Нигрозин, окрашивание

Примечание. Окрашивание нигрозином весьма удобно для< определения очень малых количеств белка. [c.73]

Полученный указанным выше способом Нигрозин называется Нигрозин спирторастворимый (или Нигрозин основной) в воде он нерастворим используется для окрашивания пластических масс, дерева и для изготовления лаков. [c.362]

Сульфированием Нигрозина спирторастворимого получают Нигрозин водорастворимый. Сульфирование ведут 96—98 1)-ной серной кислотой (2 ч. кислоты на 1 ч. Нигрозина) при 125—130°С. По окончании сульфирования реакционную массу выливают в воду, декантируют жидкость и промывают Нигрозин водой. Затем краситель нейтрализуют едким натром, высушивают и размалывают в порошок. Нигрозин водорастворимый применяют преимущественно для окрашивания кожи. [c.362]

Оксидированный алюминий и его сплавы окрашивают (после обработки в растворе аммиака и промывки в воде), выдерживая в течение 10—20 мин. в горячем (70—вО° С) растворе анилинового красителя (1—б г/л). Черный цвет достигается в одном из красителей нигрозин водорастворимый, прямой черный 3, прямой диазочерный С, черный 2К- Золотисто-желтый цвет получают при окрашивании в течение 5—10 мин. в растворах ализарина желтого, аурамина или прямого желтого ЖХ. [c.225]

Для окрашивания стеклопластиков могут быть использованы различные классы красителей пигменты (неорганические и органические) основные красители красители, растворимые в органических растворителях нигрозины индулины [34]. [c.65]

Для окрашивания пресспорошков в черный цвет применяют органический краситель — нигрозин спирторастворимый, в коричневый цвет с разными оттенками — природные неорганические красители мумию, умбру, охру. Для окрашивания пресспорошков в другие цвета— красный, синий, желтый, оранжевый, зеленый — используют, соответствующие органические и минеральные красители. Органические красители обычно вводят в композицию-без подготовки, а неорганические предварительно измельчают и просеивают. [c.205]

Пресс-порошки технического назначения обычно окрашивают в темный цвет (черный или коричневый), что связано с окисляе.мостью свободного фенола в олигомере кислородом воздуха. В качестве красителей чаще всего применяют нигрозин для окрашивания в черный цвет и мумию — в коричневый цвет. [c.282]

Имеется несколько удовлетворительных методов для окрашивания эндоспор в бактериях. При использовании простейшего из них — негативного окрашивания — получают нефиксированные препараты, материал которых имеет негативный вид. Для осуществления метода взятый петлей 7%-ный (вес/объем) водный нигрозин смешивают на покровном стекле с набранной петлей культурой, смесь распределяют в виде тонкой пленки и высушивают на воздухе. Покровное стекло переворачивают пленкой вниз, помещают на предметное стекло и [c.73]

После электрофореза полоски пленки помещают во влажную камеру. Для этой цели удобно использовать плоскую пластмассовую коробку с плотно прилегающей крышкой. Пленку кладут на подложку из фильтровальной бумаги с прямоугольной прорезью так, чтобы с подложкой соприкасались только края пленки. Подложки можно изготавливать, например, из нескольких слоев фильтровальной бумаги ватман № 3. Крышку коробки следует выстлать поролоновой губкой, которую увлажняют, чтобы во время иммунодиффузии в камере поддерживалась влажная атмосфера. Подложки также смачивают раствором электролита, используемым для пропитывания пленок. Полоски фильтровальной бумаги (ватман № I) шириной 1—2 мм пропитывают антисывороткой, проводя по ним пастеровской пипеткой, которую держат в вертикальном положении. Оптимальное количество антисыворотки и расстояние между полоской с антисывороткой и образцом подбирают эмпирическим путем. Если полоска содержит только часть необходимого количества антисыворотки, то остальной объем наносят уже после того, как полоску помещают на пленку. Оптимальное время диффузии следует определять в предварительных опытах как правило, для этого требуется 18—48 ч. Линии преципитации не видны на пленках и обнаружить их можно только после окрашивания. С этой целью избыток белка удаляют путем промывания пленки солевым раствором в течение нескольких часов, после чего преципитаты можно окрасить так же, как зоны, получаемые при электрофорезе на ацетате целлюлозы. Лучше всего пользоваться водорастворимыми красителями (пунцовый 5 или нигрозин). [c.245]

В некоторых случаях всем остальным белковым красителям следует предпочесть нигрозин (С. I. 50420). Ли [751] показал, что в полиакриламидных гелях глютеновые белки окрашиваются водорастворимым нигрозином лучше, чем амидовым черным. Для окрашивания гели выдерживают 3 ч в смеси метанол — вода — уксусная кислота (4 5 1 по объему), содержащей 0,0125% нигрозина, а затем обесцвечивают в той же смеси растворителей. Гели можно хранить в 5%-ной уксусной кислоте. Найдено, что нигрозин имеет ряд преимуществ при окрашивании белков эндосперма пшеницы [250], а также белков, преципитирующих в иммунологических реакциях. [c.272]

Описаны приемы локализации протеолитической активности после электрофореза в крахмальном [655, 1120] и полиакриламидном гелях [57] с использованием методики включения субстрата в гель. Возможность применения этой методики для указанной цели была недавно изучена [37]. Чтобы предотвратить миграцию белкового субстрата вовремя электрофореза, эти авторы использовали в качестве субстрата казеин, осажденный кислотой. Нерастворимый казеин обрабатывали ультразвуком и образовавшиеся мельчайшие частицы смешивали с гелеобразующим раствором. Конечная концентрация казеина в геле составляла 0,1% (масса/объем). После электрофореза гель инкубировали в течение 2—12 ч при 37°С в 0,1 М буфере трис-НС1 (pH 7,5). Казеин пригоден только при электрофорезе в кислой среде, поскольку в щелочной среде он мигрирует. В этом случае вместо казеина можно использовать препарат гемоглобина, приготовленный путем осаждения и обработки ультразвуком. Окрашивание гелей белковым красителем (напри-, мер, нигрозином) увеличивало контрастность полос. [c.303]

Окрашивание нигрозином. Используют следующую методику мацерации и окрашивания объектов. Готовят смесь концентрированной соляной кислоты и 95%-го раствора этилового спирта (соотношения 1 4, 1 2, 1 1, в зависимости от материала для нежных объектов — 1 4). В мацерирующую жидкость [c.101]

Нигрозины применяют для приготовления типографских красок и сапожной мази (жирорастворимые и жироплавленые), для окраски лент пишущих машин, в производстве пластмасс для окрашивания прессовочных порошков, для приготовления спиртовых - лаков (спирторастворимые), для окраски бумаги, изготовления чернил водорастворимые) и т. д. [c.356]

Шликеры некоторых белых и слабоокрашенных эмалей могут быть похожи по внешнему виду. Для того чтобы легко отличать их друг от друга, предложено [51] подкрашивать шликеры органическими индикаторами в минимальных количествах (5—10 г на 100 кг фритты), выгорающими при обжиге. Для окрашивания белых шликеров в розовый цвет добавляют ализарин (0,005%), кристалл фиолетовый (0,004%), анилиновый голубой (0,008%) в красный цвет — фуксин (0,005%), конго красный (0,005%) в голубой—метиленовый голубой (0,004%), водяной голубой (0,006%), малахитовый зеленый (0,005%) в серо-коричневый — нигрозин (0,01%). Такая подкраска помогает также визуально оценивать толщину и равномерность при нанесении белой или- сла-боокрашенной эмали на эмаль того же цвета. [c.81]

Окрашивание может производиться одновременно с уплотнением пор (другой способ). В кипящем растворе выбранного красителя (наилучшими являются ализариновая зелень, сатурновый желтый, нигрозин и т. д.) после окрашивания сразу происходит закрытие пор. [c.54]

При применении этого метода наносят очень небольшие количества концентрированного раствора исследуемого препарата на старт в виде узкой полосы. В результате электрофореза (может быть приложена весьма высокая разность потенциалов, поскольку в геле подавляются конвекционные токи) смесь будет разделяться на ряд зон, что позволяет получить более высокое разрешение, чем при работе по методу свободной границы. Более того, можно варьировать средний размер пор и распределение пор по размерам для некоторых поддерживаюш,их сред (крахмал, агар, полиакриламид) таким образом, что действие одного из факторов, влияюш их на электрофоретическую подвижность, а именно гидродинамического сопротивления, будет столь велико, что часть молекул будет практически неподвижной [30]. Электрофоретические подвижности в гелях или на бумаге нельзя непосредственно сравнивать с электрофоретическими подвижностями, измеренными методом свободной границы, кроме тех случаев, когда рассматриваемые молекулы малы по сравнению с размерами пор в поддерживающей среде. Компактные белки с молекулярным весом вплоть до 50 ООО легко диффундируют в 5%-ном полиакриламидном геле, и даже с веществами большего молекулярного веса можно получить хорошие результаты. Бумагу или гелевый блок нужно окрасить, чтобы показать положение различных компонентов можно также сделать перенос на подходящим образом вырезанный кусок фильтровальной бумаги, хотя эта методика часто малочувствительна. Обычные красители, применяемые для обнаружения белков (нигрозин, амидовый черный), дают удовлетворительные результаты для многих гликонротеинов, но некоторые эпителиальные вещества, которые могут представлять собой по существу углеводы (до 90%), окрашиваются довольно плохо. Было найдено, что для кислых гликонротеинов лучше применять толуидиновый голубой [32] или муцикармин [33], а алциановый голубой окрашивает как кислые, так и нейтральные гликопротеины [34]. Наиболее общей методикой окрашивания является, по опыту автора, методика Райдона и Смита [35] (хлорирование и обработка смесью крахмала и иодистого калия), но она неприменима на полиакриламидных гелях. [c.47]

Этот вид окрашивания дает возможность самыми простыми, а зачастую и самыми быстрыми способами получить информацию о преломляюш,их свет включениях, таких, как сера или гранулы поли-р-оксимасляной кислоты, и о спорах [12]. При его осуществлении взятый петлей 7%-ный (вес/объем) водный нигрозин (или тушь, или конго красный) тщательно перемешивают с бактериальной суспензией на покровном стекле, размазывают смесь до образования тонкой пленки и высушивают на воздухе. Затем кладут покровное стекло на предметное пленкой вниз и фиксируют его положение одной-двумя каплями свечного воска. [c.59]

II. Отторжение красителя. К прижизненным красителям, используемым для оценки целостности мембран, относят трипановый синий, эозин V, нафтоловый черный, нигрозин (зеленый), эритрозин В и зеленый прочный. Для оценки жизнеспособности более надежным способом является окрашивание клеточных суспензий, поскольку при окрашивании прикрепленных клеток они могут открепляться от субстрата и теряться. Главным недостатком этого метода является невозможность выявления клеток с нарушенной способностью к размножению. Так, было показано, что клетки, не способные к клонообразованию, характеризуются 100%-ной выживаемостью при тестировании на отторжение красителя [34]. Метод, однако, удалось обновить, и введенные в него технические усовершенствования позволили в какой-то степени разрешить присущие ему проблемы. В методе, предложенном Вейзенталем с сотрудниками [35], выбран 4-дневный период исследований, в течение которого клетки с нарушенной способностью к размножению теряют целостность мембран. Артефакты, связанные с размножением жизнеспособных клеток или лизисом погибших клеток, корректируются путем добавления в суспензию фиксированных утиных эритроцитов в качестве внутреннего стандарта. При сравнении трех методов анализа подсчет клеток, определение жизнеспособных клеток и определение отношения числа жизнеспособных клеток к числу эритроцитов — выявляется повышенная чувствительность последнего метода (рис. 8.5). Этот метод с равным успехом был применен к солидным опухолям, клеткам выпотов и злокачественным клеткам крови. [c.270]

Окрашивание производится с использованием красителя, растворенного в фиксаторе. Существует много различных методов для преодоления встречающихся здесь трудностей, связанных со скоростью окращивания ([132, 183—189] ссылками на эти работы отнюдь не исчерпывается вся литература по данному вопросу). В качестве красителей широко используются амидно-черный, нигрозин, кумасси синий 0-250 и кумасси синий К-250. Последний особенно часто применяется для окрашивания белков, хотя он хуже окрашивает некоторые кислые белки по сравнению с амидно-черным. Кумасси синий обычно проявляет более высокую чувствительность, чем другие красители. В некоторых методах (см., например, [189]) красители не применяются, а используется свойство додецилсульфата калия или натрия выпадать в осадок на холоду. В белковых полосах содержится меньше свободного детергента, чем в промежуточных участках геля, поэтому полосы кажутся более прозрачными по сравнению с молочно-белым фоном. Этим методом тложно быстро получить результаты после гель-электрофореза в присутствии ДСН, но он недостаточно чувствителен. Успешно использовалось также предварительное мечение белков флуо-рескамином [190]. В этом случае денатурированные белки можно наблюдать (в содержащем ДСН геле) в ходе электрофореза по их флуоресценции в ближней УФ-области спектра. [c.326]

Были проведены эксперименты с целью упрощения технологии анодирования и окраски с применением 25-, 18- и 13-процентных растворов серной кислоты при температуре 21—32°, плотности тока 1,1—2 а дм и продолжительности 15—75 мин. Растворы для окрашивания, содержащие нигрозин и смесь нигрозина с желтым метанилом, были исследованы при рЯв пределах 4—7 и температуре 60—71°, с последующим уплотнением в горячей воде. Коррозионная стойкость и твердость покрытия, а также глубина проникновения краски изучались в каждом случае. В результате установили, что наилучшим для анодирования является следующий режим продолжительность 60 мин., температура 21—22,5°, плотность тока [c.245]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология