Антитела неполные

Метод выявления неполных антител (проба Кумбса). [c.107]

Сопутствующие химические изменения можно изучить, анализируя тонкие слои эпидермиса, срезанные параллельно поверхности, или последовательные слои клеток, обдираемые при повторном наложении и снятии липкой ленты. Молекулы кератина можно экстрагировать и идентифицировать по их электрическому заряду, молекулярной массе, сродству к специфическим антителам н набору малых пептидов, на которые расщепляются кератины при их неполном переваривании. Таким способом было показано, что кератины содержатся во всех слоях эпидермиса. Однако существует много различных видов кератина, кодируемых большим семейством генов. Это семейство возникло в процессе эволюции в результате дупликаций и мутаций какого-то одного предкового гена. В различных слоях эпидермиса синтезируются разные виды кератинов. Кератины шиповатых клеток отличаются, например, от кератинов, заполняющих мертвые ороговевшие чешуйчатые клетки. По мере того как стюловая клетка, находившаяся в основании колонки, превращается в чешуйку наверху, она последовательно экспрессирует различные группы из всего набора гомологичных кератиновых генов. [c.156]

При использовании антигенов, полученных с помощью хроматографических методов и поэтому, по крайней мере частично, растворимых, смешайте 0,2—2,0 мг интактного гибридного белка, растворенного в 1 мл физиологического раствора или PBS с 1,25 мл полного адъюванта Фрейнда и получите гомогенную эмульсию, как описано выше. Сделайте зафиксированному кролику подкожные инъекции в несколько мест. Повторите инъекции 0,2—1,0 мг антигена в неполном адъюванте Фрейнда на 14-й и 21-й день и с 28-го дня начинайте брать кровь. Для определения титра антител берите кровь еженедельно и повторите введение 0,2—1,0 мг антигена, когда титр антител начнет уменьшаться. После получения достаточного количества антисыворотки, пока титр антител остается достаточно высоким, возьмите под анестезией кровь из сердца кролика. [c.163]

И второй эксперимент. Обычный гамма-глобулин из сыворотки кролика можно перестроить в пробирке в антитела, специфичные, скажем, к человеческому сывороточному альбумину с динитрофенильным остатком (ДНФ) в качестве дополнительной группы. Для этого достаточно только заранее немного (неполностью) развернуть молекулу гамма-глобулина и предоставить идти процессу свертывания в присутствии ДНФ-альбумина. Конечно, большая часть молекул приобретет исходную форму, однако 0,5% молекул станут все-таки после этого специфичными к ДНФ-альбумину. Может показаться, что это совсем мало, однако, в сущности, именно этого и следовало ожидать, так как, очевидно, всегда лишь немногие антигены будут встречаться с частично развернутым глобулином в нужном месте и в нужное время. [c.346]

Определению аутоиммунного характера приобретенной гемолитической анемии способствовали многочисленные исследования, проведенные на основе предложенной Кумбсом прямой пробы, которая позволяет выявлять блокирующие неполные фиксированные на эритроцитах антиэритроцитарные антитела. Разработанная тем же автором непрямая проба применяется для обна- [c.230]

При помощи РПГА определяют полные (бивалентные) антитела. Неполные (моновалентные, блокирующие) антитела не выявляются этим методом, так как, соединяясь с антигеном, блокируют его, но не могут вызвать агрегации частиц в крупные конгломераты. Для выявления неполных, например антирезусных, антител в исследуемой сьшоротке используют специальную реакцию — п р о б у с антиглобу-линовой сывороткой, которая получила название р е а к - [c.108]

Сначала кроликов иммунизируют по Мильгрому. Для этого из ушной вены животного берут 2 мл крови, смешивают с 0,5 мл 3,8%-ного раствора лимоннокислого натрия, осаждают эритроциты и трижды отмывают их пятью объемами физиологического раствора хлористого натрия. К осадку отмытых эритроцитов прибавляют два объема инактивированной сыворотки человека группы АВ и, периодически помешивая, инкубируют смесь в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем эритроциты вновь трижды отмывают, доводят объем суспензии физиологическим раствором до 2 мл и вводят в вену тому же самому кролику. Эти инъекции повторяют каждые 3 дня, пока титр антиглобулиновых антител не достигнет 1 1000—2000 в реакции пассивной гемагглютинации с эритроцитами НЬ (О) +, сенсибилизированными неполными анти-О-антите-лами с титром 1 32. [c.117]

Исходным материалом для получения анти-1Шо(.0)-1д является сыворотка или плазма крови, содержащая неполные анти-НЬо(О)-антителав вы,соком>титре сыворотка ИЬ(-)лиЦ, сенсибилизированных К D-изоантигену во время предшествующих беременностей. Rh( + ) пл"одом или в резу тате переливания iUi( + ) крови. Однако более стабильные и высококачественные препараты получают в случае использования сыворотки или плазмы крови рт специально иммунизирование доноров (например, Rh-отрицательных женщин нёдеторрдйо р зраста)./ j Г [c.596]

В молекуле иммуноглобулина меньше двух антигепсвязываю-щих центров быть не может, но один может быть завернут внутрь молекулы — это неполное антитело. Оно блокирует антиген, и тот не может связаться с полными антителами. [c.58]

Отметить результаты реакции Кумбса определить титр неполных антирезусных антител в сыворотке беременной женщины. Объяснить, какие конт-роли должны сопровождать деакцию Кумбса. [c.109]

Кроме того, для серодиагностики бруцеллеза используют РПГА, реакцию иммунофлюоресценции, опсонофагоцитарную реакцию, РСК, определение неполных антител и др. Эти серологические реакции обладают достаточно высокой чувствительностью и специфичностью. В поздние периоды заболевания процент положительных серологических реакций (агглютинации, РПГА и РСК) начинает снижаться и большее диагностическое значение приобретают кожно-аллергическая проба и реакция Кумбса, поэтому комплексный сероаллергический метод является наиболее надежным в диагностике бруцеллеза. [c.207]

Поликлональные антитела против GGT почек быка или GGT почек крысы (легкие формы) могут быть получены иммунизацией кроликов (самки, возраст 6—8 нед) путем инъекций в подушечки задних лап эмульсии, состоящей из 50 мкг фермента в 0,5 мл Na l-натрийфосфатного буфера с 0,5 мл полного стимулятора Фрейнда на животное. Через 2 нед вводят то же количество антигена (50 мкг GGT в 0,5 мл того же буфера), хорошо эмульгированного неполным стимулятором Фрейнда, подкожно в несколько мест шеи. Целесообразно повторить последнее введение еще через 2 нед. Через 10—15 сут берут пробы крови кролика инкубируют взятые пробы при 37 Х в течение 2 ч, затем оставляют на ночь при 4 °С и отделяют антисыворотку центрифугированием при 3000 g в течение 30 мин. В анализах методом двойной иммунодиффузии антисыворотка при разбавлении 1 128 (Na l-фосфатным буфером) все еще дает дуги преципи тации с разбавленной GGT (0,025 мг/мл). [c.153]

Если ферментом помечен высокоочищенный антиген, то на заключительной стадии анализа возможно измерение как несвязанного с антителами Аг, так и связанного (АтАг ) меченого антигена. В первом случае процедура твердофазного анализа упрощается, так как не требуется отмывка иммуносорбента, предшествующая измерению метки. Если метка вводится в неполностью очищенный препарат антигена, то определение ее ферментативной активности возможно в комплексе АтАг только после его отделения, так как в несвязанном с антителами состоянии в этом случае кроме меченого антигена находятся и меченые примесные компоненты. I [c.227]

Помимо рецептора инсулина существуют другие симметрично построенные белки, проявляющие асимметрию относительно сродства их активных центров к лиганду. Так, в молекуле неполного антитела (ввиду отсутствия у него преципитирующих и агглютинирующих свойств) только один нз активных центров имеет высокое сродство к детерминантной группе антигена. Причина асимметрии реце. тора инсулина (неполное антитело) по степени сродства к лиганду пока еще не выяснена. [c.18]

Для растворимых антигенов известны разнообразные схемы иммунизации. Например, первую инъекцию 100 мкг антигена, эмульгированного в полном или неполном адъюванте Фрейнда, осуществляют подкожно (в 0,1 мл), а последующие инъекции (оо 100 мкг в PBS объемом 0,5 мл) проводят в/б с интервалом в месяц. Отбирают пробу крови, чтобы убедиться в наличии адекватного титра антител в сыворотке, а затем осуществляют последние инъекции антигена (в/б утром и в/в днем), за 3—4 дня до гибридизации. [c.123]

С помощью ОФ-ВЖХ пытались разделять целые молекулы иммуноглобулинов (Alvarez et al., 1981 Henson, неопубликованные данные), однако удовлетворительных результатов получить не удалось, поскольку с колонки элюировался широкий пик с плохим разрешением. Вместе с тем такой результат может быть хорошим показателем неполного расщепления антител. Иммуноглобулины чрезвычайно устойчивы к действию протеаз. Для того чтобы прошло полное расщепление иммуноглобулинов, полезно предварительно обрабатывать их кислотой. Предполагают, что обработка кислотой вызывает разворачивание структуры иммуноглобулинов, и это способствует протеаз-ному расщеплению. [c.144]

Соответствие конформации антигенсвязывающего центра антитела конформации антигенной детерминанты благоприятствует возникновению сил межмолекулярного притяжения и одновременно в большой степени препятствует возникновению сил отталкивания. При неполном соответствии конформаций, напротив, силы отталкивания преобладают. Если электронные оболочки эпитопов и паратопов перекрываются, возникают значительные силы отталкивания, превышающие любые слабые силы притяжения. [c.151]

Холодовые аутоантитела часто присутствуют в более высоких титрах, чем тепловые. Они принадлежат главным образом к классу IgM и прочно связывают комплемент. В больщинстве случаев эти антитела специфичны по отношению к антигенам системы групп крови l . Эпитопы I и i присутствуют на молекулах — предшественниках полисахаридов, содержащих эпитопы системы ABO, и являются результатом неполного глико-лизирования основного полисахарида. [c.449]

Возможность свободного вращения активных Fab-фрагментов относительно друг друга сильно влияет на характер реакции антител с антигеном. Так называемые неполные антитела кролика против эритроцитов неспособны вызвать реакцию агглютинации. Однако по ле разрыва единственного дисульфидного мостика между тяжелыми цепями эти же антитела агглютинируют эритроциты (Romans е. а., 1977). Объяснить этот результат можно тем, что при восстановлении дисульфидной связи молекула антитела приобретает способность реагировать сра у с вумя эритроцитами из-за снятия каких-то ограничении, накладываемых этой связью, и вследствие этого появления относительной свободы движения Fab-фрагментов. [c.29]

Некоторые вещества самостоятельно не вызывают иммунного ответа, но приобретают эту способнорть при конъюгации с высокомолекулярными белковыми носителями или в смеси с ними. Такие вещества называют неполными антигенами, или гаптенами. Гаптенами могут быть химические вещества с малой молекулярной массой или более сложные химические вещества, не обладающие свойствами полного антигена некоторые бактериальные полисахариды, полипептид туберкулезной палочки (РРД), ДНК, РНК, липиды, пептиды. Гаптен является частью полного или конъюгированного антигена. Образующиеся к конъюгату белка с гаптеном антитела могут также реагировать и со свободным гаптеном. Гаптены иммунного ответа не вызывают, но они вступают в реакцию с сыворотками, содержащими специфические к ним антитела. [c.145]

Вццы антител. Помимо полноценных антител, обладающих специфичностью и активным участием в реакциях иммунной защиты, выделяют нормальные, или естественные, антитела и неполные антитела. К нормальным относят антитела, обнаруживаемые у людей или животных, не подвергавшихся какой-либо иммунизации. Их роль в защите не совсем ясна. К неполным антителам относятся иммуноглобулины с одним активным центром (валентностью). Эти антитела неполноценны, так как, соединяясь с антигеном, они не могут агрегировать частицы в конгломераты. У неполных антител второй центр имеется, однако он экранирован или имеет малую авидность. Для выявления неполных антител используют реакцию Кумбса. [c.156]

Реакция агглютинации для определения групп крови и резус-фактора. Антитела к резус-фактору эритроцитов являются неполными, поэтому, связываясь с эритроцитами, эти антитела не могут их агглютинировать. Для их выявления дополнительно в реакцию вводят антиглобулиновую сыворотку, содержащую антитела к иммуноглобулинам человека (реакция Кумбса). Антитела антиглобулиноюй сыворотки, взаимодействуя с неполными антителами к резус-фактору, адсорбированными на эритроцитах, агглютинируют эритроциты. С помощью реакции Кумбса выявляют как антитела против резус-фактора, так и резус-фактор диагностируют гемолитическую болезнь новорожденных, эритроциты которых соединяются с циркулирующими в крови неполными антителами к резус-фактору. [c.177]

Вследствие этого в растворах образуются крупные конгломераты веществ. Антитела, вызывающие видимые реакции, называют ал ьшм. В противоположность этому некоторые иммуноглобулины-мономеры реагируют с антигеном лишь одним паратопом, видимых реакций не дают и поэтому называются неполными антителами. Если же реакция взаимодействия этих антител происходит в крови и не вызывает каких-либо нарушений в организме, их называют антителами-свидетелями. Последние блокируют антиген, а нередко одновременно связывают комйлемент, вследствие чего называются блокирующими и комплементсвязывающими. Реагирование 1 Е и lgG с антигенами может приводить к развитию аллергий. При незначительных, бесследно исчезающих проявлениях аллергии на кожных покровах аллергические антитела называют реагинами, а при ярко выраженных повреждениях клеток кожи — агрессинами или кожно-сенсибилизирующими антителами. [c.37]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология