Фосфатаза неспецифическая кислая

Неспецифические щелочные фосфатазы Неспецифические кислые фосфатазы [c.635]

Определяют зависимость скорости фосфатазного расщепления при pH 5,0 от времени инкубации. Исследуют скорость фосфатазного расщепления глюкозо-6-фосфата при разных значениях водородного показателя и находят оптимум pH для неспецифической кислой фосфатазы, инкубируя пробы в течение 10 мин. [c.65]

Облучение животных ионизирующей радиацией вызывает не только изменения активности многих ферментов, регулирующих процессы клеточного метаболизма, но и относительного содержания изоферментов. Так, в ряде работ показано, что у-облучение влияет на активность изоферментов лактатдегидрогеназы, кислой фосфатазы, неспецифической эстеразы. Причем при более низких дозах облучения величина изменений в относительном содержании изоформ может быть больше, чем при высоких. При анализе относительного содержания фракций изоферментов вышеуказанных белков в различные сроки после у-облучения в дозе [c.147]

З.1.2. НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ КИСЛАЯ ФОСФАТАЗА (КФ 3.1.3.2) [c.180]

Биохимические и электронно-микроскопические исследования показали, что неспецифическая кислая фосфатаза, так же как и другие кислые гидролазы, локализуется главным образом в лизосомах. Поэтому она считается маркерным ферментом для лизосом (табл. 37). Поскольку лизосомы связаны своим происхождением с комплексе Гольджи, то, как и следовало ожидать, активность этого фермента выявляется также на внутренней мембране этого комплекса и цистерн гладкого эндоплазматического ретикулума. [c.181]

Применение. В качестве диазосоставляющей для выявления ЗН-групп в белках, кислой 1.1] и щелочной фосфатаз и неспецифических эстераз, [2, 3] методом одновременного азосочетания [8, 9].. [c.116]

По аналогии с известными гистидин-сериновыми ферментами кислотно-основных процессов обычно предполагают, что в неспецифических фосфатазах при образовании промежуточного продукта осуществляется фосфорилирование фермента по серину с участием гистидина, действующего по механизму обобщенного основного катализа, что и объясняет отщепление фосфорильной, а не фосфатной группы. Для фосфатаз, имеющих оптимум pH в щелочной области (щелочная фосфатаза), необходимы соответствующие количества ионов двухвалентных металлов в качестве кофакторов для компенсации зарядов на фосфатной группировке и облегчения нуклеофильной атаки гидроксильной группой серина на фосфор, катализируемое основанием (гистидином). Для кислой же фосфатазы, имеющей оптимум pH в районе пяти добавления ионов двухвалентных металлов не требуется, поскольку фосфорные эфиры при этих значениях pH существуют в моно-анионной форме, а следовательно, нуклеофильная атака на фосфор не затруднена. [c.172]

По вопросу о выявлении кислой фосфатазы в клеточном ядре особенно с помощью методов с солями металлов ведется живая полемика. Несомненно, что концентрация ионов свинца, используемого в качестве осаждающего реагента, в значительной мере влияет на результаты реакции. Неспецифическое осаждение ионов свинца часто бывает следствием неправильного подбора концентрации ионов свинца в инкубационной среде. В связи с выявлением кислой фосфатазы в клеточном ядре следует отметить данные, предполагающие здесь наличие особого типа фосфатазы, отличающегося от кислой фосфатазы цитоплазмы. [c.181]

Отмечена определенная связь между липофусцином (в частности, его образованием) и лизосомами важную роль при этом играют кислые гидролазы—например, кислая фосфатаза и неспецифическая эстераза (рис. 6). Липофусцин, меланин и гемосидерин накапливаются в остаточных тельцах и вместе с ними идентифицируются. [c.248]

Несмотря на эти трудности, имеющиеся надежные данные позволяют с уверенностью сделать несколько общих выводов о потребности в ионах металлов. Двухзарядные ионы необходимы для всех киназ и синтетаз. Фосфатазы обычно также нуждаются в катионах, хотя известны и исключения, например неспецифическая кислая фосфатаза. Для фосфоглюкомутазы ион Mg + необходим, а для похожей на нее фосфоглицератмутазы нет [24]. Потребность в двухзарядном катионе характерна для нуклеаз механизм действия которых не включает образование на первой стадии циклического нуклеотида [25]. Фосфорилазы, расщепляющие связь С—О, не зависят от двухзарядных ионов, а расщепляющие связь Р—О зависят, примером чему служит фосфоролиз полинуклеотидов. Кроме того, ионы двухвалентных металлов обычно, но не всегда необходимы для ферментов, переносящих фосфат в том случае, если катализируется расщепление связи Р—О. Эти выводы суммированы в табл. 17.2. [c.635]

Кроме того, эти авторы обнаружили изменения в количестве или активности некоторых печеночных ферментов. Количественных определений не производилось сдвиги регистрировались по интенсивности специфических гистохимических цветных реакций на эти ферменты, с помощью обычных методов связывания азокрасителей. Активности кислой фосфатазы, неспецифической эстера-зы и сукциндегидразы в паренхиматозных клетках печени были значительно снижены, тогда как щелочная фос-фатаза в купферовских и тучных клетках была повышена. [c.525]

Неспецифические кислые фосфатазы гидролизуют фосфомоноэфиры при pH 3,8—6,0. Электрофоретические и хроматографические исследования позволили описать группу кислых фосфомоноэстераз с характерной, хотя иногда и перекрывающейся, субстратной специфичностью. Эти группы принято обозначать римскими цифрами П, 1П и IV. В тканях животных встречается главным образом кислая фосфомоноэстераза II с рН-оптимумом 5,0—5,3. У простейших была описана, кроме того, кислая фосфатаза с рН-оптимумом 3,0—4,0, Мультиферментный характер [c.180]

Для гистохимического выявления неспецифической кислой фосфатазы на светомикроскопическом уровне используются в первую очередь методы с солями свинца, ос- [c.181]

В отношении дальнейшей судьбы мононуклеотидов в кишечнике существует два предположения. Во-первых, мононуклеотиды расщепляются под действием неспецифических фосфатаз (кислой и щелочной), которые гидролизуют фосфоэфирную связь ( нуклеотидазное действие) с образованием нуклеозидов и фосфорной кислоты, и в таком виде всасываются. Второе предположение заключается в том, что мононуклеотиды всасываются и распад их осуществляется в клетках слизистой оболочки кишечника. Имеются также доказательства существования в стенке кишечника нуклеотидаз, катализирующих гидролитический распад мононуклеотидов. Дальнейший распад образовавшихся нуклеозидов осуществляется внутри клеток слизистой преимущественно фосфорилитическим, а не гидролитическим путем. [c.424]

Применение, В качестве диазосоставляющей для выявления SH-rpynn в белках [Пирс, 727], кислой фосфатазы [1, 2], неспецифических эстераз [3], 1М-ацетил- 5-глюкозаминидазы [4] и лейцинаминопептидазы [5, 6] методом одновременного азосочетания. [c.115]

Применение. В гистохимии ферментов в качестве диазосоставляющей дая выявления неспецифической эстеразы, щелочной и кислой фосфатазы [Пи с, 393—394J, р-галактозидазы [Пирс, 447], р-глюкуронидазы [Пирс, 829], ле -цинаминопептидазы [Пирс, 521], арилсульфатазы [Пирс, 527, 848], а также дЛя выявления SH-rpynn и проведения фенилгидразин-формазановой реакция а альдегиды [Пирс, 791]. В бумажной хроматографии для окраски флавонов, аминов и фенолов [14]. [c.119]

Применение. В гистохимии в смеси с формалином для фиксации фосфолипидов по Merojiy Бэкера [1], для стабилизации кислой фосфатазы [2, 3] и для выявления норадреналина методом флуоресценции [4, 5]. В гистохимии ферментов для выявления неспецифических фосфомоноэстераз по Гомори Така-матчу [6—9] и аденозинтрифосфатазы по методу Падикула —Германа [10], [c.174]

Ферменты, которые катализируют гидролиз /производных фосфата, называются фосфатазами [5]. Существует несколько ферментов, роль которых, по-видимому, заключается в образовании ортофосфата из моноэфиров фосфорной кислоты. Они малочувствительны к природе заместителя в фосфате и называются неспецифическими фосфомоноэстеразами. Существуют, однако, заметные различия в диапазонах pH, в которых они работают, и поэтому они делятся на кислые [19] и щелочные [20] фосфатазы, хотя бывают и промежуточные случаи. Другие фосфатазы действуют на определенные субстраты, такие, как глюкозо-б-фосфат [21], фосфосерин [21] и 5 -нуклеотиды [22]. Важным ферментом является неорганическая пирофосфатаза [23], поскольку гидролиз пирофосфата сопряжен со всеми синтетазными реакциями. Некоторые киназы обнаруживают небольщую АТФ-азную активность. Активную АТФ-азу можно выделить из разрущенных митохондрий [9], и она без сомнения участвует в окислительном фосфорилировании, посредством которого обращается гидролитическая реакция. [c.633]

Широко распространены фосфатазы, катализирующие гидролиз сложных эфиров, состоящих из спиртов и фосфорной кислоты. Среди фосфатаз различают специфически и неспецифически действующие. Специфически действующие фосфатазы катализируют гидролитическое расщепление определенных фосфорных эфиров. Например, фруктозодифосфатаза катализирует отщепление фосфорной кислоты от фруктозодифосфорной кислоты, нуклеотидаза — фосфорной кислоты от нуклеотидов. Неспецифически действующие фосфатазы катализируют отщепление фосфорной кислоты от различных фос([)орных эфиров независимо от химической природы входящих в их состав спиртов. Неспецифические фосфатазы разделяются на так называемые кислые и щелочные . Оптимум действия первых — при pH 4,5— 5,0, вторых — при pH 8,5—9,0. [c.180]

Активность неспецифическ ой кислой фосфатазы проявляется выпадение осадка светло-красного красителя. [c.225]

Для оценки кислороднезависимых механизмов внутриклеточной микробицидности моноцитов используется метод определения содержания лизосом в цитоплазме моноцитов. Содержание лизосом в моноцитах оценивают с помощью их прижизненной окраски люминесцентным красителем — акридиновым оранжевым, который избирательно накапливается в лизосомах, окрашивая их в ярко-красный цвет. С помощью люминесцентной микроскопии окрашенных препаратов оценивают суммарный индекс люминесценции моноцитов, который отражает содержание лизосом в их цитоплазме. Другие варианты оценки содержания лизосом связаны с цитохимическим определением активности внутриклеточных ферментов кислой фосфатазы или неспецифической эстеразы. [c.218]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология