Липополисахариды, выделение

Внеклеточные углеводсодержащие биополимеры играют, по-видимому, существенную роль и в защитных реакциях растений. Подобные функции выполняют, вероятно, слизи, содержащиеся в оболочке поверхностных клеток корня, и камеди, выделяющиеся при механическом повреждении ствола растений (о слизях и камедях см. гл. 20). Способность некоторых растительных полисахаридов ингибировать агглютинацию эритроцитов под действием агглютининов крови соответствующей группы указывает на аналогию их с групповыми веществами крови в организме животных. Имеются также сообщения о выделении из растений гликопротеина, близкого по составу к гликопротеинам сыворотки , и липополисахарида, близкого к липополисахаридам грамотрицательных бактерий . Такие соединения могут играть важную роль в иммунитете растений. [c.606]

Таким образом, водно-фенольная экстракция может, вероятно, применяться не только для выделения и очистки полисахаридов, липополисахаридов или нуклеиновых кислот, но в некоторых случаях также [c.331]

Прежде чем приступить к изучению состава и строения выделенного липополисахарида, необходимо проверить его гомогенность. Как правило, критерием гомогенности служат данные ультрацентрифугирования и электрофореза с подвижной зоной . Дополнительные доказательства гомогенности липополисахарида можно получить с помощью иммунологических методов , которые, как правило, имеют большую чувствительность, чем физические методы. Химический состав липополисахаридов, выделенных из различных грамотрицательных бактерий, варьируется в широких пределах. К настоящему времени в 0-антигенах уже найдено более 20 различных сахаров, и это число постоянно растет [16]. В состав углеводных детерминантов входят гексозы, пентозы, 6-дезоксигексозы, 3,6-дидезоксигексозы, гептозы [c.129]

С химической точки зрения пирогены-это сложньте безбелковые вещества с высокой молекулярной массой, состоящие, в основном, из липополисахаридов. Например, химический состав пирогенного вещества, выделенного из Proteus Vulgaris, состоит из углерода (25,83%), водорода (6,06%), азота (6%), фосфора (0,29%) и золы (8,33%). [c.623]

Оказалось, что эта же подвижная фаза пригодна для выделения 3-амино-3,6-дидезокси-о-глюкозы из гидролизата растворимого в феноле липополисахарида С. геипйи 8090 [119]. 3-Амино-3,6-дидезокси-о-глюкоза была отделена от о-глюкозамина на колонке со смолой дауэкс-50 (Н+-форма). Хроматографические свойства этого аминосахара, сопоставленные со свойствами других известных 3-амино-3,6-дидезоксигексоз (табл. 22.9), подтвердили предполагаемую конфигурацию. [c.97]

Процесс выделения полисахаридов можно облегчить путем изменения поверхностных свойств микроорганизма-продуцента (например, за счет удаления поверхностного полимерного ма-териала типа липополисахаридов) В подобных мутантных культурах происходит аутоагглютинация и спонтанная флоку-ляция, что уменьшает число необходимых операций центрифугирования. Однако нужно внимательно следить зачтем, чтобы у таких мутантов клеточный материал, например белки, не утекал из периплазматического пространства или не происходил лизис с загрязнением конечного продукта. К другим изменениям относятся мутации капсулообразующих организмов, приводящие к появлению стабильных, образующих слизи бак терий, а также получение устойчивых к фагам мутантов, что уменьшает риск заражения фагом в процессе производства. [c.233]

Докладчик сообщил также о выделении ряда новых нуклеотидов, в том числе группы тимидиновых нуклеотидов. Помимо выделения тимидиндифосфатрамнозы и тимидиндифосфатманнозы, были изолированы тимидиновые нуклеотиды, обозначаемые ТДФ-Х, ТДФ-Y и ТДФ-Z, в которых X, Y и Z — сложные дезоксисахара, строение которых еще не выяснено. Найдено, однако, что они участвуют в синтезе сложных липополисахаридов клеточной оболочки Е. соИ. Эти соединения особенно интересны потому, что они представляют собой средства активирования сахаров через дезо-ксинуклеотиды (поскольку они содержат дезоксирибозу). [c.331]

Распределение белка и полисахарида или липополисахарида между фенолом и водой было применено для расщепления и разделения специфических осадков полисахаридных антигенов с антителами [40]. В принципе осадок диспергируют в воде и прибавляют при перемешивании равный объем жидкого фенола. После разделения фаз центрифугированием водный слой содержит свободный от антител полисахаридный антиген, который можно выделить и проанализировать. Метод позволяет очищать полисахаридные анти1 ены путем избирательного осаждения антителами [32, 40], т. е. фракционировать полисахаридные антигены по их серологической специфичности. Хоман и Лене 41] очистили препараты гепарина, содержащие белки, использовав смесь фенола с водой. Из водной фазы, которая оказалась свободной от белка, был выделен очищенный гепарин. [c.330]

Комплексы, выделенные из грамотрицательных бактерий экстракцией фенолом [1] (см. стр. 325), содержат и липид, и полисахарид. Вещество, полученное экстрактщей трихлоруксусной кислотой (см. стр. 333), еще более сложно в его состав входит также и белок. При щелочной экстракции выделены липополисахариды, содержащие небольшие количества липидов. Чтобы получить чистый полисахарид, необходимо подвергнуть гидролизу уксусной кислотой комплекс или высушенные клетки. Обычно для этого достаточно 0,1 н. уксусной кислоты, но иногда необходимо использовать 1 н. уксусную кислоту. Эта методика, впервые использованная Уайтом [2], была применена позднее Фрименом [3], который выделил высокоочищен-ный полисахарид. [c.334]

Кислые полисахариды могут присутствовать в неочищенном препарате липополисахарида, полученном экстракцией смесью вода — фенол. В этом случае на стадии ультрацентрифугирования они вместе с нуклеиновой кислотой остаются в супернатанте. Разделение кислых полисахаридов и нуклеиновых кислот основано на том, что в отличие от комплекса с нуклеиновыми кислотами комплекс цетавлона с кислыми полисахаридами растворим в 0,3 М растворе хлористого натрия. Оба названных комплекса растворяются в 1 М растворе хлористого натрия [12]. Супернатант, содержащий кислые полисахариды и нуклеиновую кислоту, растворяют в таком количестве 0,5 М раствора хлористого натрия, чтобы получился 2%-ный раствор. К этому раствору добавляют 2%-ный водный раствор цетавлона до прекращения выпадения осадка. Осадок комплекса цетавлона с нуклеиновыми кислотами отделяют центрифугированием. При разбавлении супернатанта водой осаждается комплекс цетавлона с кислыми полисахаридами. Этот осадок растворяют в 1 М растворе хлористого натрия (1 г влажного осадка на 100 мл раствора), диализуют 72 ч против воды и содержащий кислые полисахариды раствор лиофилизуют. Модифицированная методика, сходная с приведенной выше, была использована [13] для выделения и очистки кислых полисахаридов из Serratia mar es ens. С помощью этой же самой методики из капсул Е. oli были получены антигены, представляющие собой кислые полисахариды [14]. [c.129]

Оценить содержание у бактерий любого простого полисахарида, кроме гликогена, с помощью несложных методик довольно трудно. Здесь мы опишем способ выделения гликогена, так как этот полимер служит резервным материалом у многих бактерий и может составлять значительную часть их биомассы. Способы выделения других широко распространенных сложных полисахаридов (липополисахаридов и пептидогликанов) приведены в других разделах. Гликоген, как и другие полисахариды, устойчив к гидролизу щелочами, он хорошо растворим в воде и нерастворим в этаноле. Выделение полимера основано на использовании именно этих свойств. Содержание глюкозы в выделенном гликогене можно определить в кислотных гидролизатах с помощью реакций с антроном или фенолом или с помощью глюкозоок-сидазного теста после 6-часового гидролиза полисахарида в 4 н. НС1 при 100 °С в запаянной ампуле. [c.298]

Было бы нецелесообразно описывать здесь все методы выделения и определения характеристик структурных компонентов клеточных стенок. Выбор метода зависит от исследуемого организма, имеющихся возможностей и целей исследования. Для одних исследований не требуются интактные высокоочищенные полимеры, для других, наоборот, необходимы и нативные, и чистые макромолекулярные вещества. Тот, кто хочет всесторонне охарактеризовать один из рассмотренных здесь полимеров бактерий, прежде всего должен ознакомиться с литературой, в которой описаны различные методы выделения, а также преимущества и ограничения каждого из них [35, 36, 57, 58]. Здесь даны самые простые методы выделения и получения предварительных характеристик пептидогликанов и липополисахаридов из наиболее распространенных в лабораторных исследованиях бактерий. [c.328]

Другой независимый от Т-клеток и антител механизм противомикробной защиты, весьма важный в начальной стадии инфекции, — это выделение цитокинов и хемокинов из макрофагов и прочих клеток. По-видимому, все инвазивные микробы содержат или выделяют молекулы, способные вызывать такой эффект (см. гл. 17). Среди микробных активаторов высвобождения цитокинов наиболее сильное действие оказывает эндотоксин, или липополисахарид (ЛПС). Сложным образом ЛПС взаимодействует с мембраносвязанными рецепторами на поверхности лейкоцитов и, вероятно, эндотелиальных клеток, в результате чего происходит активация соответствующих [c.176]

Среди антибактериальных агентов неоднократно выявляли препараты, влияющие на фагоциты оказывающие прямое или иммунноопосредованное цитотоксическое действие, изменяющие вирулентность и другие свойства бактерий, что отражается на их фаго-цитабельности, модифицирующие свойства и функции самих фагоцитов. Непрямое действие антибиотиков на систему мононуклеарных фагоцитов может быть опосредовано их антибактериальным действием, разрушением бактерий с выделением из их клеточных стенок липополисахарида, который активирует макрофаги, индуцирует секрецию провоспалительных цитокинов L-l, IL-6, TNF-a и др.). [c.210]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология