Культивирование клеток состав среды

Для культивирования микроорганизмов в лабораторных условиях необходимы питательные среды, которые могут обеспечить, клетки всеми нужными для роста и размножения веществами. В состав питательной среды должны входить источники углерода и азота, минеральные соли, витамины и ростовые факторы, микроэлементы. Источниками углерода в среде служат глюкоза, крахмал, спирты и другие органические соединения. В качестве источника азота применяются минеральные вещества (сернокислый аммоний, азотнокислый натрий) или органические соединения (кукурузный экстракт, пептон, казеиновый гидролизат и др.). [c.16]

Более сложные проблемы возникают при производстве метаболитов, когда в ходе периодического процесса культивирования состав среды, окружающей клетки штамма-продуцента, должен изменяться в зависимости от фазы роста культуры, ее состояния и уровня активности. Именно это обстоятельство затрудняет пере вод такого рода производств на непрерывный режим эксплуатации, да и при периодическом режиме требует от обслуживающего персонала постоянного контроля и управления процессом. Следует добавить, что колоссальное многообразие имеющихся в природе, селекционируемых и получаемых генно-инженерными методами продуцентов, естественно, увеличивает количество штаммов, находящихся в промышленной эксплуатации, а каждый из них требует учета его своеобразия и соответствующих технологических решений при создании производства и в ходе его работы. [c.22]

При длительном пассировании гибридом в культуре следует иметь в виду их высокую чувствительность к условиям культивирования. К ним относятся качество посуды, состав среды, pH, плотность культуры и др. Лимитирующей размножение является как высокая, так и низкая плотность культуры. В переросших культурах накапливаются токсические вещества и клетки быстро погибают. Существенное значение в контроле размножения имеет pH среды. При повышении pH деление клеток прекращается. При восстановлении pH до оптимальных значений (pH 7.5—7.6) происходит восстановление клеточной пролиферации, однако время этого восстановительного периода является функцией времени, в течение которого клетки находились в среде с щелочными pH 5 сут после 24-часового пребывания при pH 8.3 и 11 сут после 72 ч [4]. [c.202]

В культуре ткани миобласты удавалось поддерживать в пролиферирующем состояния до двух лет. Все это вр я они сохраняли способность к слиянию и к диффереицировке в мышечные клетки при надлежащем изменении условий культивирования. Процесс слияния является кооперативным сливающиеся миобласты так изменяют состав культуральной среды, что побуждают к слиянию другие миобласты. Подготовка отдельных миобластов к слиянию, по-видимому, сопряжена также с событиями клеточного цикла слияние происходит только во время фазы О]. [c.171]

Детальное изучение взаимосвязи морфологии, физиологии и биохимических процессов, протекающих в микробных клетках в условиях периодического культивирования, весьма затруднено, поскольку как свойства клеток, так и состав питательной среды непрерывно значительно изменяются в процессе выращивания. Такие исследования могут оказаться плодотворными только при использовании возможностей непрерывного культивирования, как наиболее совершенного метода, позволяющего получать популяции с постоянной скоростью деления, поддерживаемой на определенном уровне в течение длительного времени. [c.93]

В процессе культивирования изолированные протопласты регенерируют новую клеточную стенку и превращаются в клетки, способные делиться и давать начало образованию каллусной ткани. На формирование колоний протопластами влияет состав питательной среды. Дальнейшая задача — получение из каллусной ткани растений-регенерантов. [c.155]

Несмотря на некоторую механистичность представленной схемы, гипотеза морфогенетических тестов Боннера находит поддержку в экспериментах последних лет. У растений найдены рецепторы фитогормонов, позволяющие клеткам оценивать их состав и количество в окружающей среде. При культивировании растительных клеток в искусственной среде установлен эффект массы . Единичная изолированная клетка редко переходит к делению. Чем гуще высеяны клетки (например, на поверхность питательного агара), тем большее их число начинает делиться. На рис. 11.14, А показано, что если яйцеклетки фукуса помещены близко друг от друга, то ризоиды образуются в сторону центра группы групповой эффект ). Это явление можно объяснить тем, что каждая яйцеклетка синтезирует и выделяет в окружающую среду ИУК, и концентрация этого фитогормона в центре группы оказывается более высокой, чем снаружи. Как уже говорилось, ауксин индуцирует у яйцеклеток фукуса образование ризоидов. Таким образом, тест на величину группы клеток может быть опосредован концентрацией фитогормонов или других физиологически активных веществ, выделяемых клетками. [c.363]

Наиболее подходящим для исследования объектом являются лимфоциты периферической юрови здорового человека клетки жизнеспособны при культив ировании, не требуют специального состава среды и дают стабильный ответ на известные митогены, в том числе ФГА. Также можно использовать лимфоциты периферической крови беспородных собак. Эти клетки очень чувствительны к токсическому действию препаратов, но достаточно чувствительны и к действию стимуляторов. Не рекомендуется проводить испытание митогенов на лимфоцитах кроликов или мышей. Клетки этих животных очень не стойки в культуре, кроме того, требуется особый состав сред для их культивирования. [c.257]

Липидный состав клеточных мембран изменчив. В меньшей степени это проявляется в животных клетках, находящихся в условиях стабильной внутр. среды. Однако и в этом случае можно модифицировать состав липидов в нек-рых мембранах, меняя пнщ. рацион. Липидный состав мембран растений заметно измейяется в зависимости от освещенности, т-ры н pH. Еще более изменчив состав бактериальных мембран. Он варьирует не только в зависимости от штамма, но и в пределах одного и того же штамма, а также от условий культивирования и фазы роста. У вирусов, имеющих липопротеиновую оболочку, липидный состав мембран также не постоянен и определяется составом лршидов клетки-хозяина. [c.29]

Аналогичные результаты получены при культивировании гриба Aspergillus oryzae. Хотя максимальная удельная скорость роста этого микроорганизма почти в 10 раз выше, чем популяции клеток млекопитающих, но на ее величину не повлияло восьмикратное изменение запаса субстрата в питательной среде. Это говорит о там, что максимальная логарифмическая скорость роста в первую очередь зависит от качественных особенностей системы клетка — среда. У разных микроорганизмов, а также у одних и тех же микроорганизмов, но культивируемых на средах, состав которых качественно отличается, лимитирующие стадии биосинтеза могут быть не одними и теми же. [c.163]

На количество и состав выделяемых в среду липидов определенное влияние оказывают условия питания и культивирования микроорганизмов. При использовании в качестве источника углерода С5 и Се-полиолов дрожжи образуют в 3 раза больше внеклеточных липидов, чем на среде с глюкозой. Подобное явление объясняется тем, что при ассимиляции С5 и Сб-полиспиртов клетка затрачивает значительно меньше энергии на био- KKTG3 специфичных зкзолкпидоБ, чем при использовании глюкозы, которая в конечном итоге превращается в те же полиолы. [c.346]

Разработаны приемы освобождения растительных клеток от твердых клеточных оболочек для получения культуры изолированных протопластов, отграниченных от окружающей среды одной только плазмалеммой. Изолированные протопласты получают в результате комбинированного действия ряда ферментов (пектиназы и целлулазы), которые гидролизуют клеточные оболочки. В результате возникает возможность более детального изучения внутреннего строения клетки. Культивирование протопластов приводит в дальнейшем к ресинтезу клеточных стенок и образованию обычной культуры клеток, из которой затем можно вновь регенерировать целое растение. Изолированные протопласты представляют также большой научный и практический интерес, поскольку, изменяя соответствующим образом состав питательной среды, можно стимулировать их слияние друг с другом, осуществляя таким образом процесс так называемой соматической (неполовой) гибридизации растительных клеток. Культивируемые затем в определенных условиях гибридные протопласты могут дать начало новому растению с признаками, унаследованными от обоих родителей. Соматическая гибридизация может применяться во всех случаях, когда получение гибридов обычным (половым) путем невозможно из-за ряда физиологических или цитогенетических барьеров между растениями, например при отдаленной гибридизации. [c.10]

Водоросли представляются очень перспективными для культивирования их в качестве липидообразователей, так как они не нуждаются в органическом источнике углерода для биосинтеза белка, углеводов и жира. Химический состав водорослей сильно зависит от условий культивирования меняя содержание азота в среде, можно получить клетки, имеющие 58% от АСВ белка и 5% от АСВ жира или всего около 8% от АСВ белка и до 85% от АСВ жира. Однако наличие таких недостатков, как малая скорость роста и накопление в клетках токсических соединений, ограничивает их промышленное применение. [c.102]

Торпедовидная фаза (торпедо) развития зародыша (см. рис. П.З) связана с делением клеток преимущественно поперек продольной оси и с более интенсивным ростом клеток в зачатках семядолей и в зоне гипокотиля. Отчетливее выделяются по вытянутой в длину форме клетки прокамбия в гинокотиле. Формируется про меристема корня. На этой фазе, кроме все более возрастающей концентрации ИУК и присутствия цитокинина. необходим гиббереллин (для роста гипокотиля). Изолированные зародыши в фазе торпедо удается выращивать на сахарозно-минеральной среде с добавлением витаминов и гиббереллина, в то время как для культивирования сердцевидных зародышей необходимо кокосовое молоко (эндосперм), в состав которого входят ауксин, цитокинины, неидентифициро-ванные факторы углеводной природы и соединения, содержащие азот. [c.338]

Входящие в состав гранулем Тх-клетки D4 располагаются в центре этих образований, а Т-клетки DS " на их периферии. Это позволяет предполагать, что Т-клетки D4 выполняют решающую роль в привлечении и активации других лимфоцитов и макрофагов. При культивировании гранулематозной ткани in vitro обнаружено выделение ею в среду различных цитокинов. Для максимального развития гранулем, по-видимо-му, требуются выделяемые Тх1-клетками цитокины и ФНОа в случае мышиного шистосомоза для этого необходимы также цитокины. выделяемые Тх2-клетками. [c.188]

Среды Хэма. С использованием жесткого критерия отбора — размножение одиночных клеток (клональный рост) — разработан метод оптимизации состава питательных сред, позволяющий минимизировать количество компонентов неопределенного состава [12]. Так были созданы щироко используемые F-10 [19] и ее модификация F-12 [20], а также набор сред M DB, где каждый состав подогнан к определенному типу клеток [21]. Клетки яичников китайского хомячка клонируются в Р-Ю, которую достаточно дополнить либо минимальным количеством сыворотки (2 %), либо фетуи-ном и альбумином (белка менее 100 мкг/мл), и в Р-12, в которую введен селенит. Эти среды применяются также в случае культивирования плохо растущих клеток, в том числе первичных культур дифференцированных клеток разных видов. F-12 в смеси с DME является основой ряда бессывороточных сред. [c.56]

Посуда. Для культивирования пригодны стеклянные и пластиковые матрасы, чашки Петри и пластиковые 24-луночные плейты. КОКф и их культуральные потомки — это высокоадгезивные клетки, и качество субстрата, к которому они прикрепляются, сильно влияет на рост колоний. Использование выщелоченной стеклянной посуды и пластика низкого качества может снижать ЭКОф и неблагоприятно рлиять г а клеточный состав колоний. При оценке пригодности среды И посуды для постановки теста ка КОКф следует исходить из того, что костномозговые клетки, полученные путем механической дезагрегации, имеют ЖОф не ниже 3 10 . [c.260]

Как видно из приведенных выше прописей, питательные средь составляются обычно из ограниченного числа естественных ком понентов. 0 бщим правилом является то, что среды, применяемые в лервой фазе, при культивировании клеток по своему состав обычно более богаты питательными веществами, чем среды дл5 второй фазы. Среды, применяемые во второй фазе, когда вырос шие культуры заражены вирусом, должны лишь поддерживат клетки в жизнедеятельном состоянии. Поддерживающие средь содержат питательные компоненты в меньших количествах из из состава сыворотки животных полностью исключаются или из количество резко снижается. [c.27]

Значительное влияние на активность протеаз клетки оказывают условия культивирования бактерий, и прежде всего состав питательных сред. В частности, для многих бактериальных систем известно, что протеолиз увеличивается при дефиците аминокислот, фосфатов, сульфатов. Недостаток аммония, а также культивирование при повышенной температуре приводит к сверхпродукции протеаз. Например, при прочих равных условиях интерферон а2 человека в клетках Е. oli при температуре 25 °С синтезируется с выходом, большим в 40 раз, чем при температуре 37 °С. [c.153]

Из изученных плазмид лишь pUBllO и ее гибридные производные характеризуются достаточно высокой стабильностью в клетках бацилл. При культивировании плазмидосодержащих щтаммов на питательных средах без антибиотиков заметная потеря клетками плазмид наблюдается только в постэкспоненциальной и стационарной фазах роста культуры, что обычно мало сказывается на продуктивности штаммов по целевому белку Большое значение для стабильного поддержания гибридных плазмид в клетках бацилл имеет состав питательной среды и условия культивирования. Поэтому при создании технологических процессов на основе штаммов-продуцентов, конструируемых методами генетической инженерии, необходимо уделять пристальное внимание выбору оптимальных условий культивирования. [c.268]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология