Ферментативные белки, аминокислотный состав

В настоящее время еще нельзя распространить эти представления на все ферменты, так как аминокислотный состав известен только для нескольких ферментов. Мы не можем поэтому дать удовлетворительное объяснение причин ферментативной активности белков и должны ограничиться высказанным выше предположением о том, что большое количество полярных групп в белковой молекуле обусловливает жесткость структуры и возникновение значительных сил притяжения на поверхности молекулы фермента. [c.307]

В. А. Энгельгардт в 1939 г. доказал ферментативную активность мышечного белка миозина. В настоящее время многие ферменты выделены в кристаллическом виде, а в некоторых из них расшифрован и аминокислотный состав. Так, фермент пепсин содержит 51 аминокислотный остаток в составе двух полипептидных цепочек, одна из которых включает 30 аминокислотных остатков, вторая— 21. Молекула рибонуклеазы представляет длинную полипептидную цепь из 124 аминокислотных остатков. [c.5]

Затем вы получили серию мутантов этого гена, которые утратили ферментативную активность белкового продукта, и определили аминокислотный состав мутантного белка для каждого из мутантов. [c.55]

Применительно к белкам с более высоким молекулярным весом существующие методы не позволяют полностью установить последовательность аминокислотных остатков, но делаются попытки свести проблему к выяснению природы активного центра молекулы. Например, папаин, содержащий 178 аминокислотных остатков, удается подвергнуть ферментативному расщеплению и удалить /з аминокислотных остатков при полном сохранении ферментной активности (в расчете на 1 моль) [148]. Установлено, что ферментная активность связана с сульфгидрильной группой, входящей в состав активного центра. Трипсин и химотрипсин приобретают ферментную активность при разрыве лишь одной пептидной связи в исходных неактивных молекулах [224, 225, 257]. [c.164]

Биологическая ценность белков пищи. Белки пищи в процессе пищеварения подвергаются гидролизу и распадаются на 20 разных аминокислот, которые поступают в кровь, доставляются в ткани, где используются для создания новых индивидуальных белков организма человека или в других процессах. В состав белков входят 8 незаменимых аминокислот, в которых организм очень нуждается, так как не может их синтезировать (см. главу 12). Биологическая ценность белка пищи определяется двумя параметрами аминокислотным составом и усвояемостью белка. Если в белке пищи имеются все незаменимые аминокислоты, т. е. он полноценный, и легко подвергается ферментативному гидролизу в кишечнике, то биологическая ценность такого белка является максимальной. Высокую биологическую ценность имеют белки животного происхождения — яйца, мясо, рыба, у которых биологическая ценность принята за 100 единиц, тогда как белки продуктов растительного происхождения — картофеля, кукурузы, белого хлеба и овощей — имеют более низкую биологическую ценность 67, 36, 30 единиц соответственно. В них отсутствует несколько незаменимых аминокислот, особенно таких как триптофан и лизин. [c.454]

Почти все ферментативные реакции являются кислотно-основными процессами. Во многих ферментах, некоторые из которых рассматриваются в гл. V и VI, не обнаружены простетические группы, а в состав их активных центров входят только основные или кислотные группы аминокислотных остатков полипептидных цепей белка. Из набора заместителей белковых аминокислот в изученных ферментах наибольшее значение имеет имидазольная группа гистидина, карбоксильные группы аспарагиновой и глютаминовой кислот и 5Н-группа цистеина. [c.27]

По данным исследований Шеффнера и соавторов [60], аминокислотный состав пепсинового гидролизата способен выявить различия между белками, которые не проявляются ни при анализе общего содержания незаменимых аминокислот, ни при анализе, проводимом после полного ферментативного гидролиза. Это наблюдение использовано для определения ППО (показатель пепсинового переваривания остатка). [c.576]

Все это показывает, как широко используется ультрацентрифугирование при изучении нуклеиновых кислот и биосинтеза белка. Ультрацентрифугирование незаменимо также при все более расширяющемся изучении смежных проблем — в частности при изучении механизмов регуляции ферментативных реакций. Метаболические потребности клетки удовлетворяются, как известно, благодаря тонкой согласованности скоростей различных биохимических последовательностей. Такая согласованность возможна благодаря чувствительности аллостерических ферментов к изменениям концентраций отдельных метаболитов, что в свою очередь зависит от конформационных изменений, вызываемых соответствующим метаболитом и, очевидно, передающихся путем взаимодействия субъединиц ферментного белка. Успехи, достигнутые в изучении свойств аллостериче-ского фермента — аспартат-карбамоилтрансферазы, хорошо иллюстрируют большое значение ультрацентрифугирования — особенно когда оно используется в сочетании с другими методами анализа. Так, Герхарт и Шахман [5] показали, что этот фермент, представляющий собой глобулярный белок с молекулярной массой около 3-10 , после обработки соединениями ртути распадается на субъединицы двух типов. Каталитической активностью обладают лишь субъединицы одного типа, в субъединицах же другого типа, не обладающих каталитической активностью, находится центр по которому происходит присоединение цитидинтрифосфата. С этой регуляторной субъединицей связывается 5-бромцитидин-трифосфат, о чем свидетельствует соответствующая картина седиментации. Позже Вебер [6] определил аминокислотный состав и Ы-концевые остатки субъединиц обоих типов и установил, что одна молекула фермента содержит четыре регуляторных и четыре каталитических субъединицы. [c.9]

Последовательность оснований длиной 6 — 8 нуклеотидов, расположенная непосредственно перед инициирующим кодоном АУГ у Е. соИ, определяет эффективность процесса трансляции. Эта последовательность представляет собой участок связывания мРНК с рибосомой, и его сдвиг в ту или иную сторону способен уменьшать эффективность трансляции мРНК. По имени исследователей, идентифицировавших этот участок, он был назван последовательностью Шайн-Дальгарно. Обычно эту последовательность включают в состав самого вектора вместе с инициирующим кодоном на нужном расстоянии. При экспрессии векторов такого типа образуется гибридный белок, в котором несколько N-концевых аминокислотных остатков происходят от источника регуляторных элементов и инициирующего кодона прокариотического гена. Такие гибридные белки часто более стабильны обработка их химическим или ферментативным способом приводит к вьщелению эукариотической части белка. [c.123]

Осуществленный таким способом гидролиз пептидньк связей-это необходимый шаг в определении аминокислотного состава белков и последовательности составляющих их аминокислотных остатков. Пептидные связи могут быть гидро-лизованы также под действием некоторых ферментов, таких, как трипсин и химотрипсин, представляющие собой протеолитические (белок-расщепляю-щие) ферменты, секретируемые в кишечник и способствующие перевариванию, т. е. гидролитическому расщеплению, белков, входящих в состав пищи. Если кипячение пептидов с кислотой или щелочью приводит к гидролизу всех пептидных связей независимо от природы и последовательности соединенных при их помощи аминокислотных звеньев, то трипсин и химотрипсин осуществляют каталитическое расщепление пептидов избирательным образом. Трипсин гидролизует только те пептидные связи, в образовании которьсс участвуют карбоксильные группы лизина или аргинина. Химотрипсин же атакует только те пептидные связи, которые были образованы с участием карбоксильных групп фенилаланина, триптофана и тирозина. Как мы увидим дальше, такой избирательный ферментативный гидролиз оказьшается очень полезным при анализе аминокислотных последовательностей белков и пептидов. [c.130]

Замена до 30—40% урацила на 5-фторурацил в составе РНК Е. oli достигается тем, что мутант Ura (ауксотроф по урацилу) выращивается на среде, содержащей 5-фторурацил. При этом возникают заметные изменения в белках, синтезируемых клеткой, как в аминокислотном составе белков, так и в их физико-химических и ферментативных свойствах. Другое необычное основание, которое способно входить в состав РНК — азагуанин, заменяющий гуанин [c.250]

В истинных металлоферментах металл прочно связан с белковой частью фермента (апоферментом). При диализе раствора истинного метал-лофермента обычно не происходит отделения металла от белка и пе обнаруживается снижения ферментативной активности. В металлоферментах металл либо входит в состав простетической группы фермента (например, в гемопротеидах, хлорофилле, кобаламине), либо образует хелатные комплексы с функциональными группами аминокислотных остатков белка (алкогольдегидрогеназа, сукцинатдегидрогеназа, а-амилаза и др.). В образовании таких комплексов участвуют сульфгидрильные группы цистеина, имидазольная группа гистидина, а также гидроксильные группы серина, карбоксильные, аминные и др. Металлы, как правило, связывают функциональные группы фермента, отдаленные от активного центра. [c.244]

Известно, что активность почти всех ферментов чувствительна к денатурации, т. е. к изменению третичной структуры. Следовательно, для сохранения ферментативной функции должна остаться неповрежденной значительно большая часть молекулы по сравнению с той, которая находится в непосредственном контакте с субстратом. В простых ферментах (пепсине, трипсине, химо-тр. шсине, уреазе, папаине и др.) активный центр образуется определенной группировкой аминокислотных остатков в спиральной цепи белковой молекулы. В сложных ферментах, состоящих из белка и небелкового компонента, в состав которого входят, например, нуклеопгды, гемины, атомы металлов и др., активный центр образуется главным образом небелковым компонентом и некоторыми прилегающими к нему аминокислотными остатка.ми. [c.138]

Изучение белков начинают с выделения и очистки единственного лишенного основной группы пептида, который получают в результате ферментативного расщепления ацилированного белка непсином, химотрипсином или термолизином (но не трипсином) — см. фиг. 9. Из всех пептидов только этот концевой пептид не садится на колонку дауэкс-50 при кислых значениях pH (см. ниже). Его состав, включая и природу концевой ацильной группы, определяют, сочетая аминокислотный анализ, гидразинолиз и фтординитробензольный метод. [c.69]