Влияние концентрации буфера

Влияние концентрации буфера [c.51]

На форму пика оказывает большое влияние концентрация буфера с ростом концентрации пики становятся более симметричными. Например, интенсивность пика калия при повышении концентрации буфера от 0.5 до 12 мМ возрастает в 4 раза. Однако такой способ оптимизации имеет определенные четкие границы, т.к. при концентрации буфера больше 8 мМ резко возрастают шумовые помехи сигналов. Этот рост связан с градиентами плотности, возникающими из-за разности температур вследствие выделения джоулева тепла в электрическом поле. В капилляре с внутренним диаметром 100 мкм, применяемом в этих опытах, можно использовать имидазольный буфер с концентрациями вплоть до 5 мМ. В обычно используемых капиллярах с внутренним диаметром 75 мкм можно работать с концентрациями до 10 мМ при величинах pH от 4 до 6. В капиллярах с внутренним диаметром 50 мкм можно [c.59]

В то время как амины и аминокислоты, несущие положительный заряд, более прочно удерживаются при более высоких значениях pH, для отрицательно заряженных сорбатов справедливо обратное. Систематические исследования, проведенные на серии N-бензоил-о, L-аминокислот, позволили глубже понять механизм взаимодействия сорбата с белком. Влияние изменения свойств подвижной фазы на величины к VI а демонстрирует рис. 7.10. Во-первых, удерживание в значительной степени возрастает с усилением гидрофобного характера аминокислоты (Ser > А1а> Phe). Во-вторых, увеличение суммарного отрицательного заряда белка с увеличением pH вызывает уменьшение к для всех шести соединений (вследствие ионного взаимодействия). Далее, влияние концентрации буфера можно объяснить усилением адсорбции вследствие ионных взаимодействий при низкой ионной силе. Небольшое, но вполне заметное возрастание к для наиболее сильно удерживаемых сорбатов при высоких концентрациях буфера вероятнее всего является результатом усиления гидрофобных взаимодействий. Поскольку ионные (кулоновские) и гидрофобные взаимодействия по-разному подвержены влиянию ионной силы, то оба эффекта приводят к возникновению минимума в адсорбции сорбата (к ) в определенной точке. И наконец, совершенно очевидно влияние органического растворителя-модификатора он всегда приводит к понижению удерживания сорбата и тем сильнее, чем более гидрофобен сорбат. Влияние pH и ионной силы на удерживание незаряженных соединений невелико, но выражено вполне отчетливо. Оно связано исключительно с изменениями в связывающем центре ХНФ. Добавление пропанола-1 вызывает уменьшение удерживания по сравнению с наблюдаемым у заряженных сорбатов, что свидетельствует о преимущественном вкладе в удерживание гидрофобных взаимодействий. Это подтверждает также наблюдаемое очень большое влияние на удерживание длины цепи алканола-1. Высшие спирты являются значительно более эффективными конкурентами за связывающий центр, а потому вызывают более быстрое элюирование сорбата. Возможность регулирования удерживания путем изменения подвижной фазы, которую демонстрирует схема 7.6, говорит о том, что эту особенность данных хроматографических систем можно использовать в целях оптимизации разделения. [c.135]

Влияние концентрации буфера и инертных ионов на потенциал полуволны. [c.363]

В ряде статей [5, 6, 55] были исследованы математические свойства решений на основе уравнений метода, а также проблемы влияния ошибок в исходных данных на точность решения [42, 56]. Ряд модификаций метода позволил распространить его для расчетов нри частично заданном равновесном составе (например, для выбора соотношений начальных концентраций буфера с заданной равновесной концентрацией одной из частиц, условий маскировки и демаскировки в аналитической химии и т. п.) [5, 57—59], для расчета одной неизвестной константы по измеренной равновесной концентрации или растворимости какой-либо частицы в системе произвольной сложности [60], для расчетов ионообменных и доннановских равновесий [61, 62]. Процедуры, осуществляющие некоторые из указанных модификаций метода на языке АЛГОЛ-60, опубликованы в статьях [5, 61]. Там же приведены примеры их использования. [c.29]

Разница в температуре между серединой капилляра и стенками в цилиндрической трубке возрастает пропорционально квадрату диаметра капилляра. Поэтому в КЭ применяют очень тонкие капилляры (диаметром от 50 до 100 мкм). Сам градиент температуры не может быть измерен из-за очень малых размеров капилляра. При уменьшении диаметра оптическая плотность слоя и, вместе с тем, чувствительность обнаружения уменьшаются (закон Ламберта-Бера). Другая возможность уменьшения влияния джоулева тепла состоит в снижении концентрации буфера и/или применении буфера с низкой ионной электропроводностью. [c.18]

На рис. 6 уже было показано влияние ионной силы на ЭОП. Подвижность ионов должна зависеть от концентрации буфера. Важной является также ранее описанная зависимость интенсивности пиков от концентрации буфера. С одной стороны, концентрацию буфера нужно выбирать настолько высокой, чтобы значение pH оставалось постоянным и по возможности минимизировались бы эффекты перегрузки, но, с другой стороны, чтобы ЭОП еще допускал быстрое время анализа и не появлялось бы дополнительное уширение полос из-за тепловыделения. При этом, естественно, в капиллярах с маленьким внутренним диаметром применяется высокая концентрация буфера. Для большинства применяемых капилляров с внутренним диаметром 75 мкм применяются обычно буферы с концентрациями от 10 до 50 мМ. [c.51]

П. Н. Коваленко [102] исследовал влияние концентрации нитратного и других буферов на скорость электролитического осаждения Си . Bi" , d , Pb". [c.311]

ВЛИЯНИЕ pH И КОНЦЕНТРАЦИИ БУФЕРА НА КАТАЛИТИЧЕСКИЕ ПРЕДЕЛЬНЫЕ ТОКИ ВОДОРОДА [c.383]

Существенную роль в выборе буфера должны играть солевые эффекты и возможность температурных изменений. Нужно иметь в виду и химическую природу компонентов буферного раствора, поскольку добавляемые вещества могут образовывать нерастворимые соединения и комплексы или давать другие нежелательные реакции со средой. Выше (стр. 98) мы рассмотрели влияние типа буфера и его концентрации на буферную емкость, эффект разбавления, солевой эффект и температурный коэффициент. Обсуждение может служить руководством при выборе подходящей буферной системы. [c.114]

Смесь оксидов 18 элементов разбавили отдельно угольным порошком и фторидом лития до концентрации 0,01—0,17о затем из этих двух смесей приготовили девять образцов, основы которых содержали 0,5, 10, 25, 50, 75, 90, 95 и 100% фторида лития. Концентрация примесей во всех образцах была одинаковой. Пробы испаряли из канала угольного электрода диаметром 3 и глубиной 4 мм в дуге переменного тока силой 15 А. Исследовали влияние лития на чувствительность анализа и испарение элементов во время горения дуги. Добавление до 25% фторида лития повышает чувствительность определения всех элементов (за исключением цинка и сурьмы). Наибольшее почернение линий меди, кремния, железа, алюминия и серебра наблюдается при концентрации буфера около 25% хрома, никеля, ванадия, молибдена и титана — 25—75% свинца и олова— 100%. Почернение линий цинка и сурьмы с 5% буфера несколько повышается, но при дальнейшем увеличении его содержания снижается. Аналогичные данные были получены р при испарении пробы из канала угольного электрода диаметром [c.110]

С увеличением концентрации бария в пробах, не содержащих буфера, почернение аналитических линий всех элементов повышается. Наибольший рост наблюдается при добавлении первых порций бария. По мере добавления к пробе фтористого лития влияние бария снижается. Одновременно повышается разность почернений линий и фона. Этот рост не во всех случаях одинаков. Почернение линии свинца повышается вплоть до 30% фтористого лития, в то время как для других элементов наблюдается максимум. При определенной концентрации в пробе фтористого лития влияние бария полностью подавляется. Эта концентрация не одинакова для различных элементов и составляет для железа, меди, никеля и свинца 15— 20%, олова, хрома и алюминия 20—30%. Приведенные концентрации буфера, необходимые для подавления влияния бария, справедливы лишь для, данных конкретных условий анализа. Более того, даже при использовании других аналитических линий картина может измениться. [c.106]

Из большого разнообразия методов в таблицах приведены те, которые используются чаще всего. Методы N 1—N 3 пригодны для анализа порошковых проб, а методы N 4—N 6 — для анализа растворов [см. табл. 9.4.10.7(а, б, в)]. Метод N 6 можно применять при по существу одинаковых условиях, используя два разных способа введения проб в источник света способ вращающегося диска и способ разбрызгивания. Приведенные области концентраций являются приближенными, так как они в значительной степени зависят от влияния применяемых буферов и других добавок, а также от не указанных в таблице, но присутствующих в пробах элементов. [c.174]

Рис. 2. Влияние концентрации гидроксиламина на константу скорости реакции псевдопервого порядка при взаимодействии его с З-Ю уИ аниона пировиноградной кислоты в 0,1 УИ фосфатном буфере.

При разделении веществ с малым эквивалентным весом, если их эквивалентная концентрация не пренебрежимо мала по сравнению с концентрацией буфера, возникает дополнительная причина размывания зоны. В соответствии с электрохимическими законами, рассмотренными в предыдущем разделе, в зоне при ее движении устанавливается электропроводность, отличная от электропроводности остального раствора. Под влиянием градиентов напряженности поля на одной из границ зоны возникают условия обострения, а на другой — размывания. Постепенно зона приобретает несимметричную форму. В предельном случае одна из границ может исчезнуть совсем. Как это и следует из теории Кольрауша—Вебера и Дола, этот эффект тем больше, чем больше разность между подвижностями исследуемых ионов и ионов буфера того же знака. Если эта разность отрицательна, обостряется передний фронт зоны, если положительна — то задний. Из сказанного очевидно, что размывание зон, вызванное электрохимическими причинами, можно уменьшить, подбирая ионный состав буферного раствора и увеличивая концентрацию последнего. [c.76]

Рис. 5. Влияние концентрации ацетатного буфера и pH на тафелевские зависимости реакции восстановления 5-бром-2-ацетил-тиофена

Влияние концентрации на этот процесс в отсутствие и в присутствии буферного соединения показано на рис. П-6. Изменение наклона кривых в серии опытов без буфера можно приписать более высокому значению АГд для разделенных ионных пар по сравнению с соответствующей величиной для контактных пар. Возрастание начальной ординаты с концентрацией Г4 согласуется с представлением об увеличении концентрации разделенных пар, если принять, что свойственная им константа скорости роста feg, р существенно превышает константу, относящуюся к контактным парам В соответствии с этим суммарную константу роста при исключении диссоциации ионных пар (опыты в присутствии буфера) можно выразить через уравнение [c.66]

Еш е ярче выражена зависимость соотношения о/п-изомеров от среды реакции. Это не только простое влияние концентрации водородных или гидроксильных ионов, но, по-видимому, специфическая зависимость от характера и концентрации применяемого буфера, которая, хотя и не ясно выражена, однако может быть доказана. Как показывают опыты 1, 2 и 3 табл. 1, [c.193]

Таблица 9 Влияние концентрации субстрата на скорость гидролиза п-нитроанилида Ы-бензоил-Ь-аргииина, катализируемого трипсином. Условия опыта pH 8,2 25° С 0,05М трис-НС1-буфер 0,02М СаС12 1% диметилформамида

Влияние концентрации гидроксиламина на отношение скоростей гидроксиламинолиза и гидролиза для производных глутаровой кислоты при катализе ш-амидазой. Условия опыта pH 7,0 30° С 0,05М фосфатный буфер [Eje = 2,810-2 мг/мл [c.152]

Рис. 10.4. Влияние концентрации фосфатных буферов на удельную скорость гидролиза иминолактона. Цифры справа указывают pH

Веселый и Брдичка [19], Бибер и Трюмплер [20] изучали влияние pH раствора на высоту волны формальдегида в буферной среде при 20°. Они показали, что в широкой области pH высота волны меньше, чем диффузионный предельный ток, соответствующий аналитической концентрации формальдегида, и практически не зависит от высоты ртутного столба (рис. 168). С увеличением pH высота волны возрастает, достигая при pH 13,15 максимального значения, которое приблизительно соответствует лишь рассчитанной величины диффузионного тока, и прн дальнейшем увеличении pH высота волны начинает постепенно уменьшаться (рис. 169). Кроме того, было найдено, что высота волны формальдегида зависит от природы и концентрации буфера. [c.319]

Ионы водорода участвуют во многих электродных реакциях органических соедр1нений. Часто pH и ионная сила среды сильно влияют на потенциал полуволны, число волн и форму кривой сила тока — напряжение. Для того чтобы получить воспроизводимые результаты, необходимо использовать буферные растворы при этом природа и концентрация соответствующей буферной системы в каждом случае индивидуальны. Добавление водного буферного раствора к органическому растворителю или к смеси растворителя с водой может значительно изменить pH буфера. Это связано с изменением активности ионов и кажущихся констант диссоциации различных присутствующих в системе диссоциирующих частиц. Обсуждение влияния pH, буферов и ионной силы в органической полярографии было проведено Элвингом [60]. [c.362]

При постоянном значении pH водной фазы было изучено влияние концентрации хлорида и сульфата натрия на процент экстракции урана. Результаты представлены на рис. 2. Экстракция в присутствии сульфата натрия была изучена при pH 7,1 (боратный буфер). Экстракция в присутствии хлорида натрия — при pH 7,1 (боратный буфер) и 9,7 (буферный раствор на основе NH4OH и [c.60]

Буфер оказывает неодинаковое влияние на интенсивность фона на различных участках спектра. Так, с повышением концентрации фторида лития интенсивность фона рядом с линией Сг 425,43 нм снижается, а около линии Сг 301,48 нм, наоборот, растет. В результате суммарного воздействия буфера на интенсивность аналитической линии и фона разность почернений линии Сг 425,43 нм увеличивается вплоть до концентрации фторида ЛИТИЯ 75%, а разность почернений линии Сг 301,48 нм после максихмума при концентрации буфера 50% снижается. Интересно, что при введении в пробу до Ъ% буфера значительно повышается интенсивность также и искровых линий. С уве личением концентрации буфера интенсивность искровых линий резко снижается. Характер снижения для линий всех элементов практически одинаков. [c.110]

Для устранения этого влияния можно к пробе добавить, например, азотную кислоту, которая вытеснит анион хлора в виде легколетучего хлорово-дорода. Хорошие результаты получают при добавлении нитрата аммония с образованием летучего хлорида аммония. Но при этом наблюдается частичная потеря определяемого элемента. Разработан метод устранения помехи от свободного хлора путем его связывания в молекулу, более устойчивую, чем молекула монохлорида определяемого элемента [256]. С этой целью к пробе добавляют нитрат лития. При этом литий связывается с хлором, образуя легколетучий и труднодиссоциируемый хлорид лития (см. табл. 32), который улетучивается до стадии атомизации. Таким образом определяемый элемент защищается от воздействия хлора. Еще более термостойкие монохлориды образуют бор, титан и иттрий. Но они в данном случае меньше подходят в качестве буфера из-за низкой летучести. Когда к пробе, содержащей 1 мкг/мл таллия, добавляют 10 мкг хлорида натрия, абсорбционный сигнал существенно подавляется, а при введении наряду с мешающим веществом нитрата лития сигнал полностью восстанавливается. В данном случае отношение концентрации буфера к концентрации мешающего вещества должно быть не меньше 50. Еще лучшие результаты получают при совмещении буферной добавки с испарением с графитовой платформы. [c.146]

Другим примером влияния концентрации аффинного лиганда является аффинная хроматография смеси лактатдегидрогеназы и сывороточного альбумина на N -(6-аминогексил)-5 -АМР — сефарозе [8]. При высоких концентрациях лиганда (1,5 мкмоль 5 -АМР в 1 мл) для элюирования с )ермента необходимо введение NADH ( удар ). При низких концентрациях (0,125 мкмоль 5 -АМР в 1 мл) десорбция фермента достигается просто градиентом концентрации (от О до 1 моль/л) хлорида калия. Дальнейшее уменьшение количества прикрепленного лиганда (0,025 мкмоль 5 -АМР в 1 мл) приводит к прогрессивному увеличению доли лактатдегидрогеназы, элюируемой исходным уравновешивающим буфером даже перед наложением линейного градиента солей. В то же время [c.75]

Рис. 7. Влияние концентрации КС1 на элюцию инсулина С колонки ДЭАЭ-целлюлозы 0,005 М трис-НС1 буфером при pH 7,0 [32]. Условия опыта те же, 1что и на рио. 6.

Концентрация буфера должна быть достаточной для обеспечения стабильности системы после ввода образца концентрация буфера не оказывает существенного влияния на удерл<ива-ние и селективность, если концентрация противоионов поддерживается П0СТ0ЯН1ЮЙ (см. ниже). [c.127]

Параметры, приведенные в табл. 5.2,6, не оказывают значительного специфического влияния па индивидуальные компоненты. При удачном выборе параметров для оптимизационного процесса различия, которые мы наблюдаем между значениями параметров для различных компонентов образца, должны быть значительно большими. Слабое влияние pH вполне объяснимо, так как выбранный диапазон его значений обусловливает полную диссоциацию компопептов образца, необходимую для реализации ион-парного механизма. Однако между величиной pH и концентрацией камфорсульфокислоты существует ярко выраженная зависимость, что не проявляется в табл. 5.2,6. При нулевой концентрации камфорсульфокислоты увеличение значения pH приводит к возрастанию удерживания. Если концентрация камфорсульфокислоты составляет 10 мМ, то увеличеиие pH оказывает противоположный эффект. Аналогичная зависимость существует между концентрацией буфера и концентрацией камфорсульфокислоты. В табл. 5.2, в показано влияние pH и концентрации буфера при двух концентрациях камфорсульфокислоты. Однако истинное влияние этих двух параметров в табл. 5.2, в скрыто вследствие эффекта усреднения. Следует заметить, что различия, наблюдаемые в табл. 5.2, в, были бы менее значительными, если бы нижняя предельная концентрация камфорсульфокислоты была бы отлична от нуля (составляла, например, 1 мМ), и что влияние pH и концентрации буфера в отсутствие противоиона при иои-парной ОФЖХ не [c.237]

Главные физические факторы, оказывающие влияние на скорость движения белков на бумаге, — это природа и концентрация буфера, испарение, электроэндосмоз и градиент электрического поля. Эти факторы будут рассмотрены порознь. [c.244]

Испытывалось и влияние трас-буфера (трас-гидроксиметил-аминометан) в концентрациях 2,5, 5,0 и 10,0 мкМ. Оказалось, что при использовании трис-буфера лаг-фаза удлиняется больше, чем при забуферивании бикарбонатом (рис. 79). [c.180]

Если к раствору слабой кислоты прибавляется нейтральная соль, то ионы последней являются главным фактором, определяющим ионную силу раствора. Если же, с другой стороны, измерения производятся в буферном растворе (например, уксусная кислота + Цетат натрия), то ионная сила раствора зависит от состава самого буфера, и в этом случае могут получиться значительные вторичные солевые эффекты даже без прибавления других солей. Согласно классической теории диссоциации, концентрация ионов водорода в буферном растворе уксусной кислоты -(- ацетат натрия зависит только от соотношения составных частей буфера. В действительности вслед-ствие вторичного солевого эффекта концентрация ионов водорода обусловлена также общей концентрацией буфера и возрастает с воз-расташ с концентрации соли. Эго влияние концентрации можно при- [c.8]

Этот пример важен для обеих специфических азореакций — диазотирования и сочетания. Однако он представляет собой лишь частный случай имеющ,его большое значение класса кислотного и основного катализа, в основательном исследовании и систематизации которого особые заслуги имеют Бренстед и Белл. При этом существенным является различие между кислотным (или основным) катализом, с одной стороны, и специфическим катализом посредством водородных (или гидроксильных) ионов —с другой. При специфическом катализе в водной среде на скорость реакции оказывают влияние только (сольватированный) - или ОН -ион. В общем же случае реакцию катализируют все кислоты и основания. И общий, и специфический катализ характеризуются тем, что скорость реакции является функцией концентрации Н -(или ОН -) ионов т. е. зависит от pH. Экспериментально их можно различить, варьируя концентрацию буфера при неизменном молярном соотношении комионент, т. е. при постоянном р/Н. В случае общего катализа при этом изменяется скорость реакции. Вопрос о том, идет ли в этом случае реакция под влиянием кислой или основной составной части буферной смеси, можно определить путем изменения соотношения этих компонент. [c.15]

В пределах концентраций от 1 10" до 1 КУ А М полимери- я зация не оказывает заметного влияния на форму кривой титро- вания. Она становится заметной, например, для метиленового синего. При более высоких концентрациях это явление может < быть изучено спектрофотомвтрическими методами. Потенциомет- 1 рия, как это указывалось выше, не дает хороших результатов, так как поддерживать значение pH постоянным в ходе титрова- ния почти невозможно, Ьсли концентрация красителя ве намно- го меньше концентрации буфера. [c.450]

Систематические исследования по оптимизации элюирования белков с алкил-агароз выявили множество факторов, влияющих на элюирование были найдены агенты, понижающие полярность, специфические деформаторы , мягкие детергенты кроме того, изучалось влияние концентрации денатурирующих веществ, изменения pH, температуры, ионной силы и состава буфера. Поскольку доступность гидрофобных положений на поверхности белка обусловлена, по-видимому, его конформацией, а удерживание белков на алкилагарозах зависит в основном от липофильности, размера, формы и локализации этих положений, то способы элюирования, описанные выше, могут приводить либо к непосредственному разрушению гидрофобных взаимодействий между адсорбентом и белком, либо к изменению конформации белка, либо к комбинации обоих эффектов. [c.183]