Аминокислоты, анализ пролин

Действительно, анализ аминокислотного состава апо-ПДК обнаружил высокое содержание гидрофобных ароматических аминокислот, присутствие пролина и низкое содержание цистеина. В связи с тем что модельные исследования показали возможность образования комплексов между тиамином и индольными производными, не исключено, что подобные комплексы могут образовываться и при связывании ТДФ белком. [c.281]

Лигандообменная хроматография предъявляет высокие требования к геометрии сорбируемых соединений, являясь уникальным методом разделения изомеров. Одним из перспективных направлений этого варианта хроматографического анализа является возможность расщепления и разделения рацематов органических соединений. Первыми в этом направлении стали работы по разделению оптически активных аминокислот с использованием полистирольного сорбента, ковалентно связанного с оптически активной природной аминокислотой — Х-пролином и ионом Прочно координируясь с сорбентом, ион двух- [c.553]

Карта аланинового дипептида является наиболее подходящей для анализа двугранных углов ф и г з в известных белках (таблицы значений ф и я) для миозина и лизоцима приведены в обзоре [19]), поскольку все аминокислоты, за исключением глицина ( и занимающего особое положение пролина) содержат атом, ограничивающий конформационную свободу аланинового дипептида. В работах [91, 19] был проведен такой анализ точки, соответствующие конформациям отдельных звеньев лизоцима и миоглобина были нанесены на карты — и при этом оказалось, что действительно громадное большинство точек попадает в разрешенные или частично разрешенные области. Для карты рис. 7 почти все точки заключены внутри контура 3 ккал моль, для карты рис. 8 — [c.122]

Первичные аминогруппы других аминокислот превращаются под действием азотистой кислоты в полярографически неактивные гидроксильные группы. Продукты нитрования тирозина, фенилаланина и гистидина не мешают анализу. Содержание пролина можно определить с точностью 2%, а оксипролина — с точностью +4%. Можно определить приблизительно 1 у нитрозопроизводного в 1 мл раствора. [c.387]

Э. Г. Фишер создал метод анализа и разделения аминокислот. В продуктах расщепления белков открыл валин, пролин, оксипролин н приступил к синтезу полипептидов. [c.660]

При анализе гидантоинов большую колонку (95 см) промывают вначале (13 ч) буфером I, а затем в течение 17 ч буфером П на короткой колонке (15 см) используют буфер ПГ. Сопротивление длинной колонки 1 атм, короткой — 0,1 атм. Следует иметь в виду, что при скорости подачи более 10 мл/ч разрешение резко падает. Поэтому на таких колонках работают при низком давлении. Порядок выхода гидантоинов на длинной колонке следующий аргинин, треонин, серин, глицин, аланин, аспарагиновая кислота, глутамин, гистидин, лизин, валин, пролин, изолейцин, метионин и лейцин. На выходе короткой колонки вначале появляется сумма аминокислот (в виде двух пиков), а затем фенилаланин и тирозин. [c.382]

Эта реакция не пригодна для отщепления С-концевых остатков пролина, так как они не образуют тиогидантоин, остатков аспарагиновой и глутаминовой кислот, которые образуют циклические ангидриды, а не тиогидантоины (аспарагин и глутамин, наоборот, дают тиогидантоины [301]), а также остатков серина, треонина, цистина, аргинина и лизина [19, 301], которые неустойчивы при циклизации или регенерации аминокислоты из тиогидантоинового производного. Таким образом, этот метод находит весьма ограниченное применение для прямого определения строения пептидов и белков. Для определения С-концевого остатка по разности [107] реакция может оказаться более полезной, но ее все же нельзя использовать для определения аспарагиновой и глутаминовой кислот и пролина. Однако путем микробиологического анализа [107], специфичного для остатков /-аминокислот, эти аминокислоты могут быть определены по потере оптической активности на 50% вследствие рацемизации в том случае, когда они являются С-концевыми. [c.247]

Кислые и нейтральные аминокислоты, смола иЦ-ЗО, литий-цитратные буферы. В общем по мере увеличения концентрации ионов лития время анализа сокращается. При увеличении концентрации Ы+ с 0,20 до 0,35 н. глутаминовая кислота элюируется значительно раньше, вплоть до совпадения ее пика с пиком аспарагина. Пролин и глицин не разделяются, а цистин элюируется вместе с валином. Не разделяются также метионин и цистатионин, а р-аланин элюируется вместе с фенилаланином. [c.44]

Обсуждение. Порядок выхода аминокислот на этой колонке такой же, как и на длинной колонке, заполненной смолой иК-ЗО (см. рис. 6), с той лишь разницей, что содержащиеся в пробе цистеиновая кислота, таурин и мочевина будут элюироваться несколько раньше. При использовании колонки (26 см), заполненной смолой иН-40, величина отношения высоты впадины между пиками к высоте большего пика пары разделяемых аминокислот равна для пары треонин-серин 0,40, серин — глутаминовая кислота 0,23, глицин —аланин 0,10 и тирозин — фенилаланин 0,16. В условиях данного анализа цистин выходит между пролином и глицином, а гистидин — до лизина. После лизина вымываются аммиак и аргинин. Состав буферов приведен в табл. 2. [c.72]

В отличие от белков к-т-е- -группы фибриллярные белки группы коллагена растяжимы не более чем на 10%. Рентгенограммы белков этих двух групп также различны. Коллаген не встречается в растениях, но составляет около 7з всех белков организма животных, являясь составной частью хрящей, сухожилий, костей и кожи. Анализ аминокислотного состава коллагена показывает, что на 7з он состоит из глицина. Цистеин и триптофан в нем не встречаются, а количество серусодержащих и ароматических аминокислот очень невелико. Около 20% аминокислот в коллагене составляют пролин и оксипролин. Последняя аминокислота, так же как и оксилизин, встречается только в коллагене и родственных ему белках. Есть основания считать, что гидроксильные группы этих аминокислотных остатков появляются в белке уже после синтеза всей полипептидной цепочки. [c.249]

Поскольку на пролин карбоксипептидаза не действует, после отщепления остатков треонина и аланина от нативного белка ВТМ действие фермента прекращается. В нитритных же мутантах действие карбоксипептидазы продолжается и после отщепления второго остатка, так как за ним следует лейцин. Таким путем было установлено, что под действием азотистой кислоты появляются мутанты, у которых произведена замена трех аминокислот из 158, в том числе замена пролина (третьего остатка от С-конца). Эта замена, вероятно, происходит в результате превращения цитозина в урацил на каком-то из участков цепи РНК, содержащей 6000 оснований. Анализ показал, что изменение даже одного основания может привести к мутации. [c.365]

Большинство соединений не поглощает в видимой области спектра. Поэтому анализаторы снабжаются прибором, который вводит в поток элюата постоянное количество реагента, воспроизводимо реагирующего с анализируемым соединением. Продукты реакции обнаруживаются на различных длинах волн. Именно к этому типу детекторов относятся аминокислотные анализаторы, в которых в поток элюата вводят нингидрин. Большинство аминокислот дают с нингидрином окрашенные соединения спектры их поглощения показаны на рис. 8.19. Спектр поглощения продуктов реакции пролина отличается по положению максимума. При проведении количественного анализа боль- [c.68]

Короткие последовательности с Л/-конца белков часто идентифицируют, используя ферментативную деградацию. Промышленность производит несколько аминопептидаз, отличающихся специфичностью. Лейцинаминопептидаза из почек свиньи, как следует из ее названия, гидролизует преимущественно лейцин и сходные аминокислоты с гидрофобными боковыми группами. Несмотря на то, что скорости расщепления, Л/-концевых аминокислот лежат в широких пределах, гидролиз желательно продолжать до конца, за исключением аминокислоты, предшествующей пролину. Вследствие столь широкого изменения скоростей расщепления следует соблюдать осторожность при интерпретации результатов анализа деградации, катализируемой этим ферментом. Чрезвычайно важно отбирать пробы для анализа в течение деградации. Например, при анализе белка с Л/-концевой последовательностью А1а-Ьеи-Ьеи. .. на ранних стадиях деградации выход аланина превышает выход лизина, однако при большом времени гидролиза соотношение меняется на обратное [24]. Другой фермент, выделенный из почек свиньи, ами-нопептидаза М, гораздо менее специфичен и, по-видимому, более пригоден для расщепления белков. [c.271]

ЭВМ сообщает номера пиков, названия аминокислот, время, прошедшее с момента начала анализа до момента выхода пика соответствующей кислоты в минутах и секундах, тип разрешения пика, площадь пика, количество соединения в наномолях, калибровочный коэффициент, используемый для расчетов, и уровень нулевой линии для того пика, для которого проводились расчеты. Можно также рассчитать молярное соотношение аминокислот в образце. С помощью этого прибора возможно количественное определение аминокислот при содержании их менее 1 нмоля отношение сигнала к шуму выше, чем 30 1. ЭВМ также контролирует динамическую область анализатора. Полную область шкалы поглощения можно менять либо вручную, либо по команде ЭВМ в интервалах 0,1—0,2—0,5—1,0 и 2,0. Кроме того, при установленной шкале чувствительности область поглощения можно автоматически увеличить или уменьшить в соотношении 1 10 для определенного компонента. Изменение области поглощения проводится, в частности, в тех случаях, когда все компоненты (аминокислоты), исключая пролин и оксипролин, определяют в области поглощения 2,0, и только для этих двух компонентов ее необходимо расширить до 0,2 ед. погл. [c.77]

Проведен анализ некоторых субъединиц (табл. 6Б.14). Результаты, полученные Данно и др. [76], подтверждают различие субъединиц глютеинов по составу. По содержанию глицина, пролина, тирозина, фенилаланина и основных аминокислот субъединицы с молекулярной массой свыше 90 000 Да можно отличить от других. Среди субъединиц с более высокой молекулярной массой субъединица 95 000 Да превосходит другие по содержанию основных аминокислот. [c.206]

При рассмотрении результатов анализа (см. табл. 15) видно, что белки отличаются от других природных макромолекулярных соединений, нанример от целлюлозы или крахмала, большим числом различных единиц, входяш их в состав макромолекул (20 аминокислот вместо только одного моносахарида —глюкозы). Кроме того, белки содержат различные аминокислоты в определенных соотношениях. Некоторые белки содержат большое количество определенных аминокислот так, например, коллаген богат гликоколем, пролином и оксипролином, кератин — цистеином и оксикислотами, глиадин пшеницы — глутаминовой кислотой, а салъмин — белок из спермы рыб — состоит почти исключительно из аргинина и не содержит кислотных групп. [c.424]

Первыми нашими объектами теоретического конформационного анализа явились метиламиды N-ацетилглицина, N-aцeтил-L-aлaнинa, N-аце-тил- -валина и М-ацетил-/.-пролина [20, 67]. Выбор был продиктован предположением о том, что изучение пространственного строения молекул этой серии выявит верхний и нижний пределы конформационных возможностей основных цепей монопептидов всех стандартных аминокислот. В работах Шараги и соавт. [63-65] было показано, что свобода вращения вокруг связей N- и С -С существенно различается только в следующих случаях при отсутствии заместителя у атома С (монопептид Gly), при наличии не более одного заместителя при атоме СР(А1а), при наличии двух заместителей при атоме P(Val) и при замыкании углеводородной цепочкой (-СН2-)з атомов N и С (Pro). [c.157]

Каждая из известных (встречающихся в природе) аминокислот освобождает одну молекулу азота за исключением пролина н окси-пролина, которые совсем не реагируют, и лизина, который дает две молекулы азота. Отмечается недостаток реакционной способности у аминогруппы остатка гуанидина в аргинине, креатине и самом гуанидине. Точно так же не рёагирует иминный азот пептидов за исключением глицилглицин а. У всех аминокислот кроме гликоколя, цистина и серина можно получить хорошие результаты при П0МО1ЦИ киспого перманганата. При анализах гликоколя результаты могут превысить истинные на много процентов, если работать с кислым перманганатом. У серина ошибка меньше. Повидимому, часть образующегося из гликоколя диазосоединения разрушается полностью при действии азотистой кислоты. Это сйъ-ясняет образование СО2 из этих аминокислот и освобождение вторичного азота из пептида. [c.765]

Толуол — пиридин —этиленхлоргидрин — 0,8 н. аммиак -Ь[30 4-+ 60 + 60) ( толуол -система [45]). Верхняя фаза служит для хроматографического анализа, нижняя — для предварительной обработки слоя (см. стр. 422). Эта система дает пятна с длинной бородой , что, естественно, связано с известными потерями вещества. Благодаря прекрасным разделительным свойствам этой системы мы используем ее в первом направлении при двумерной хроматографии. Мы считаем пока эту систему незаменимой и миримся с необходимостью предварительной обработки пластинок. Эта система обеспечивает, например, отделение ДНФ-фенилаланияа от ДНФ-метионина, ДНФ-норлейцина от ДНФ-валина, ДИФ- -аланина от ДНФ-лейцина, ДНФ-а-амино-и-масляной кислоты от ДНФ-пролина, ДНФ-аланина от ДНФ-саркозина кроме того, отделение группы, ди-ДНФ-аминокислот (кроме ди-ДНФ-цистина) от низших ДНФ-аминокислот и ДНФ-производных низших аминокислот от ДНФ-производных кислых аминокислот, причем последние остаются в точке старта. [c.418]

Кислые и нейтральные аминокислоты, смола иЯ-40. Повышение концентрации цитрата с 0,066 до 0,133 М не изменяет положения глутаминовой кислоты относительно пролина или цитруллина при следующих условиях анализа pH буфера 3,175, концентрация ионов натрия 0,18 н., температура колонки 32,5 °С, скорость течения буфера 60 мл/ч. При увеличении концентрации цитрата улучшается разделение аспарагина и треонина до 0,40 (соотношение вы от впадины и пика). При более высокой концентрации цитрата большинство аминокислот элюируются быстрее. Значительно улучшается разделение глицина и аланина сжимаются пики пролина, глутаминовой кислоты и цитруллина. [c.45]

Кислые и нейтральные аминокислоты. Эти аминокислоты анализируются в тех же условиях, что и основные аминокислоты, за исключением элюирующих буферов. Вначале аминокислоты элюируют 0,2 н. натрийцитратным буфером pH 3,488+0,005, который через 30 мин после начала анализа заменяют на 0,2 и. натрийцитратный буфер pH 4,404 0,010. Продолжительность анализа 115 мин. Следует отметить, что в таких условиях в отличие от четырехчасового анализа цистин элюируется до глицина, между пиками пролина и глицина. (Состав буферных растворов см. в табл. 2.) [c.60]

Для выяснения вопроса о присутствии цис-транс-З-окси-ъ-пролина в теломицине [68] М-карбобензокси-гранс-З-окси-оь-пролин был подвергнут хроматографическому анализу. Несколько других изомерных производных пролина разделили в виде Ы-ацетил-н-бутиловых эфиров после удаления а-амино-групп остальных аминокислот в результате обработки азотистой кислотой, оставляющей интактными иминогруппы изомеров пролина [92]. [c.99]

Чтобы преодолеть трудности, вызываемые плохой воспроизводимостью условий пиролиза, Симон и Жакоб [72] описали прибор, в котором тонкий, примерно мономолекулярный слой образца в виде пленки наносится на ферромагнитный проводник. Пленка может быть за 20—40 мс нагрета до точно определяемой температуры, отвечающей соответствующей точке Кюри. Опубликованы данные о фрагментации 28 аминокислот по этой методике [72], однако при анализе пептидов те же проблемы остались нерешенными. На рис. 8 сравниваются примеры фрагментации дипептида пролилфенилаланина и смеси (1 1) натриевых солей пролина и фенилаланина. Можно видеть, что относительные интенсивности характерных фрагментов заметно изменились. По-видимому, в этих исследованиях больше сделано для самого метода пиролиза, чем для анализа пептидов. [c.181]

Связь амидного азота с у арбоксильной группой аспарагиновой кислоты и 6-карбоксильной группой глутаминовой кислоты доказана выделением аспарагина и глутамина после ферментативного гидролиза белка. Количество первичных аминогрупп в белке или в гидролизате может быть точно определено микрометодом Ван-Слайка (1911). Кислота, содержащая первичную аминогруппу, реагирует с азотистой кислотой с количественным выделением азота последний определяется манометрически. В лизине и а- и е-аминогруппы могут быть определены по Ван-Слайку, в аргинине реагирует только а-аминогруппа и не реагирует гуанидогруппа ЫН-группы пролина, триптофана и гистидина в этих условиях азот не выделяют глутамин дает 2 моль азота. Этот метод может быть применен для анализа гидролизата, осаждаемого фосфорновольфрамовой кислотой. Осадок содержит три основные аминокислоты и цистин, количество которого может быть вычислено, исходя из результатов анализа общего азота (по Кьельдалю) и опре- [c.640]

Укажем только на следующее для точного определения аминокислотного состава белка его нужно подвергнуть гидролизу (в вакуумированной запаянной ампуле с 6н. НС1 при температуре 110°) в течение 22 и 70 час [26]. При этом для глицина, аланина, валина, лейцина, изолейцина, метионина (с внесением поправки на 10%-е расщепление при хроматографии), фенилаланина, гистидина и лизина нужно использовать полученное при анализе содержание аминокислоты (в 22- или 70-часовом опыте). В то время как для аспарагиновой и глутаминовой кислоты, серина, треонина, пролина, тирозина и аргинина, которые частично разрушаются при гидролизе (по реакции 1-го порядка), их содержание рассчитывается путем экстраполяции на нулевое время по формуле [c.149]

Джонсону с сотрудниками [38] удалось хроматографически проанализировать 33 аминокислоты в виде амиловых эфиров К-ацетилпроизводных, включая 17 протеиновых, применяя низкие отношения стационарной фазы к твердому носителю и осуществляя хроматографическое разделение смеси аминокислот на сдвоенных колонках при различных температурах. Первая колонка длиной 2,4 м содержала 1% Карбовакса 1540, нанесенного на хромосорб W (60 —80 меш). С этой колонки при 125° за 25 мин элюировались производные аланина, валина, изолейцина и лейцина. После этого температуру колонки быстро повышали до 148° для анализа производных глицина, -аланина, пролина, треонина, серина, цистеина, метионина, фенилаланина, оксипролина и аспарагиновой кислоты, которые элюировались из колонки в порядке перечисления (рис. 6). [c.263]

Вследствие относительно высокой упругости паров соединений, содержащих фтор [50], газо-жидкостная хроматография применяется для разделения К-ТФА-эфиров ди-, три- и тетрапептидов, Газо-хроматографический анализ различных летучих производных коротких пептидов проводился рядом автором [51—56]. Бименом и Веттером, например, осуществлено хроматографическое разделение N-aцeтилиpoвaнныx аминоспиртов и полиаминов, полученных из лейцил-аланина, глицил-фенилаланина, фе-нилаланил-глицина, лейцил-аланил-пролина и лейцил-аланил-глицил-лейцина с последующим масс-спектрометрическим определением последовательности аминокислот в пептидных цепях [53]. Однако наибольшего успеха удалось достигнуть при применении, как и в случае разделения аминокислот, К-трифторацетилирован-ных метиловых эфиров (рис. 9). Указанный метод, по-видимому, имеет ограниченное применение при исследовании структуры пептидов [64] и степени рацемизации при их синтезе [55]. [c.267]

На колонке, заполненной сорбентом с 10% силикона ХЕ-60, при 140° С хорошо разделялись производные аланина, валина, изолейцина, глицина, лейцина и серина. Авторы работы [61] указывают, что хотя на этой НЖФ не делятся производные треонина и изолейцина, она предпочтительна для количественного анализа амиловых эфиров N-ТФАпроизводных аминокислот. Амиловые эфиры ТФАпроизводных цистеина, пролина, оксипролина, метионина, фенилаланина, аспарагиновой и глутаминовой кислот полностью разделяются при температуре 185° С только на колонке с 5% силикона MS,i [63]. [c.55]

Используя пленки с ионообменным слоем (см. табл. 9.5), Девении и др. [10] успешно разделили смесь 16 аминокислот описанный этими авторами метод можно также использовать, например, для быстрого анализа гидролизатов пептидов. Пленку в течение 3 ч приводят в равновесие с нитратным буферным раствором (0,004 н. раствор соли натрия, pH 3,2) и потом сушат при комнатной температуре. Стандартным раствором служит 0,1%-ный раствор смеси аминокислот (аргинин, лизин, гистидин, фенилаланин, тирозин, лейцин, изолейцин, метионин, валин, пролин, аланин, глицин, глутамовая кислота, треонин, серин и аспарагиновая кислота) в 0,01 н. соляной кислоте, ко- [c.129]

Растворы медного производного ДИДА, полученные при анализе пробы и свидетеля, колориметрируют на фотоэлектроколориметре и, определив их оптическую плотность, вычисляют концентрацию аминокислоты в пробе. Этим методом нельзя определить пролин и оксипролин. [c.217]

Смотреть страницы где упоминается термин Аминокислоты, анализ пролин: [c.279] [c.654] [c.523] [c.193] [c.135] [c.173] [c.208] [c.262] [c.313] [c.322] [c.205] [c.137] [c.519] [c.235] [c.98] [c.137] [c.261] [c.192] [c.63] [c.259]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология