с сульфгидрильными группами. В больших концентрациях они вызывают осаждение белков. Они превращают базпдии и инфекционные гифы возбудителя твердой головни пшеницы в бесструктурные тяжи и сгустки протоплазмы, распадающиеся на поверхности тканей проростка семени. [c.248]

Гомогенный препарат тирозиназы (Кертеш, 1957) содержит 0,20°/о меди, которая, очевидно, действует как простетическая группа. При хроматографировании препарата и грибов было получено вещество с более низким содержанием меди (0,067о) и сильно пониженной активностью (Фриден , 1961). Другие ферменты, дегидрогеназы, переносят водород не на кислород, а на акцептор — фермент или кофермент. [c.718]

Фолиевая кислота очень широко распространена как в растительных, так и в животных организмах, что объясняется ее важной ролью. Этот кофермент участвует во многих реакциях биосинтеза, прежде всего в реакциях синтеза азотистых пуриновых оснований нуклеиновых кислот. Активной формой фолиевой кислоты является ее восстановленная форма - 5,6,7,8-тетрагидро-фолиевая кислота, которая образуется под влиянием специального фермента - тетрагидрофолатредуктазы. Ингибиторы этого фермента могут быть использованы в тех случаях, когда необходимо замедлить или прекратить синтез пуриновых оснований, а значит - и синтез нуклеиновых кислот, например при опухолевых процессах. Известны аналоги тетрагидрофолата -аминоптерин и аметоптерин, которые используются, например при лечении острой лейкемии. Аналоги фолиевой кислоты широко применяют в составе противомикробных средств, среди которых наиболее известны стрептоцид и различные сульфамидные препараты, являющиеся аналогами пара-амино-бензойной кислоты, входящей в состав фолата. Структуры фолиевой кислоты и ее коферментной формы приведены на рис. 14. [c.39]

Из тканей млекопитающих был получен только один препарат оксидазы L-аминокислот он был выделен из почек крысы Бланшаром и сотрудниками [118]. Этот фермент, катализирующий окисление 13 L-аминокислот (см. табл. 18), был подвергнут очистке найдено, что его число оборотов равно примерно 6. Он отличается от остальных общих аминокислотных оксидаз тем, что его коферментом служит рибофлавинфосфат. Примечательное свойство этого фермента состоит в том, что он окисляет L-a-оксикислоты несколько быстрее, чем L-аминокислоты. Субстратная специфичность фермента по отношению к аминокислотам сходна со специфичностью оксидазы D-аминокислот для обоих ферментов характерно очень медленное окисление дикарбоновых аминокислот и диаминокислот. Помимо почек, оксидаза L-аминокислот в других тканях животных не найдена. Представляется маловероятным, чтобы фермент, столь мало распространенный и обладающий такой низкой активностью, мог играть существенную роль в общем процессе дезаминирования L-аминокислот у млекопитающих. [c.187]

Обнаружение в природных объектах альдегидной и аминной форм витамина Вб привело Снелла [386] к предположению, что взаимопревращение этих форм витамина Ва происходит путем переаминирования и что витамин Ве может выполнять функцию кофермента при ферментативном переаминировании. Позже Снелл [387] доказал обратимое взаимопревращение пиридоксаля и ииридоксамина в результате реакций неферментативного переаминирования с амино- и кетокислотами. Экспериментальные данные, подтверждающие участие витамина Ве в ферментативном переаминировании, были получены при исследовании крыс и микроорганизмов в условиях недостаточности витамина Вз-Недостаточность витамина Ве сопровождалась снижением уровня активности трансаминазы, добавление же пиридоксальфосфата к препаратам тканей или клеток восстанавливало активность фермента [388—390]. [c.248]

Микробиологическое гидроксилирование протекает с поглощением молекулярного кислорода и катализируется, но-видимому, флавопротеи-дом, связанным с атомом Fe. Для регенерации активного фермента необходимо участие НАДФ (см. стр. 90). Подобный же характер, возможно, имеет расщепляющая кольцо D стероид-13,17-лиаза, которая также вводит в стероиды атом кислорода из воздуха и нуждается для своей активности в наличии НАДФ. Стероид-1,2-дегидрогеназа, но-видимому, имеет флавиновую простетическую группу и нуждается для своего действия в акцепторе электронов. Природным акцептором электронов для этого фермента, вероятно, является витамин К он может быть заменен в бес-клеточных препаратах искусственными акцепторами — различными хи-нонами и красителями. Роль коферментов для оксистероид-дегидрогеназ [c.27]

Тиами пирофосфат в данном сл чае связан прочно и не отщепляется в роц ссе выделения и очистки фермен та Гомогенные препараты нативно о фермента не активируются добавленн ши извне кофакторами и содержат один моль кофермента на моль белка [246 250], други ми словами имеют один активный центр [c.150]

Подавляющее большинство биологически активных веществ (гормонов, нейромедиаторов, ядов, токсинов, лекарственных препаратов или любых других агентов) действует на функциональную или метаболическую активность клеток по одному из трех путей 1) изменение компартментализации веществ в клетке или в клеточном ансамбле 2) усиление или ослабление каталитической активности ферментов, что достигается чаще всего их модификацией 3) изменение концентрации ферментов в клетке путем воздействия на их синтез или деградацию (см. главу 1). Первый механизм регуляции осуществляется главным образом путем изменения проницаемости биологических мембран для нонов, коферментов или метаболитов. Потенциал действия, возникаю-" щий под влиянием ацетилхолина или катехоламинов (при связывании с а-адренергическими рецепторами), вызывается входом Са2+ и Ма+ и последующим выходом К+ из клетки. Поступление Са " " в клетку стимулируют также ангиотензин и простагландинь группы Р, а проницаемость мембран почек для Ыа+ и воды находится под контролем альдостерона и антидиуретического гормона. Транспорт в клетку сахаров и аминокислот усиливают инсулин и соматомедины. [c.160]

Смотреть страницы где упоминается термин Коферменты в препаратах ферментов активности: [c.137] [c.123] [c.264] [c.69] [c.130] [c.725] [c.302] [c.443] [c.242] [c.249] [c.258] [c.709] [c.277] [c.368] [c.208] [c.148] [c.153] [c.194] [c.154]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология