Грамицидин гидролиз

Изучение кинетики гидролиза грамицидина С показало, что сам антибиотик труднее гидролизуется, чем продукты его распада — нециклические полипептиды. [c.480]

Раствор грамицидина-С до восстановления и гидролиза 13,2 2,05 2,15 2,10 15,4 16,1 15,8 [c.367]

Последовательность соединения аминокислотных остатков в молекуле грамицидина была установлена путем изучения продуктов его неполного гидролиза, разделенных хроматографированием на бумаге, а также электрофорезом. [c.480]

Следующим существенным шагом в изучении строения этого антибиотика явилось выяснение последовательности сцепления остатков тех пяти аминокислот, из которых построена его молекула При гидролизе грамицидина С смесью равных объемов уксусной и Юн. соляной кислот при 37° были получены его неполные гидролизаты, содержащие различные ди- и трипептиды. Эти гидролизаты были изучены следующим образом [c.183]

Образование указанных ди- и трипептидов при неполном гидролизе грамицидина С согласуется только с одной последовательностью [c.185]

Количественная характеристика продуктов гидролиза грамицидина С, тироцидина и грамицидина [c.192]

При перекристаллизации из ацетона грамицидин В образует палочки с т. пл. 258—259°, тогда как грамицидин А кристаллизуется в виде тонких листочков с т. пл. 227—228°. Грамицидин В менее растворим в органических растворителях, чем грамицидин А. По своему составу эти два антибиотика очень сходны между собой. Гидролиз с последующей распределительной хроматографией на бумаге показал, что в их состав входят все те аминокислоты, которые были раньше обнаружены в нефракционированном грамицидине, а именно валин, лейцин, триптофан, аланин и глицин. Однако эти два антибиотика отличаются друг от друга соотношением перечисленных аминокислот. Так, если содержание триптофана в грамицидине А принять за 100 ,с, то его содержание в грамицидине В составит только 85 /q. [c.367]

Метод распределительной хроматографии применяется не только для разделения аминокислот, но и для разделения производных аминокислот [45, 50], а также пептидов [51, 52]. Так, этим методом были получены ценные результаты при разделении продуктов неполного гидролиза инсулина [53] и грамицидина [54]. Методом распределительной хроматографии было показано, что норвалин и норлейцин не являются составными частями белковой молекулы [29]. Выяснилось, что норлейцин представляет собой смесь й- и /-лейцина [55]. Отсутствие норвалина в гидролизате желатины было подтверждено спектроскопией по Раману [56]. Из списка природных аминокислот необходимо исключить также оксиглутаминовую кислоту, присутствие которой в казеине не было подтверждено хроматографическим методом [57]. Возможно, что так называемая фракция оксиглутаминовой кислоты представляет собой смесь аспарагиновой кислоты с другими веществами [58]. [c.30]

Порядок чередования аминокислот в небольших полипептидных цепях, содержащих 5—10 аминокислотных остатков, может быть установлен прн помощи весьма трудоемких и сложных аналитических методов. Таким путем была установлена, например, структура циклопептида — грамицидина С (см. гл. XV). Структура различных пептидов, получаемых при частичном гидролизе инсулина и гемоглобина, была установлена главным образом путем метки концевых групп динитрофторбензолом [17,89]. Результаты этих анализов показали, что как инсулин, так и гемоглобин построены из гетерогенных фрагментов. Так, например, пептид А, полученный из инсулина, содержал глицин, изолейцин, валин и тирозин. Определение аргинина, гистидина, лизина, фенилаланина и треонина в этом пептиде дало отрицательные результаты. Пептид В, выделенный из того же препарата инсулина, содержал фенилаланин, валин, аспарагиновую кислоту, глутаминовую кислоту, лизин, треонин и аланин [89] (см. гл. 111 и ХП1). Полученные данные указывают на то, что в пептидах, выделенных из инсулина, нет того периодического чередования аминокислот, о котором говорит Бергман [90]. [c.135]

Приведенные представления о строении грамицидина-С, однако, не дают объяснения ряду свойств грамицидина, вытекающих из строения молекулы. Так, например, до настоящего времени является загадкой поразительная устойчивость его к нагреванию, гидролизу в 25%-ной серной кислоте и т. д. [c.365]

Если сравнить свойства грамицидина со свойствами синтетических и выделенных из белковых гидролизатов пептидов и циклопептидов, то станет очевидным, что последние значительно легче гидролизуются и представляют собой весьма лабильные вещества. [c.365]

Грамицидин после гидролиза кислотного 12,63 8,40 7,76 8,08 63,10 58,30 60,70 11,16 11,82 87,30 88,70 88,00 [c.367]

Как показали А. Н. Белозерский и Т. С. Пасхина, при длительном гидролизе грамицидина кипящей 20%-ной соляной кислотой происходит расщепление молекулы с выделением пяти аминокислот . /-пролина (1), /-валика (П),. /-орнитина (П1),. /-лейцина (IV) и -фенилаланина (V) [c.739]

Изучение кинетики гидролиза грамицидина С показало, что последний труднее гидролизуется, нежели продукты его распада — нециклические полипептиды из числа последних наиболее стойкими оказались дипептидь . [c.740]

N-2,4-Динитрофенильное производное грамицидина С использовано и для дальнейшего уточнения строения антибиотика при гидролизе обработанного 2,4-динитрофторбензолом грамицидина С был выделен-6-(2,4-ди-н11трофенил)-орнитин [c.741]

Основные аминокислоты. В белках встречается только одна диаминокислота — лизин (а, е-диаминокапроновая кислота). В продуктах щелочного гидролиза белков, а также в ряде антибиотиков (грамицидин) найден еще орнитин—а, б-диаминовалериановая кислота. В гидролизатах она образуется из аргинина. Обе аминокислоты не обладают специфическими реакциями. [c.473]

При частичном гидролизе циклического деканентида грамицидина С [33] и окситоцина [49] применяли концентрированную HG1 в ледяной уксусной кислоте при 37° С. [c.393]

А, Н. Белозерским и Т. С. Пасхиной и продолженное затем зарубежными исследователями, показало, что он представляет собой полипептид, дающий при гидролизе эквимолекулярную смесь пяти аминокислот L-лейцина, D-фенилаланина, L-пролина, L-валина и L-орни-тина. Этот пентапептид повторяется в молекуле грамицидина дважды, причем концы цепи из десяти остатков аминокислот замыкаются в одно гигантское кольцо. Таким образом, грамицидин С представляет собой циклический декапептид [c.389]

Грамицидин С (грамицидин советский) был выделен в 1942 г. Г. Ф. Гаузе н М. Г. Бражниковой из одного вида Ba ilus brevis (из садовой земли). Изучение его химического строения, начатое А. Н. Белозерским и Т. С. Пасхиной и продолженное затем зарубежными исследователями, показало, что он представляет собой полипептид, дающий прн гидролизе эквимолекулярную смесь пяти аминокислот L-валина, L-орнитина, L-лейцина, D-фенилаланина и L-пролина. [c.380]

Было установлено, что грамицидин С представляет собой полипептид, который гидролизуется с большим трудом. При нагревании с 22° о,-ной соляной кислотой он переходит в раствор только через 18 — 20 час., тогда как полный его гидрализ происходит лишь через 35—36 час. В гидролизатах было обнаружено пять аминокислот пролин (270), валин (271), орнитин (272) лейцин (273) и фенилаланин (274), из которых четыре первые относятся к /-ряду, т. е. к так называемым природным аминокислотам, тогда как фенилаланин оказался обладающим -конфигурацией. Позднее было установлено что этот антибиотик состоит из эквимолекулярных количеств пяти указанных аминокислот. [c.182]

Третий путь синтеза Ьуз -Ьуз -грамицидина С также предложен Швицером и Зибером [2033] (ср. [1999]). Поскольку отщепление №-тозильной группы часто протекает с плохим выходом, то использовали другую комбинацию защитных групп, (рис. 107) и в реакцию циклизации вводили пентапептид Н-ь-Val-L-Lys(MZ)-L-Leu-D-Phe-L-Pro-OPhN02 НС1 (G 1—5). Последний получали конденсацией B0 -L-VaI-L-Lys(MZ)-NHNH2 (С 1—2) с L-Leu-D-Phe-L-Pro-OMe (С 3—5), гидролизом продукта конденсации (D 1—5) в щелочной среде, взаимодействием полученного ВОС-пептида (Е 1—5) с ди-( -нитрофенил)-сульфитом в пиридине с образованием соответствующего эфира (F 1—5) и наконец отщеплением грег-бутилоксикарбонильной группы под действием 3,4 н. раствора хлористого водорода в этилацетате. Продукт циклизация — цикло-[ь- а1-ь-Ьу5(М2)-ь-Leu-D-Phe-L-Pro]2 — был очищен противоточным распределением (четыреххлористый углерод/метанол/вода, 10 9 1) и выделен в кристаллическом виде с 35%-ным выходом. №-М2-Защитные группировки отщепляли путем обработки защищенного циклопептида бромистым водородом в ледяной уксусной кислоте в те-.чение 1 час 15 мин при 40° цикло-[ь-Уа1-ь-Lys-L-Leu-o-Phe-L-Рго]2 2НВг Н2О образовался с выходом 90%. Выделенное со- [c.534]

Специальные опыты, проведенные с различными К-(2,4-дпнитро-фенил)-аминокислотами, показали, что при соблюдении принятых условий гидролиза все они не отщепляют остатка 2,4-динитробензола и вообще не изменяются. Исключение составляет только Н-(2,4-ди-нитрофенил)-пролин, который в этих условиях разрушается. Отсюда становится понятным, почему последний не был обнаружен среди перечисленных выше продуктов гидролиза. Сопоставление всех этих данных приводит к заключению, что вторая фракция, полученная после ионофореза гидролизата грамицидина С, содержала а-валил-орнитин (276), орнитил-лейцин (277), а-валил-орнитил-лейцин (280) и пролил-а-валил-орнитин (284) [c.185]

О порядке сцепления остатков в молекуле грамицидина пока известно очень мало. При его неполном гидролизе до сих пор удалось выделить только два дипептида валнл-валин (292) /-валил-глицин (293) [c.191]

Есть основания считать, что выделенный валил-валин является смесью d — )-валил-й (—)-валина и /(-j-)-валил-/()-валина Однако остается открытым вопрос о том, входят ли эти две пространственно изомерные формы взлил-валина в состав молекулы грамицидина или они возникли в результате рацемизации, которая могла произойти во время гидролиза и выделения этих дипептидов [c.191]

Более детально следует остановиться на двух работах посвященных синтезу полипептидов, сходных в отношении своего строения с грамицидином С. В первой из них описано получение всех пяти дипептидов, которые могут образовываться при гидролизе этого антибиотика, а именно а-(/-валил)-/-орнитина (276), /-орнитил-/-лейцина (277), /-лейцил- -фенилаланина (278), -фенилаланил-/-пролина (279) и /-пролил-/-валина (484) [c.359]

В дополнение к материалам, изложенным в гл. VU, следует привести лишь некоторые данные по кинетике гидролиза грамицидина С. Выяснилось 1894 что сам антибиотик более устойчив к гидролизу, чем продукты его распада — нециклические полипептиды. Из последних наиболее устойчивыми являются дипептиды. [c.359]

Почти одновременно с изложенным выше синтезом дипептидов было описано получение и двух пентапептидов а-(/-валил)- ,/-орнитил-/-лейцил- -фенилаланил-/-пролина и а-(/-валил)-й,/-орни-тил-/-лейцил-/-фенилаланил-/-пролина. Оба эти пентапептида очень близки в отношении своего строения к тому пентапептиду, который может образовываться в результате гидролиза грамицидина С. Для того чтобы иметь возможность осуществить их синтез, вначале были получены два трипептида, состоящих из /-лейцина, й- и соответственно /-фенилаланина и /-пролина, а затем эти трипептиды были сконденсированы с дипептидом, содержащим остатки /-валина и й, /-орнитина. Синтез проводился, как и в цитированной выше работе через соответствующие карбобензоксипроизводные, но конденсация осуществлялась не через хлорангидриды, а через азиды. [c.360]

С высоким сродством к электронам устраняет необходимость калибровки при детектировании и сводит к минимуму очистку образцов перед их хроматографическим определением, что особенно важно при анализе природных продуктов. ]У1етиловые эфиры ДНФ-производных были использованы для идентификации аминокислот, образующихся при гидролизе полипептида грамицидина А [58] (рис. 10). Аланин, валин, глицин, лейций и изолейцин определялись количественно с точностью до 2 % при хроматографическом разделении на двухметровой колонке с силиконовой жидкой фазой ЗЕ-ЗО. Наиболее полное разделение некоторых нейтральных алифатических и дикарбоновых аминокислот в виде фенилтиоги-дантоинов и метиловых эфиров ДНФ-производных получено при анализе на колонке с фторированным силиконовым полимером РР-1 и низким содержанием стационарной жидкой фазы [59]. [c.268]

Если необходимо дезаминировать пептид, то каплю исследуемого гидролизата, содержащую 6 н. соляную кислоту, обрабатывают парами азотистой кислоты на политеновой пластинке. С помощью этого метода было показано, например, что грамицидин представляет собой эквимолекулярную смесь пяти различных аминокислот валина, орнитина, лейцина, фенилаланина и про-лина. Было также установлено, что грамицидин 5 является циклопептидом, содержащим только одну свободную аминогруппу и ни одной свободной карбоксильной. Обнаруженная свободная аминогруппа грамицидина 5 находится в боковой цепи орнитина. В продуктах неполного гидролиза грамицидина 5 соляной кислотой были идентифицированы следующие дипептиды а-/-валил-/-орнитин, /-орнитил-/-лейцин, /-лейцил-б/-фенилаланин, -фенил-аланил-/-пролин и два тринептида а-валил-орнитил-лейцин и фенилаланил-пролил-валин. [c.159]

Выделение и строение. Среди антибиотиков класса гомодетных циклических пептидов грамицидин С (грамицидин советский) является наиболее широко исследованным. Дихлоргид- рат антибиотика выделен в кристаллическом виде из Ba illus brevis Гаузе и Бражниковой [782]. Синдж [2250] и Консден и сотр. [517, 518] подвергли грамицидин С частичному гидролизу 10 н. НС1 в ледяной уксусной кислоте при 37° и установили последовательность пяти аминокислотных остатков, входящих в молекулу антибиотика Val-Orn-Leu-Phe-Pro(L-L-L-D-L). Факт отсутствия в грамицидине С свободных карбоксильной и аминогрупп (кроме е-аминогруппы орнитина, обнаруженной динитро- [c.529]

Группы тирозина (D 1—5). После щелочного гидролиза (Е I—5), превращения продукта гидролиза в соответствующий нитрофе-ниловый эфир (F 1—5), отщепления обеих тритильных групп под действием трифторуксусной кислоты при температуре от —5 до —10° (G I—5) и циклизации был получен цикло-[ь-Уа1-ь-Туг-L-Leu-D-Phe-L-Pro]2 2НгО. Для его очистки использовали метод противоточного распределения (24 переноса четыреххлористый углерод/хлороформ/метанол/вода, 7 3 7 3) Туг -Туг -грамицидин С был выделен в кристаллическом виде. [c.537]

Грамицидин-С после электровосстановления сравнительно легко гидролизуется, в то время как исходный грамицидин, по данным Т. С. Пасхиной и нашим наблюдениям, не гидролизуется 25%-ной серной кислотой при нагревании в течение 60 час. [c.368]

В природе полипептиды образуются в процессах белкового обмена в растительном и животном организмах как при синтезе, так и при ферментативном гидролизе белковых веществ. Некоторые из них могут быть выделены из тканей (глутатион, карнозин, ансерин и др.). Многие физиологически активные вещества являются полипептидами. К ним относятся, например, ряд гормонов (вазопрессин, окситоцин, глюкагон, адренокортикотропный, меланотропные и др.), антибиотики (грамицидины, тироцидины, актиномицины, бацитрацины), витамины. [c.425]

Грамицидин Дюбо выделен в -1939 Р. Дюбо из тиротрицина, к-рый оказался смесью тироцидинов и Г. (см. таб.л.). Грамицидиновая фракция была разделена на 3 полипептида — грамицидины А, В и Ср, в наибольшем количестве содержится грамицидин А, тонкие листочки (из ацетона), т. пл. 227—228° т. пл. грамицидина В 258—259°. Из продуктов частичного гидролиза грамицидиновой фракции выделены П-валил-Ь-валин, Ь-валил-О-валин, L-валил-глицин, D-лей-ппл-глицин, Ь-апанил-П-валин и Ь-аланил-В-лейцлн. При полном гидролизе выделены D-лейцин, L-триптофая, D-и L-валин, L-аланин глицин и 2-аминоэтанол, приблизительно в соотношении 6 (з 5 3 2 2. В состав грамицидина А входят остатки валина, лейцина, триптофана, аланина и глицина, в состав грамицидина В наряду с указанными аминокислотами — фенилаланин, а в молекулу грамицидина jj — остаток тирозина. [c.503]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология