Триозофосфатизомераза

Между фосфотриозами происходит реакция изомеризации, катализируемая ферментом триозофосфатизомеразой. Равновесие устанавливается при 95% 3-фос-фоглицеринового альдегида и 5% фосфодиоксиацетона. [c.205]

Ферменты катализируют биохимические реакции стереоспеци-фично. Вследствие этого асимметрический синтез в природе происходит повсеместно и чаще всего в единственном направлепии, Следовательно, большинство природных соединений оптически активно, потому что получены ири каталитическом действии ферментов, обладающих определенной трехмерной структурой, В самом общем виде можно сказать, что между субстратом и активным центром фермента существует точное геометрическое соответствие, Например, фермент триозофосфатизомераза катализирует превращение оптически неактивного диоксиацетонмонофос-фата до о-глицеральдегид-З-фосфата [59]. Субстрат имеет прохиральный центр , и один атом водорода специфически переносится с одной стороны (ге-поверхности) двойной связи на карбонильную [c.203]

Альдолаза, триозофосфатизомераза и а-глицерол-З-фосфатде-гидрогеназа (по схеме I) пируваткиназа и лактатдегидрогеназа (по схеме II). [c.240]

Триозофосфатизомераза — фермент гликолиза, катализирует обратимую реакцию превращения -глицеральдегид-З-фосфата в диоксиацетонфосфат [c.249]

Глюкоза подвергается действию АТФ и превращается в глюко-зо-6-фосфат. Это соединение под влиянием фермента (оксоизоме-разы) перестраивается так, что образуется фруктозо-6-фосфат. Повторное действие АТФ переводит его в фруктозо-1,б-дифосфат. Для этого требуется участие фермента — фосфофруктокиназы. Фермент альдолаза разрывает шестичленную цепь атомов углерода, так что образуются трехуглеродные соединения — фосфогли-цериновый альдегид и фосфодиоксиацетон (он под действием фермента триозофосфатизомеразы переходит в фосфоглицериновый альдегид). Далее на фосфорилированный глицеральдегид воздействует важный фермент — дегидрогеназа. Активная группа этого фермента, переносящая водород, построена по тому же общему типу, по какому построены и фрагменты нуклеиновых кислот она содержит органические основания, остатки углевода рибозы и фосфатную группу и обозначается НАД. [c.367]

Триозофосфатизомераза пивных дрожжей имеет молекулярную массу 53 000 Да, состоит из двух неидентичных субъединиц. Оптимум pH в триэтаноламин-НС1-буфере — 7,0—8,5 и 7,6—9,5 соответственно при определении активности с использованием в качестве вспомогательного фермента глицерол-З-фосфатдегидрогеназы или глицеральде-гид-З-фосфатдегидрогеназы. Константа равновесия реакции изомеризации D-глицеральдегид-З-фосфата при pH 7,5 и 25°С равна 19. Кт для этого субстрата при тех же условиях — 1,27x10 М, а для диоксиацетонфосфата — 1,23X10 М. Л ° 1см при 280 нм равна 9,9. [c.249]

Определение активности триозофосфатизомеразы [c.249]

Глицерол-З-фосфатдегидрогеназа — 70 Е/мл, свежеприготовленный раствор на 10 мМ триэтаноламиновом буфере, pH 7,5. В нем не должно содержаться сульфата аммония, который ингибирует триозофосфатизомеразу. [c.250]

Триозофосфатизомераза — 0,4 Е/мл, свежеприготовленный раствор на 10 мМ триэтаноламиновом буфере, pH 7,5. [c.250]

В спектрофотометрическую кювету помещают реакционную смесь содержащую (указаны конечные концентрации) 80 мМ буфер, 0,25 мМ НАДН, 0,1 мл глицеральдегид-З-фосфата и 0,05 мл глицерол-З-фосфатдегидрогеназы. Перемешивают и устанавливают величину оптической плотности при 340 нм по шкале спектрофотометра на отметке 0,4—0,5. Добавляют 0,05 мл триозофосфатизомеразы (общий объем пробы — [c.250]

Глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназа (освобожденная от сульфата аммония), не содержащая триозофосфатизомеразы и глицерол-З-фосфатдегидрогеназы — 75 Е/мл, свежеприготовленный раствор на 30 мМ триэтаноламиновом буфере. [c.250]

Триозофосфатизомераза — 2 Е/мл, свежеприготовленный раствор на 30 мМ триэтаноламиновом буфере. [c.250]

ЭДТА, 5 мМ диоксиацетонфосфат, 0,3 мМ НАД, 13 мМ арсенат натрия, 0,04 мл глицеральдегидфосфатдегидрогеназы и 0,01 мл триозофосфатизомеразы (общий объем пробы — 3 мл). Перемешивают и в течение 3—5 мин измеряют увеличение оптической плотности при 340 нм. В контрольную кювету вместо раствора триозофосфатизомеразы добавляют соответствующий объем 30 мМ триэтаноламинового буфера. [c.251]

Арсенат оказывает ингибирующее действие на триозофосфатизомеразу, поэтому первый способ определения активности предпочтительнее. [c.251]

Хроматографирование на КМ-сефадексе и перекристаллизация. Суспензию кристаллов центрифугируют 20 мин при 40 ООО осадок растворяют в минимальном объеме холодной воды, диализуют, как указано выше, и наносят на колонку КМ-сефадекса С-50 (60x4,5 см) уравновешенного 10 мМ фосфатным буфером, pH 6,5. Триозофосфатизомеразу элюируют при комнатной температуре линейным градиентом хлористого натрия (от О до 0,15 М) в буфере, используя для этого 800 мл 10 мМ фосфатного буфера, pH 6,5, и 800 мл 0,15 М хлористого натрия в том же буфере. Обычно после пропускания 300 мл элюирующего раствора фермент начинает сходить с колонки и собирается примерно в 200 мл. [c.252]

Фракции, содержащие основное количество триозофосфатизомеразы, объединяют, добавляют при перемешивании 0,5 М ацетатный буфер до pH 6,0, затем сульфат аммония до слабого помутнения и оставляют в холодильнике. В течение суток фермент обычно начинает кристаллизоваться. По окончании кристаллизации суспензию центрифугируют 20 мин при 40 000 1 и осадок суспендируют в минимальном объеме 10 мМ фосфатного буфера, pH 6,5, содержащего 2,5 М сульфат аммония. В холодильнике препарат сохраняет свою активность по крайней мере в течение двух лет. [c.252]

Используя вспомогательные ферменты — триозофосфатизомеразу и глицерол-З-фосфатдегидрогеназу, за ходом транскетолазной реакции [c.279]

Сульфатно-аммонийная фракция, содержащая триозофосфатизомеразу и глицерол-З-фосфатдегидрогеназу (получение см на с. 290). Для использования ее растворяют в бидистиллированной воде до получения концентрации белка, равной 50— 100 мг/мл. Может несколько дней храниться при —16° С. [c.280]

Недавно методом рентгеноструктурного анализа была определена структура триозофосфатизомеразы из мышц цыпленка [136]. Около 22% из 247 аминокислотных остатков каждого мономера образуют восьмицепочечные параллельно упакованные участки -структур. Они скручиваются, образуя структуру, имеющую форму цилиндра (гл. 2, разд. Б,4). -Структуры чередуются с четырьмя а-спиральными участками, включающими 55% всех аминокислотных остатков. Структура этого фермента несколько напоминает структуру глицеральдегидфосфатдегид-рогеназы (рис. 2-10). [c.158]

Ферменты (в скобках даны кодовые номера) I - гексокиназа (2.7.1.1) или глюкокиназа (2.7.1.2) IА -гликоген-фосфорилаза (2.4.1.1) 1В - фосфоглюкомутаза (2.7.5.1) 2 - глюкозофосфатизомераза (5.3.1.9) 3 - фосфофруктокиназа (2.7.1.11) 4 - фруктозобисфосфатальдолаза (4.1.2.13) 5 - триозофосфатизомераза [c.78]

Поскольку структурные домены, по-видимому, являются единицами свертывания, то симметричное расположение доменов, наблюдаемое в роданезе (рис. 5.17, а) и иммуноглобулинах (табл. 5.3), объяснимо. Можно предположить, что в симметрически связанных сверхвторичных структурах домены образуются преимущественно на начальной стадии процесса свертывания, так как они сами по себе достаточно стабильны. Последующая агрегация создает симметрию. Симметричные сверхвторичные структуры обнаружены в виде (3а(3а(3-звена дегидрогеназы (рис. 5.12, б и 5.17, б), в виде (3а(3-звеньев триозофосфатизомеразы и пируват-киназы (рис. 5.17, д), а также в виде (3-зигзагов в полости (3-структуры 8ег-протеаз (рис. 5.17, г) и в виде антипараллельных пар а-спиралей в гемеритрине. [c.116]

Дупликация генов была постулирована для ЫАП-связывающих доменов четырех дегидрогеназ [91], в которых повторяется тип свертывания по Россману (рис. 5.12, б). Правда,эволюционная значимость этого обстоятельства (разд. 9.6) невелика, поскольку такое свертывание является энергетически предпочтительным элементом сверхвторичной структуры (разд. 5.2). Аналогичные случаи малой эволюционной значимости представляют структурные повторения внутри каждого из цилиндров сериновых протеаз (рис. 5.17, г), а также структурные повторения в триозофосфатизомеразе (рис. 5.17, д). [c.231]

Фосфорильные группы фиксированы относительно остова петли водородными связями, вS-малатдегидрогеназе [6911, о-глицераль-дегид-З-фосфатдегидрогеназе [230] и лактатдегидрогеназе [230] пи-рофосфатный фрагмент NAD связан с основной цепью соответствующей петли водородными связя.ми. В случае алкогольдегидрогеназы [692] исследование связывания на примере аналога NAD показало, что пирофосфат находится в том же положении (в пределах 3 А) относительно этой петли. Во флаводоксине петля обернута вокруг фосфорильного фрагмента FMN [145, 237, 238]. Как следует из исследований связывания субстрата, в аденилаткиназе основная цепь петли обернута вокруг фосфата АМР, в кристаллической аденилаткиназе эта петля фиксирует сульфат из маточного раствора [665]. В аналогичном положении связывается АТР в фосфоглицераткиназе [310, 311]. В глутатионредуктазе [124] пирофосфорил NADP присоединяется к остову соответствующей петли шпильки Россмана. То же самое относится и к пирофосфату FAD. В триозофосфатизомеразе [305] фосфат также расположен у петель, связывающих -листы и последующие а-спирали, но в С-концевой части полипептидной цепи (рис. 5.17, д). Во всех этих случаях используется петля между карбонильным концом -листа и следующей а-спиралью. Это можно объяснить выгодным электростатическим взаимодействием между отрицательным зарядом фосфорильной группы и диполем а-спирали [792], который возникает при наложении диполей водородных связей. [c.264]

Изомеразы. Катализируют превращение органических веществ в их изомеры, например триозофосфатизомераза катализирует превращение 3-фосфоглицеральдегида в диоксиацетон-фосфат. [c.28]

Пятая реакция-это реакция изомеризации триозофосфатов. Катализируется ферментом триозофосфатизомеразой [c.330]

Молекулярная биология. Структура и биосинтез нуклеиновых кислот (1990) -- [ c.176 , c.192 ]

Молекулярная биология (1990) -- [ c.176 , c.192 ]

Биологическая химия Изд.3 (1998) -- [ c.330 ]

Биохимия (2004) -- [ c.245 ]

Теоретические основы биотехнологии (2003) -- [ c.167 ]

Биохимия растений (1966) -- [ c.123 ]

Основы биохимии Т 1,2,3 (1985) -- [ c.446 , c.448 , c.449 , c.456 ]

Метаболические пути (1973) -- [ c.14 ]

Биологическая химия Издание 4 (1965) -- [ c.139 ]

Основы биологической химии (1970) -- [ c.280 , c.281 , c.287 , c.304 , c.328 ]

Биохимия растений (1968) -- [ c.113 ]

Генетика человека Т.3 (1990) -- [ c.18 , c.134 ]

Химия протеолиза Изд.2 (1991) -- [ c.357 ]

Биологические мембраны Структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами (2000) -- [ c.83 , c.85 ]

Структура и механизм действия ферментов (1980) -- [ c.24 , c.37 , c.114 , c.162 , c.308 , c.310 , c.403 , c.407 ]

Биологическая химия (2004) -- [ c.80 , c.87 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология