Холинэстераза обнаружение

Эта проба является общей для обнаружения большинства фосфорсодержащих органических ядохимикатов, основанной на их способности снижать активность холинэстеразы. [c.180]

Описаны многочисленные конструкции потенциометрических и амперометрических холинэстеразных биосенсоров [84 . В частности, интерес представляст потенциометрическая система на основе двух платиновых электродов. Измеряемой величиной является потенциал одного из элекфодов, который служит анодом В ячейку вносят раствор бутирил-тиохолиниодида (0,002 моль/л) с pH 7,4. При введении в раствор аликвоты пробы, содержащей холинэстеразу, потенциал анода понижается, причем скорость его изменения АЕ/А1 зависит от природы фермента и концентрации фосфорорганических веществ (систокс, паратион, зарин и др.) в растворе. Пределы обнаружения составляют для зарина - 0,0002, систокса - 0,01 и паратиона - 0,18 мкг/мл. Погрешность определений - [c.293]

При однократном нанесении препарата на неповрежденную кожу кроликов в дозе 500 мг/кг он в крови обнаружен не был. Угнетение холинэстеразы крови через 3 ч и на 2-й день после аппликации было значительным. На основании результатов этих опытов Т. Н. Паньшина предполагает, что фосфамид, всасываясь через кожу, подвергается существенным превращениям. [c.123]

Уже в самом начале исследований было ясно, что речь идет о действительно высоко специфической реакционноспособности ФОС определенного строения, поскольку их ингибирующий эффект проявлялся практически только лишь в отношении холинэстераз, причем в необычайно низких концентрациях ингибитора (часто порядка 10 — 10 М). Обнаруженная одновременно способность ФОС ингибировать некоторые протеолитические и эсте-ролитические ферменты не имела, по-видимому, практического значения для биологической активности ФОС и проявлялась при значительно (на несколько порядков) более высоких концентрациях. [c.204]

ХОЛИНЭСТЕРАЗА, см. Ацетилхолинэстераза. ХОЛОСТОЙ ОПЫТ (контрольный опыт), повторение процедуры хим. анализа в аналогич. условиях (с теми же реагентами, приборами и т. п.), но без анализируемого к ва. Проводят для определения поправки, к-рую необходимо вычесть из значения аналит. сигнала, измеренного при анализе исследуемого в-ва, чтобы получить правильный результат. Иногда поправку специально не определяют, а учитывают непосредственно в ходе измерений аналит. сигнала напр., в дифференц. спектрофотометрии р-р, полученный в X. о., используют в качестве р-ра сравнения. X. о., проведенный без анализируемого в-ва, не всегда позволяет найти правильное значение поправки, т. к. распределение определяемого компонента между фалами в разл. стадиях анализа может зависеть от содержания всех остальных компонентов. Флуктуации результатов X. о. определяют предел обнаружения вещества. Значения поправки X. о. зависят от чистоты реактивов и условий анализа. ХОНДРОИТИНСУЛЬФАТЫ, сульфатированные муко-полисахариды. Входят в состав соединит, тканн животных (хрящей, сухожилий). Углеводные цепи X. (см. ф-лу) по- [c.665]

Мы проделаем качественную реакцию на холинэстеразу. Для обнаружения этого фермента к сыворотке нужно добавить субстрат — раствор ацетилхолина и индикатор — [c.137]

Активация слабых ингибиторов холинэстеразы. Чтобы увеличить предел обнаружения, слабые ингибиторы холинэстеразы (см. табл. 25) активируют путем перевода их в Р=0 форму. Для активации используют следующие факторы. [c.127]

Биохимическое обнаружение ингибиторов холинэстеразы, см. стр. 178. [c.264]

Бензофосфат, как и некоторые другие органические соединения фосфора, является ингибитором холинэстеразы. Он задерживает разложение ацетилхолина холинэстеразой. Это свойство холинэстеразы используют для обнаружения, а иногда и для количественного определения органических соединений фосфора. [c.107]

Меназон, как и многие другие органические соединения фосфора, задерживает разложение ацетилхолина холинэстеразой. Это свойство меназона используется для обнаружения его в различных объектах. [c.132]

Общие способы обнаружения с помощью ферментов. Первый м е т о д В этом методе использована та же система растворителей, как в методе Кука (см. стр. 78), но для обнаружения соединений непосредственно на проявленной хроматограмме применялась обычная реакция холинэстераза — ацетилхолин. [c.81]

Неясна также роль холинэстеразы, обнаруживаемой вне синаптических образований выполняет ли она какую-нибудь специальную функцию, не связанную с передачей нервного импульса, или это просто транспортная форма АХЭ, обнаруженная по дороге к тем местам (синапсам), где она должна играть свою специфическую роль [c.200]

Фосдрин проявляет высокое ингибирующее холинэстеразу действие (I50 кровяной сыворотки при 2,3-10 М). В связи с этим для определенпя остатков инсектицида в растительных материалах используется энзиматический метод [6], пригодный для обнаружения остатков до 0,05 мг/кг. [c.70]

Оптимизация определений необратимых ингибиторов холинэстераз-достаточно сложный и трудоемкий процесс. Поэтому при вьшолнении анализа строго соблюдают последовательность операций по подбору фер-мергга, составу реакционной среды, концентрации субстрата и др Эго позволяет снизить пределы обнаружения ингибитора и повь сить то шость определений [c.291]

Определение обратимых ингибиторов холинэстераз менее распространено Тем не менее в настоящее время разработано множество тестов на основе холинэстераз для определения ионов тяжелых металлов и хлорорганических пестицидов [89,90], являющихся обратимыми ингибиторами Интерес представляет способ оценки общей токсичности водопроводной воды, основанный на суммарном эффекте снижения фермета-тивной активности холинэстеразы при введении в систему субстрат-фермент анализируемой пробы. Пределы обнаружения обратимых ингибиторов существенно зависят от природы ингибитора и субстрата. [c.291]

Образотание МЭ из кокаина [12] идет под действием холинэстера-аы, присутствующей в плазме крови, в печени и поджелудочной железе, ио ие найденной в моче человека. МЭ не накапливается в крови, а непрерывно выводится в мочу, где может быть обнаружен. БЭ образуется из кокаина в процессе химического гидролиза при физиологических значениях pH 7,4. МЭ превращается в экгонин по этому же механизму. В отличие от МЭ БЭ ие образуется и не деградирует под действием холинэстеразы плазмы. [c.86]

В указанном отчете приведено описание следующего случая. Сельскохозяйственный рабочий утром готовил раствор тиофоса, затем он весь день е помощью тракторного опрыскивателя обрабатывал растения. У этого человека был респиратор, резиновые перчатки, накидка и обычная рабочая одежда. Под вечер он был обнаружен в поле, он неподвижно сидел на тракторе, раскинув руки, респиратор был одет. Непосредственной причиной смерти явилась аспирация рвотных масс. Отравление тиофосом было установлено посмертным определением активности холинэстеразы. На брюках погибшего и манжетях перчаток был обнаружен тиофос. Очевидно, при приготовлении раствора он вылил на себя концентрированный препарат. Рабочий не знал о том, что тиофое проникает в организм через кожу и поэтому даже не пытался сменить загрязнб1шую одежду и помыться. [c.67]

В аналитических исследованиях в связи с иммобилизованными ферментами необходимо упомянуть ферментные электроды [21], ферментные термисторы [40] и ферменты, ковалентно связанные с полистиролом или найлоном для целей автоматического анализа [24, 46]. Гильбо [22], например, использовал ферментные электроды для определения глюкозы, мочевины, L-аминокислот, галактозы, ацетилхолина и дегидрогеназ. Ферхмеиты, связанные с капиллярными реакторами, использованы в соединении с автоанализатором фирмы Te hni on для анализа различных субстратов, таких как глюкоза, мочевина и мочевая кислота [55]. Гудзон и др. [20] описали применение иммобилизованной холинэстеразы для контроля воздуха и воды, для обнаружения ингибиторов фермента, таких, как пестициды. Система характеризуется чрезвычайной чувствительностью. Например, органофосфат параоксон может быть обнаружен в количествах 1 10 в воздухе и воде. [c.442]

Оказалось, что зависимость Кт от температуры отличается от зависимости, обнаруженной Уилсоном и Кэбибом [78], а также Шукудза [114] для ацетилхолинэстеразы, и определяется природой субстрата. В случае гидролиза ацетил-Р-метилхолина, Кт не зависит от температуры. Для ацетилхолина и бензоилхолина/Ст незначительно растет с температурой, в то время как при расщеплении наиболее специфического для холинэстеразы субстрата — бутирил- [c.177]

Предлагаемый метод, основанный на угнетении активности холинэстеразы под влиянием фолекса или бутифоса, позволяет определять до 2 мкг фолекса и 1 мкг бутифоса в пробе и может быть использован для обнаружения и количественного определения этих дефолиантов в растительном материале. [c.197]

Колориметрические методы определения тиохолина. Тиохолин образует с нитропруссидом натрия окрашенный продукт (Ямакс 520 нм). Другой фотометрический метод основан на измерении интенсивности желтого окрашивания, образующегося при реакции тиохолина с 5,5 -дитио-бис-(2-нитробензойной) кислотой (ДТНБ)58.59 Этот метод весьма прост и требует незначительной затраты времени. Гистохимическое обнаружение холинэстеразы основано на реакции с солью меди и сульфидом аммония, в результате которой образуется черный сульфид меди . [c.169]

Фотометрическое определение активности холинэстеразы 5 . Этот быстро осуществляемый микрометод основан на реакции тиохолина, образующегося при ферментативном расщепле-ции ацетилтиохолина 5,5 -дитио-бис-(2-нитробензойной) кислотой (ДТНБ). Механизм этой цветной реакции обнаружения тиола описан в р деле 5.1.1.9. [c.173]

Обнаружение фосфорорганических соединений, угнетающих холинэстеразу, удается осуществить с высокой чувствительностью при помощи модифицированных биохимических методов 2,201.202 из которых будет описан метод с применением в качестве субстрата индоксилацетата [c.208]

Следующие три важнейших метода индикации позволяют разделить все отравляющие вещества на четыре группы биохимическое обнаружение ингибиторов холинэстеразы, реакция с тимолфталеином, реакция Гутцейта. [c.264]

Характер их действия неизвестен, но едва ли связан с ингибированием холинэстеразы, хотя схожий с аце-тилхолинэстеразой животных фермент обнаружен и в растениях, и имеются некоторые доказательства того, что ацетилхолин участвует в процессах, связанных с фитохромом. [c.228]

Для обнаружения фосфорорганических пестицидов применяется множество реагентов. Грант и др. [96] привели таблицу чувствительности обнаружения 12 фосфорорганических соединений при обработке хроматограмм И различными обнаруживающими реагентами, а Уоттс [97] опубликовал обзор реагентов, применяемых для обнаружения соединений этого типа. Наибольщей чувствительностью отличается проба по подавлению активности холинэстеразы (Т-113) с помощью этой пробы можно идентифицировать весьма малые количества пестицидов— вплоть до 40-10- г. Содержащиеся в образце примеси мало влияют на результаты анализа. Однако надо следить, чтобы хроматограммы не были перегружены Кессиди и др. [98] нащли, что экстракты люцерны, которую не опрыскивали пестицидами, образовали зоны подавления, когда аликвотные доли были слишком велики. [c.165]

Некоторые карбаматы можно обнаружить по подавлению действия холинэстеразы (реактив Т-113). Гейке [ПО, 111] указал, что при использовании эстеразы бычьей печени пределы чувствительности обнаружения составляют 3—400 нг, а Мендоза и Шилдс [112] установили, что чувствительность пробы с эстеразой свиной печени еще выше от 0,1 до 100 нг. Эти же авторы нашли, что пары брома или УФ-облучение, как правило, ослабляют ингибирующее действие карбаматов, хотя в некоторых случаях наблюдается и обратный эффект, как, например, при воздействии паров брома на карбарил. [c.167]

Мендоза с сотр. [15] использовали эстеразы печени и 5-бро-миндоксилацетат для обнаружения органических фосфорсодержащих пестицидов, ингибирующих холинэстеразу, в результате чего на поверхности сорбента проявляются белые пятна на фоне интенсивно голубого цвета. [c.353]

Первые работы по аналитическому использованию иммобилизованных ферментов относятся к середине 60-х годов. В 1965 г. Дж. Гилболт включил холинэстеразу в крахмальный гель, который нанесли на полиуретановую пластинку и применили для обнаружения фосфорорганических инсектицидов в воздухе. Холинэстераза очень чувствительна к фосфорорганическим соединениям, легко ими ингибируется. После пропускания известного объема анализируемого воздуха через ферментный датчик измеряют остаточную активность холинэстеразы. Зная исходную активность фермента Ло и активность после контакта с ингиби- [c.87]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология