Методы иммуноанализа

Большинство модификаций хемилюминесцентного анализа относятся к твердофазным методам иммуноанализа. Для разделения [c.140]

Подход (i использованием систем с переносом энергии только начинает разрабатываться в иммуноанализе и, безусловно, найдет применение как один из вариантов гомогенных методов иммуноанализа. [c.145]

Приведенной обзор данных по применению био- и хемилюминесцентных реакций в иммуноанализе позволяет заключить, что детектирующие системы на их основе обладают большими потенциальными возможностями в плане повышения точности и чувствительности методов иммуноанализа, разработки новых вариантов экспресс-определения, создания систем автоматического определения. [c.145]

В соответствии с лежащими в их основе принципами методы иммуноанализа можно подразделить на три основные группы [c.8]

В этой книге вы найдете подробную информацию о различных новых методах иммуноанализа. Однако даже несомненные преимущества большинства из этих методов вряд ли заставят хи-миков-аналитиков или руководителя лаборатории сразу заменить старые методы новыми. Подобные перемены, если они и происходят, больше определяются политическими, административными и финансовыми соображениями, а не пожеланиями научного персонала. [c.14]

Европейские страны очень сильно отличаются друг от друга по организации, широте и уровню применяемых методов иммунодиагностики. Поэтому здесь наиболее уместным будет сравнить отдельные регионы с точки зрения используемых методов иммуноанализа, источников реагентов и аналитических наборов, а также тенденций в развитии новых технологий. [c.14]

Таблица 1.2. Методы иммуноанализа без радиоактивных меток, применяемые в настоящее время в клинической химии в Великобритании

Существует множество причин, по которым РИА (или ИРМА) все еще является основным методом иммуноанализа в Италии. Во-первых, специалисты в области иммуноанализа, посвятившие многие годы внедрению РИА, обычно крайне неохотно идут на его замену. Во-вторых, и это более важно, нерадиоактивные метки используются только в тех областях, где нельзя найти 456-2 [c.17]

Консерватизм. Консерватизм мышления все еще остается важным фактором, определяющим оснащение диагностических лабораторий. В качестве примера можно привести военно-медицинские лаборатории США. Переход в этих лабораториях от одного типа иммуноанализа к другому потребовал бы не менее пяти лет только на клинические испытания, необходимые, согласно существующим правилам, для оценки и утверждения изменений в стандартах и протоколах анализов. Следовательно, в этом секторе американских лабораторий весьма маловероятен переход от РИА к другим методам, независимо от связанных с таким переходом технических преимуществ. Иная ситуация складывается в частных гражданских лабораториях, в которых переход на альтернативные методы иммуноанализа идет полным ходом и, по-видимому, полностью завершится в ближайшие десять лет. Во многих лабораториях Великобритании переход на альтернативные методы затруднен из-за нежелания руководителей лабораторий внедрять новые методы и расходовать средства на приобретение нового оборудования. [c.20]

Диапазон анализов. Другим важным фактором, определяющим внедрение новых методов, является количество различных анализов, которое позволяют осуществить данный метод или аналитическая система. Многие лаборатории, особенно в Великобритании, неохотно внедряют альтернативные методы иммуноанализа, если только они не обеспечивают возможность выполнения всего набора анализов или его существенной части. Очень трудно решиться на приобретение новой аналитической системы, которая заменяет только один из существующих методов. Технические показатели такой системы должны быть очень высокими. Этот фак- [c.20]

В заключение следует напомнить, что поскольку способ лечения определяется диагнозом, то методы анализа в первую очередь должны отвечать требованиям диагностики и обеспечивать правильность диагноза. Не следует полагать, что альтернативные методы анализа надо внедрять только потому, что они являются более привлекательными и более изящными вариантами имеющихся методов. В конечном счете они должны соответствовать требованиям диагностики нельзя сначала разрабатывать метод и только после этого искать ему применение. Несмотря на постоянное усложнение и развитие методов иммуноанализа, никогда не следует забывать об основной аналитической задаче и необходимой для ее решения информации. [c.24]

Из перечисленных тестов только два выполняются методами иммуноанализа. Очевидно, что виды анализов, которые можно проводить на дому, ограничены техническими возможностями, клинической значимостью и социальной приемлемостью. Последний фактор затрудняет переход от лабораторных анализов к анализам в домашних условиях в силу позиций как врача, так и пациента. Очень немногие пациенты были бы готовы к самостоятельной постановке диагноза, не получив одобрения лечащего врача. Например, можно разработать домашний тест на венерические заболевания, такие, как гонорея. Однако эта возможность наталкивается на проблемы необходимости сообщения о положительном результате, возможности ложных положительных результатов и низкой чувствительности теста при анализе необработанных проб. Кроме того, наличие таких болезней предполагает существование второго потенциального пациента - партнера. В связи с последствиями положительных результатов и необходимостью выяснения потенциальных контактов домашние тесты встречают сильное возражение со стороны профессиональных медицинских работников. Следовательно, получение разрешения на такие тесты столкнется со значительным сопротивлением и потенциальный потребитель не будет иметь возможности приобрести такой набор. [c.92]

Определение констант скоростей комплексообразования с использованием меченых реагентов. Этот метод, нашел большое применение в связи с развитием высокочувствительных методов иммуноанализа, основанных на использовании меченых реагентов радиоим-мунологического, иммуноферментного и других -методов. Кинетические закономерности простейшей схемы (3.38) взаимодействия антиген — антитело (моноклональные антитела — одновалентный антиген) описывает система дифференциальных уравнений [c.52]

АВЕ1 как маркер потенциально обладает рядом преимуществ, позволяющих на основе этого маркера разрабатывать высокочувствительные методы иммуноанализа. Данные по использованию изолюминола как маркера приведены в табл. 4.11. [c.140]

Известно, что радиус Стокса молекул IgG с Л г=150 000 составляет около 4 нм, а расстояние до активных центров около 5,5 нм. Таким образом, если на поверхности белковой глобулы расположить 4—12 молекул флуоресцеина, то среди них найдется по крайней мере одна, которая будет акцептором энергии молекулы донора, связанной с активным центром антитела. Для того чтобы эффект переноса энергии между IgG и флуоресцеином наблюдался в растворе, необходимо, чтобы концентрация флуорохро-ма была не ниже, чем 1—10 мМ. Если принять во внимание, что концентрация антител при проведении иммуноанализа составляет 0,01 пмоль, то очевидно, что перенос энергии может наблюдаться только внутри комплекса антиген — антитело и отсутствует между несвязанными молекулами. Этот факт положен в основу гомогенных методов иммуноанализа, базирующихся на эффекте переноса энергии. [c.144]

Неизотопные методы иммуноанализа//Итоги науки и техники. — М. ШНИТИ, 1987. Сер. Биотехнология. Т. 3. [c.284]

При оценке возможностей и отнесении того или иного метода иммуноанализа к определеному типу во внимание принимаются главным образом следующие факторы [c.8]

Антитела являются одним из наиболее важных реагентов при определении auTnrenoB методом иммуноанализа. Антитела могут быть [c.10]

На завершающем этапе иммуноанализа величина сигнала от метки может быть выражена в виде ее общего количества или в виде концентрации. Кроме того, непосредственно определяемсй величиной может быть скорость реакции. (Способ регистрации также можно использовать для классификации методов иммуноанализа (оптический иммуноанализ, амперометрический иммуноанализ и т.д.). [c.12]

Кроме того, методы иммуноанализа можно юшз ицирбвать по способу. осуществления [c.12]

Оборудованне и реагенты. Многие новые методы иммуноанализа трёбуют специального оборудования или регулярной поставки реагентов. В настоящее время во многих странах Европы и в Северной Америке принято связывать реагенты и анализатор как. технически, так и в финансовом отношении. Такой подход обеспечивает относительно низкие капитальные и эксплуатационные расходы. Однако руководители ряда лабораторий, особенно в Великобритании, предпочитают сани выбирать оборудование и реагенты. Здесь очевидна связь с обсуждавшейся выше проблемой производства реагентов внутри лабораторий. Следует подчеркнуть, что система регулярной поставки реагентов оказалась очень эффективной во многих странах Европы .тем самым она оказывает сильное влияние на выбор новых методов иммуноанализа. [c.22]

Автоматическое оборудование. Не менее важным фактором является применение автоматизированных аналитических систем. В настоящее время в Великобритании имеется менее 10 автоматизированных систем РИА несмотря на то, что за последние десять лет обычные клинические анализаторы были автоматизированы в очень большой степени. В прошлом при проектировании систем РИА и других методов иммуноанализа с нерадио- [c.22]

Многие альтернативные методы иммуноанализа уже нашли широкое применение вне клинических лабораторий. В. течение многих лет они используются иммунологами и мик юбиологами, а также в текстильной, нефтехимической и пищевой промышленности, хотя цели и задачи этих методов в каждом случае различны [c.23]

Какие-бы новые методы иммуноанализа не разрабатывались, всеща необходимо помнить о решающей роли антител. Антитела являются базисом любого иммуноанализа, независимо от систем регистрации и усиления сигнала или от применяемых реагентов. Иногда возникает такое впечатление, что при разработке новых методов этот факт упускают из вида. [c.23]

Различные способы сравнения свидетельствуют, что обычно разные методы иммуноанализа дают хорошо согласующиеся между собой результаты. Однако иногда результаты определения конкретного вещества с помощью данного метода выходят за разумные пределы. Например, два года назад в одной из стран применение нескольких готовых наборов постоянно приводило к существенно отличающимся результатам определения тнреотропного гормона [c.25]

TSH) в плазме. Представители компаний, выпускающих эти наборы, решили, что расхождения в результатах анализа могли возникнуть из-за применения различных по составу растворов для разведения международного стандарта. Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) было предложено разработать метод изучения эффекта различных матриксов. Затем ВОЗ совместно с Международной организацией клинической химии (IF ) провела специальный симпозиум по данной проблеме, на котором были предложены пути улучшения сопоставимости результатов различных методов иммуноанализа. [c.26]

Стандартизация матриксных эффектов. Для улучшения сопоставимости результатов, полученных с помощью различных методов иммуноанализа, ВОЗ было предложено поставлять общий контрольный матрикс для использования с определенными международными стандартами. Такой матрикс мог бы выпускаться в виде ампул с лиофилизованной цельной сывороткой, обработанной соответствующим образом для удаления из нее определяемого вещества. Любой используемый для обработки метод должен точно воспроизводиться при получении последующих партий, а техноло- [c.28]

Ситуация резко изменилась после введения неизотопных меток для регистрации реакции антиген - антитело [5 ], и особенно после применения моноклональных антител в двухцентровом им-мунометрическом анализе белков [б ]. Необходимость создания высокочувствительных методов иммуноанализа для научных исследований, а также более простых методик для проведения анализов в поликлиниках, полевых условиях и для самодиагностики также содействовала бурному развитию твердофазных методов. Носители, применяемые в этих анализах, могут быть выполнены в виде трубок, шариков, мелких гранул, микропланшетов, полосок, пленок и электродов. [c.53]

В нашей лаборатории для разработки различных методов иммуноанализа мы применяли имеющиеся в продаже конъюгаты авидина с ферментами, а также синтезировали препараты биотинилированных белков и стрептавидина с хемилюминесцентной меткой. [c.67]

Иммунофильтрация. Под иммунофильтрацией понимают определение вещества методом иммуноанализа после его выделения из пробы фильтрацией через полупроницаемую мембрану. В наиболее простом варианте антиген удерживается мембраной неспецифически, только благодаря определенному размеру ее пор. Далее его определяют с помощью конъюгата фермент - антитело. Этот метод использован для определения ассоциатов вирусов с клетками [1, 2], однако он не применим к растворимым антигенам или свободным вирусам. В этом случае необходимый антиген специфически связывают с антителами на мембране. [c.80]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология