Ферментативные перекисные окисления

Ферментативные перекисные окисления [c.295]

Эти перекисные окисления приводят к образованию смеси изомеров, тогда как ферментативные реакции в принципе являются стереоспецифическими. [c.296]

Метод замораживания и хранения изолированных митохондрий. Митохондрии — четко выраженная мембранная структура с весьма тонкой архитектоникой, содержащая системы дыхания и окислительного фосфорилирования. Митохондрии нельзя хранить в изолированном состоянии при комнатной температуре, так как они быстро разрушаются. При температурах порядка О—4°С митохондрии в средах выделения можно сохранять не более 1—2 ч, так как они подвергаются ишемии и гибнут в результате быстрого развития процессов перекисного окисления липидов и денатурации ферментативных комплексов, регулирующих окислительное фосфорилирование. Замораживать митохондрии можно под защитой криопротекторов — диметилсульфоксида (ДМСО) или полиэтиленоксида (ПЭО). Для этого свежую печень крыс измельчают ножницами в холодной стандартной среде выделения и навеску заливают 9-кратным объемом этой среды. После измельчения в гомогенизаторе типа стекло — тефлон в течение 30—40 с гомогенат центрифугируют при 600 об/мин в течение 10 мин, надосадочную жидкость — при 6000 об/мин в течение 15 мин. Митохондрии, находящиеся в осадке, суспендируют в 2 мл сре- [c.74]

Какую роль ферментативное и неферментативное перекисное окисление липидов играет в патологии биологических мембран [c.200]

Полученные в настоящем исследовании результаты, как нам кажется, говорят против предположений, что в липидах облученных живых тканей возникают длительно идущие, разветвленные реакции окисления, не зависимые от обмена и приводящие к накоплению перекисей. Мы видим, что перекиси не образуются в облученном семени, пока не начнутся интенсивные процессы обмена. Мы видим, что они не найдены ни в эндосперме, ни в зародыше их образование происходит только в той ткани (щитке), которая богата окислительными ферментными системами, упорядоченно расположенными в микроструктурах (митохондрии). Как отмечалось одним из авторов [7], под влиянием радиации в первую очередь страдают координированные ферментативные процессы, сосредоточенные в микроструктуре клетки, отражением чего, по-ви-димому, и является найденное повышение перекисных соединений. [c.39]

Перекисные радикалы осуществляют окисление аминокислотных остатков (в первую очередь 5Н-содержащих гистидина, триптофана и др.) мембранных белков, в том числе остатков, локализованных в активном центре ферментов, что приводит к утрате ферментативной активности. [c.193]

С процессом обновления мембран, по-видимому, связана и интенсификация ферментативного липопереокисления, зарегистрированная в микросомах печени крыс в ходе постнатального развития. При этом максимум ферментативного перекисного окисления приходится на период максимального роста животных (2 месяца — пубертатный период). [c.192]

Ингибитор цитохрома Р-450 8КР-525А не вносит существенных изменений в форму этой зависимости, что еще раз подтверждает связь остаточного дыхания в данном конкретном случае с иными кислородзависимыми процессами, нежели монооксигеназные реакции, имеющими более высокую Ям (О). Поэтому субстрат микросомального окисления — амидопирин, активирующий эти реакции и увеличивающий тем самым вклад процессов с относительно низкой Ям (О), существенно ве меняя общего количества кислорода, потребляемого клетками, приводит к появлению изгиба или увеличению нелинейности зависимости Уд/рОг на фоне увеличения ЦРД (рис. 13). В присутствии 8КР-525А действие амидопирина, как и следовало ожидать, не проявляется (рис. 13). В противоположность этому, активация реакций, имеющих высокие значения Ям (О) (например, ферментативного перекисного окисления), приводит к переходу от гиперболического типа зависимости Уд/рОг к линейному (рис. 14). [c.46]

Гибелыклетки не связана с повреждением уникальных мишеней энергией ионизирующей радиации, а происходит в результате дисперсного поражения, которое может развиваться за счет физико-химических механизмов усиления. Например, во множественных участках мембран излучение инициирует цепи перекисного окисления липидов. Развитие окислительных процессов принимает автокаталитический характер, происходит массовая деградация мембран и связанных с ней ферментативных ансамблей, нарушается ионный гомеостаз клетки, накапливаются токсические продукты, высвобождаются ферменты из мест специфической локализации и т. д. Такой механизм не исключает наличия в клетке уникальных мишеней, поражение которых имеет ведущее значение для жизнедеятельности, однако в отличие от первых двух гипотез предполагается не прямое, а опосредованное поражение этих критических структур. В этом случае вероятностный характер инактивации клеток объясняется вероятностью зарождения соответствующих физико-химических процессов усиления. Сигмоидальный характер кривых доза — эффект может соответствовать необходимости какого-то критического числа событий абсорбции энергии клеткой для развития физико-химических процессов усиления. Неодинаковую радиочувствительность различных типов клеток можно связать с генетически детерминированными особенностями строения, облегчающими или затрудняющими развитие физикохимических процессов усиления начального поражения, например неодинаковым уровнем естественных ингибиторов и активаторов перекисного окисления липидов биологических мембран. Повысить или понизить радиочувствительность клеток могли бы такие агенты, которые способны модифицировать развитие первичных физико-химических реакций. [c.134]

Исследуя возможности непрямого действия радиации через водные радикалы, радиобиологи еще не уделяли внимания важнейшей для жизнедеятельности клетки липидной фазе и системам, связанны.м с ней. В середине 50-х гг. был достигнут значительный прогресс в понимании структурной организации и биологической роли субклеточных мембранных структур. В этот и последующий периоды накапливается обширный экспериментальный материал о роли липидов мембран в функционировании липопротеидных ферментативных комплексов, в функциональной активности субклеточных структур. Появились первые работы, посвященные физико-химическим процессам в липидной фазе облученных клеток, липидным радиотоксинам, начались исследования механизмов перекисного окисления липидов под действием ионизирующей радиации. Так, в 1954 г. Б. Н. Тарусов сделал предположение о решающей роли цепных окислительных реакций в развитии пусковых процессов лучевого поражения. Это предположение было обосновано анализом кинетических закономерностей развития лучевого поражения при низких и средних летальных дозах и сравнением их с критерием цепных реакций. Инициирование цепей в результате распада молекул на радикалы осуществляется неодинаково для различных молекул и систем. И. Н. Семенов (1958) придавал большое значение наличию в сложных гетерогенных системах веществ ( примесей ), облегчающих развитие цепных реакций. Такие вещества легко образуют свободные атомы и радикалы. Например, радикалы перекисей являются наиболее универсальными инициаторами цепей. Анализируя реакционную способность различных субстратов и развивающихся цепных реакций, Б. Н. Тарусов и др. (1957— 1966), Н. М. Эмануэль и др. (1958—1976) установили, что наиболее вероятной для развития первичных лучевых процессов является реакция окисления липидов — структурных элементов клеточных мембран. О важнейшей роли окисления биосубстратов в пусковых химических процессах лучевого поражения свидетельствуют также работы А. М. Кузина (1962—1973). В развива- [c.226]

Фосфолипиды в нативных мембранных системах эффективно защищены от неферментативного перекисного окисления наличием в биомембранах антиоксидантов, структурной организацией мембран, а также специальными ферментативными системами, регулирующими концентрации в мембране активных форм кислорода, ингибирующими развитие липопереокисления (подробнее об этих системах смотрите в следующем разделе). [c.187]

Антирадикальная активность флавоноидов в условиях ферментативного окисления микросомальных липидов. Одним из наиболее распространенных биологических объектов при исследовании антиокислительных свойств природных и синтетических химических соединений являются мембраны эндоплазматического ретикулума клеток печени (микросомальная фракция) [5, 109—111]. В настоящее время известны два механизма вовлечения микросомальных ферментов в процессы инициирования перекисного окисления липидов. Один из них реализуется на уровне НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы и, по-видимому, включает перенос электронов от НАДФН к комплексу, способному внедрять активированный кислород в молекулы полиненасыщенных жирных кислот и разрушать образующиеся гидропероксиды [c.116]

Для определения реакций ПОЛ использовали ферментативную и неферментативную системы перекисного окисления (Константинов и др., 1989). Определение диеновых коньюгатов (продуктов ПОЛ) проводили по модифицированному методу Стальной (Стальная, 1977). При изучении влияния функционировании различных комплексов дыхательной цепи на ПОЛ в митохондриях использовали те же субстраты цикла трикарбоновых кислот, что и при изучении их функциональной активности. [c.11]

При изучении влияния БХШ 310 на процессы ПОЛ в митохондриях озимой пшеницы полученные данные свидетельствуют, что добавление экзогенного БХШ 310 к митохондриям вызывает значительную индукцию перекисного окисления в условиях искусственно вызванного окислительного стресса (активации ферментативного и неферментативного ПОЛ). В то же время необходимо отметить, что стрессовый белок БХШ 310 не оказывал индуцирующего влияния на ПОЛ в неактивных митохондриях и в модельном эксперименте с индукцией ПОЛ в эмульсии лино левой кислоты, что позволяет предположить, что этот белок оказывает влияние на ПОЛ путем регулирования энергетической активности митохондрий. Полученные в ходе экспериментов результаты позволяют предположить, что БХШ 310 обладает апоптической активностью, и что одна из функций БХШ 310 состоит, возможно, в разборке определенной части митохондрий, наиболее пострадавших от действия [c.87]

В разд. 1.6.1.2 шла речь о каскаде арахидоновой кислоты. Метаболиты ее эйкозаноиды — имеют значительно большее распространение и значение, чем это следует из указанного раздела. Дело в том, что существуют и другие ветви каскада, которые ведут к биосинтезу важнейших регуляторов жизнедеятельности теплокровных животных простагландинов, тромбокса-нов и простациклина. Основные этапы их образования из арахидоновой кислоты показаны на схеме 7. Как видно из этой схемы, путем ферментативного окисления арахидоната кислородом образуется дигидроперекись 1.138, которая в результате свободнорадикальной реакции превращается в так называемую эндоперекись 1.139. Дальнейший метаболизм эндоперекиси идет по трем направлениям. Превращение перекисной функциональной группы в спиртовую ведет к веществу 1.140, называемому простагландином Н2. Циклизация боковой цепи дает простациклин 1.141, а расщепление циклопентанового никла — тромбоксан 1.142. [c.47]

В результате нормально протекающих ферментативных процессов в живой ткани интенсивно идут процессы окисления, в ряде случаев приводящие к появлению перекисных соединений. Особенно это характерно для растений. Как отмечалось ранее [5, 20, 21], под влиянием радиации происходят глубокие изменения в митохондриях, где сосредоточены основные ферментные системы, регулирующие ход и направленность окислительных процессов. Следовательно, можно ожидать, что сопряженность окислительных процессов в облученной ткани под влиянием облучения будет нарушаться, окислительные процессы будут извращены, и количество перекисей, образуемых в норме, вследствие этого резко изменится. Подобные процессы были обнаружены нами совместно с Березиной, Бронокой и Языковой [22]. [c.7]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология