Оптимизация разделения

При работе в градиентном режиме желательно, чтобы к концу разделения ионная сила буферного раствора повышалась. Начинают работать с концентрации буферного раствора 0,1 М, так как оптимизация разделения при работе с низкими концентрациями (0,001 М) отнимает много времени. Если при этих условиях вещества не удается удовлетворительно разделить, то дальнейшее улучшение разделения происходит за счет снижения концентрации буферного раствора, изменения pH или температуры шаговым методом, приводящих к повышению значений к и увеличению времени удерживания. [c.39]

На выбранных таким образом колонках выполняют пробный анализ и при необходимости вносят изменения в систему колонок для оптимизации разделения. Оптимизацию приходится проводить, если колонки не обеспечивают требуемого диапазона разделения или эффективности разделения. [c.44]

При анализе многокомпонентных смесей, содержащих соединения различной химической природы, часто наблюдается перекрывание некоторых тиков. Наилучшим способом оптимизации разделения в этом случае является изменение селективности подвижной фазы при той же самой элюирующей силе. [c.131]

Оптимизация разделения в немодифицированных капиллярах [c.66]

Поэтому дальнейшая оптимизация в сторону более кислых значений pH удается только с одновременным разбавлением разделяющего буфера, которое вызывает уменьшение интенсивности пика. Кроме того, работа в очень кислой области ( pH 2.3) приводит к уменьшению селективности. Этот способ оптимизации разделения стандартных белков показан на рис. 58. [c.67]

Оптимизация разделения на силикагеле [c.295]

Оптимизация разделения в режиме ион- [251] парной хроматографии Обзор, 22 ссылки 160 [c.297]

В то время как амины и аминокислоты, несущие положительный заряд, более прочно удерживаются при более высоких значениях pH, для отрицательно заряженных сорбатов справедливо обратное. Систематические исследования, проведенные на серии N-бензоил-о, L-аминокислот, позволили глубже понять механизм взаимодействия сорбата с белком. Влияние изменения свойств подвижной фазы на величины к VI а демонстрирует рис. 7.10. Во-первых, удерживание в значительной степени возрастает с усилением гидрофобного характера аминокислоты (Ser > А1а> Phe). Во-вторых, увеличение суммарного отрицательного заряда белка с увеличением pH вызывает уменьшение к для всех шести соединений (вследствие ионного взаимодействия). Далее, влияние концентрации буфера можно объяснить усилением адсорбции вследствие ионных взаимодействий при низкой ионной силе. Небольшое, но вполне заметное возрастание к для наиболее сильно удерживаемых сорбатов при высоких концентрациях буфера вероятнее всего является результатом усиления гидрофобных взаимодействий. Поскольку ионные (кулоновские) и гидрофобные взаимодействия по-разному подвержены влиянию ионной силы, то оба эффекта приводят к возникновению минимума в адсорбции сорбата (к ) в определенной точке. И наконец, совершенно очевидно влияние органического растворителя-модификатора он всегда приводит к понижению удерживания сорбата и тем сильнее, чем более гидрофобен сорбат. Влияние pH и ионной силы на удерживание незаряженных соединений невелико, но выражено вполне отчетливо. Оно связано исключительно с изменениями в связывающем центре ХНФ. Добавление пропанола-1 вызывает уменьшение удерживания по сравнению с наблюдаемым у заряженных сорбатов, что свидетельствует о преимущественном вкладе в удерживание гидрофобных взаимодействий. Это подтверждает также наблюдаемое очень большое влияние на удерживание длины цепи алканола-1. Высшие спирты являются значительно более эффективными конкурентами за связывающий центр, а потому вызывают более быстрое элюирование сорбата. Возможность регулирования удерживания путем изменения подвижной фазы, которую демонстрирует схема 7.6, говорит о том, что эту особенность данных хроматографических систем можно использовать в целях оптимизации разделения. [c.135]

На этих колонках могут быть достигнуты очень большие значения а, которые, впрочем, не слишком нужны в практической работе [91, 92]. Однако провести оптимизацию разделения и получить приемлемое время анализа несложно (рис. 7.11). [c.135]

Схема 7.6. Оптимизация разделения оптических изомеров путем систематического изменения состава подвижной фазы [227] (с разрешения изд-ва). [c.136]

Общие сведения. Как было показано выше, разделение ряда обнаруживаемых вешеств считается оптимизированным, если хроматографические условия подобраны так, что значение Rr оказывается равным 0.3 (всегда при условии обеспечения оптимальной системы). Если присутствуют и другие вещества, с иной полярностью", попадающие в различные зоны разделяющего участка, оптимизация разделения с обеспечением Rr 0.3 всегда сопровождается "принесение.м в жертву" этих веществ (если только их обнаружение не проводится на иной пластинке с [c.230]

НИКОМ селективности растворителей для оптимизации разделений в тонкослойной хроматографии под давлением. Метод подбора условий с помощью треугольника требует однородности распределения подвижной фазы по всему разделяющему слою, а подобной равномерности не обнаруживается, поскольку отмечается расслоение подвижной фазы. Соответствующие треугольнику условия могут удовлетворяться только на участке, находящемся ниже наиболее отставшей зоны, возникшей из-за разложения. [c.273]

Если нет возможности использовать специальные ТСХ камеры, то следует отдать предпочтение так называемым высушенным на воздухе пластинкам. Результаты разделения на этих слоях воспроизводятся значительно лучше, чем на пластинах, хранящихся в атмосфере с контролируемой влажностью. Чувствительные к содержанию влаги в окружающем воздухе разделения могут быть с успехом воспроизведены в помещениях с хорошим кондиционированием. Эти разделения не обязательно будут оптимальными, поскольку вряд ли оправдано говорить об "оптимальной" влажности или активности. Оптимальные условия разделения меняются от образца к образцу. Оптимизация разделения с помощью кондиционеров практически не применяется. [c.339]

Оптимизация разделения путем изменения состава ПФ — одна из самых трудных и еще нерешенных проблем жидкостной хроматографии. Здесь возможны различные подходы. Можно дать следующие рекомендации по выбору состава ПФ. [c.469]

Алкалоиды (8) (19) (6) Обзор, 16 ссылок до 1975 г. Условия ион-парной хроматографии в присутствии гидрофобных катионов и анионов Оптимизация разделения на силикагеле Использование органических модификаторов при ионообменной хроматографии на окиси алюминия [51] [415] 151 272 [c.295]

Проек1ному расчёту посвящено весьма ограниченное число работ [112,7.,]0,115], где успешно решаются задачи оптимизации разделения мно-гокомпонентш,[х смесей. [c.10]

Разделение заряженных молекул с относительно большими гидрофобными остатками можно улучшить добавлением ДЦСН возможности оптимизации разделения методом КЭ с добавлением детерген-та подробно обсуждаются в разделе, посвященном мицеллярной электрохроматографии. [c.52]

Было показано, что при разделении энантиомеров важную роль наряду с выбором подходящего хирального селектора играют и другие параметры электрофоретической системы, которые требуют дальнейшей оптимизации. Например, на процесс оптимизации разделения энантиомеров решающее влияние оказывает величина pH. Вследствие того, что разделение энантиомеров методом КЭ основано на различии в подвижностях между - и 1-формами, анализируемые вещества необходимо перевести в ионную форму, что обеспечивается подходящим значением pH. При электрофоретическом движении анализируемых веществ через "квазистациомарную" фазу (в данном случае - ЦД) происходит разделение пары энантиомеров. Важнейшими оптимизирующими параметрами в данном случае являются концентрация хирального селектора в используемой буферной системе, сама буферная система (вид фонового электролита), а также другие буферные добавки, такие как ДДСН, метанол и др. Их [c.90]

На рис. 8.6 показано влияние эффективности колонки и селективности сор-беша на разделение смеси двух веществ. Оптимизация разделения сводится к выбору лучшего сочетания парамефов, входящих в уравнение (8.28). Например, дпя увеличения в два раза нужно увеличить эффективность N или [c.283]

Согласно кривой 3 рис. 4.42, зависимость удерживания от концентрации ион-парного реагента имеет максимум. Положение его важно знать хотя бы ориентировочно при выборе условий элюирования. Обсуждаемая кривая вблизи максимума достаточно полога, поэтому, если речь не идет о тонкой оптимизации разделения сложной смеси, вполне можно воспользо- [c.172]

Разделение, величины удерживания в [389] различных системах растворителей на силикагеле и нитрилсиликагеле Оптимизация разделения [314] [c.296]

Условия выделения и анализа на ами- 119] носиликагеле Оптимизация разделения на силикагеле, [392] разделение изомеров Условия анализа в ферментативных [41] жидкостях [c.296]

Благодарности. Автор благодарит профессора Оландера (U B, США) за глубокие замечания, творческие предложения и. ценные советы. Автор признателен Лахаргу ( ISI, Франция) и Билле ( EA, Франция) за разработку программ для расчета гидродинамики и для оптимизации разделения центрифуг соответственно. [c.226]

Под оптимизацией разделения в ТСХ подразумевают выбор условий эксперимента, позволяющих провести удовлеворительное разделение данного образца на данной пластине за определенный промежуток времени. Естественно, стратегия оптимизации должна быть основана на уравнении разделения (уравнение 54). Подробно это уравнение обсуждается в разд. П1, Б, 2. Третья группа методов является многообещающей и позволяет получить наиболее удовлетворительные результаты, если только сложные физико-математические "джунгли" и математический жаргон, обычно применяемые для описания сути этих моделей, преобразуются в простые и понятные хроматографисту-практику схемы. Тем не менее термодинамический подход к рассмотрению удерживания в ЖХ является начальным этапом при любой конструктивной попытке прогнозирования и оценки удерживания и селективности. С начала 80-х годов благодаря исследователям, работающим в области КЖХ, наблюдается заметный прогресс в осмыслении законов селективности в ЖХ, возможности регулирования и систематической оптимизации этого параметра. [c.11]

В работе Глейча, Киркланда и Снайдера [142] описан метод оптимизации разделения для случая (б). Оптимизацию проводили с помощью компьютера. Описанный метод позволяет найти точку в треугольнике селективности, соответств)Ьощую оптимальному разрешению. В этой точке разрешение наиболее трудно разделяемой пары максимально, а для всех других соединений разрешение вполне удовлетворительно (но не максимально). На рис, 160 приведен пример описанной процедуры оптимизации для КЖХ на силикагеле. В дальнейшем будет показано, что этот метод для ТСХ может быть существенно упрощен. [c.51]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология