Объем элюирования

Удерживаемый объем (объем элюирования) (У ) определяется [c.5]

Из этого уравнения ясно, что объем элюирования растворенного вещества с малыми размерами молекул складывается из свободного объема колонки У и объема растворителя, заключенного в порах неподвижной фазы У,. Молекулы большого размера, не попадающие в поры неподвижной фазы, элюируются из колонки вместе с подвижной фазой, дпя них 0 = 0, а Уц = У . [c.324]

Ионообменные макропористые смолы нашли применение и в жидкостной хроматографии неионных органических соединений, в частности для разделения различных дизамещен-ных бензолов. Большое влияние на объем элюирования компонентов и форму пиков оказывает степень сшивки и величины иона в смоле [117]. [c.21]

Объем элюирования также зависит от нагрузки и растворителя, используемого для растворения образца. [c.150]

Все растворенные вещества вымываются в сравнительно узком интервале объемов элюирования, соответствующем разности между свободным и общим объемами растворителя в колонке. Объем элюирования в этом интервале определяется тем же соотношением, которое было найдено для распределительной хроматографии, т.е. [c.108]

Объем элюирования, мл/число колонок [c.124]

Почти всегда в качестве детекторов используют дифференциальные рефрактометры, так как, если молекулярный вес больще 10 ООО показатель преломления не зависит от молекулярного веса и сигнал на выходе прямо пропорционален концентрации. Для проб, содержащих значительные количества веществ с молекулярным весом меньще 10 ООО, дифференциальный рефрактометр должен быть откалиброван. Объем элюирования может быть связан с молекулярным весом несколькими способами [c.126]

Объем элюирования (объемы по 5мл) [c.128]

Для низкомолекулярных веществ объем элюирования является функцией молярного объема, причем наблюдается линейная за- [c.129]

На рис. 111.36 показана зависимость логарифма удерживаемого объема кислорода от обратной абсолютной температуры, снятая в интервале 273—573° К. Характер наблюдаемой зависимости свидетельствует о протекании обычной физической адсорбции. В этом же диапазоне температур была снята зависимость количества элюированного кислорода от температуры угля (рис. 111.37). Объем пробы во всех опытах составлял 10 мл кислорода. Видно, что до 350° К объем элюированного из колонки [c.141]

ВЭТТ определяется как отношение высоты колонки к величине 16 (Vg/w) , где — объем элюирования от начала градиента концентрации КС1 до центра пика фермента, w — ширина пика фермента у основания. [c.83]

Гель-фильтрация восстановленных полипептидных цепей в 6М гуанидингидрохлориде позволяет производить оценки молекулярного веса в диапазоне 80000—1000 [147]. В поддиапазоне 40 000—10 000 точность метода 7% и на краях диапазона — 10%. В качестве среды для гель-фильтрации используют колонку Био-Гель А-5М с номинальным содержанием агарозы 6%. Определение молекулярного веса осуществляется по принципу сравнения с белками-маркерами известного молекулярного веса на полулогарифмическом графике зависимости молекулярного веса от коэффициентов распределения либо от где Ve — объем элюирования и Уо — исключенный объем (см. разд. 5.3 и 5.5). [c.427]

Калибровочную кривую строят по лейцину (0,05— 0,250 ммоль/мл) при трех разведениях (5, 10 и 15 мл) 60%-ным этанолом. Выход аминокислот рассчитывают по так называемым лейциновым единицам при помощи соответствующих коэффициентов (см. стр. 352). Для ускорения расчетов удобно пользоваться соответствующей таблицей. Содержание нингидринположительных веществ (аминокислот) в каждой фракции наносят на график по оси ординат против номера соответствующей фракции или объема элюата. В результате получают профиль элюирования, или хроматограмму. Объем элюирования (или, что то же самое, удерживаемый объем) каждого вещества, т. е. объем элюата от начала опыта до максимума данного пика, является вопроизводимой величиной и служит характеристикой данного вещества. Площадь пика пропорциональна количеству присутствующей в элюате аминокислоты. [c.315]

О — относительный объем элюирования (по отношению х объему элюирова- [c.378]

Предельный объем элюирования будет равен общему объему геля. В этом и заключается существенное отличие гель-хроматографии от других хроматографических методов, при которых анализируемые вещества обратимо задерживаются неподвижной фазой (см. предыдущий раздел). Поскольку рабочий объем геля (а следовательно, и объем разделения) всегда составляет лишь часть его общего объема, для разделения веществ, близких по молекулярному весу, часто желательно использовать очень больши колонки (см. табл. 14). Однако в этом случае появляется опасность сильного разбавления компонентов в процессе разделения. Значение этого обстоятельства для практики рассматривается в гл. П. Кроме того, очень длинные колонки сложны в обращении чисто технически. [c.110]

Объем элюирования молекулы зависит от доли времени, которое молекула проводит в неподвижной фазе. Определяется это вероятностью молекулярной диффузии в поры и, следовательно, в основном зависит от размера пор и молекулы. Благодаря тому что коэффиш-ент диффузии молекулы в неподвижной фазе не слишком отличается от коэффициента диффузии в подвижной фазе, время, необходимое для диффузии молекулы внутрь частицы неподвижной фазы и обратно, мало по сравнению с временем, в течение которого полоса растворенного вещества проходит мимо частицы. Поэтому разделение можно рассматривать как равновесный процесс. [c.112]

Во многих случаях достаточная информация может быть получена при сравнении хроматограмм различных образцов, но если необходимо опрсдсл 1ть молекулярновесовое рвспррпяление, то прибор следует прокалибровать, т.е. связать сигнал детектора с концентрацией И объем элюирования с молекулярным весом. [c.126]

Разделение в ЭХ основано на различии в дайне пути, который проходят в колонке молекулы разного размера. Заполнитель колонки (гель) имеет поры определенного размера. Если в разделяемом образце есть молекулы, размеры которых не позволяют им проникать в поры геля, эти молекулы проходят с потоком элюента только между частицами геля и выходят из колонки. Молекулы небольшого размера могут прошкать во все поры геля, путь их удлиняется, и они задерживаются в колонке большее время. И наконец, молекулы средних размеров проникают только в некоторые поры, иугь их оказьшается средним по длине, и они выходят из колонки между крупными молекулами, полностью исключающимися из пор геля, и молек лами, полностью проникающими в них. Область между исключением и . лолньш проницанием составляет область фракционирования геля, т. е. определяет те границы размеров молекул, которые могут подвергаться разделению на данном геле. Таким образом, одна из отличительных особенностей ЭХ - большие молекулы элюируются из колонки раньше, чем молекулы меньшего размера. Основным параметром, характеризующим разделение в ЭХ, является обьем элюирования или объем удерживания. В других методах ЖХ компоненты образца задерживаются в колонке и элюируются после неудерживаемого пика растворителя, т. е. объем элюирования компонентов образца больше объема подвижной фазы в колонке. В ЭХ компоненты образца частично (или полностью) исключаются из геля (заполнение колонки) и элюируются перед пиком растворителя, т, е. объем элюирования образца меньше объема подвижной фазы в колонке в этом другая особенность ЭХ. [c.72]

Хейли (61 изучил влияние природы растворителя иа молекулярную массу фракций, полученных при разделении окисленного битума и асфа.пь-тенов. В обоих случаях кривые зависимости среднечисловой молекулярной массы М от объема элюирования Vg отличались для разных растворителей. В ряду толуол, хлороформ, метилен, хлорид, диоксан + хлорсформ одному и тому же объему элюирования соответствовали все меньшие значения М Лишь в области малых масс (около 1000) кривые сближаются. Таким образом, чем сильнее растворитель, тем меньше молекулярная масса фрак-1ЩИ в высокомолекулярной части хроматограммы. В шзкомолекулярной части природа растворителя уже мало влияет на значение М, [c.80]

Построение калибровочной кривой по молекулярным массам препаративно вьщеленных фракций тяжелых нефтепродуктов хотя и трудоемкий, но наиболее доступный, распространенный и надежный метод калибровки. Определение молекулярной массы выделенных фракций проводят обычно методом парофазной и мембранной осмометрии [57, 73, 75—78 . Однако уже результаты первых исследований молекулярно-массового распределения битумов с помощью ЭХ [75] свидетельствовали о том, что одинаковый объем элюирования соответствует разным среднечисловым молекулярным массам дая различных битумов. Дальнейшие исетедования показали, что калибровочные кривые в координатах 1п М - Уе, полученные на основании анализа препаративно вьщеленных [c.84]

Объем элюирования макромолекулярного вещества прямо пропорционален концентрации аффинного лиганда, связанного с нерастворимым носителем, если концентрация растворимого аффинного лиганда постоянна. Кроме того, он обратно пропорционален концентрации растворимого аффинанта, если концентрация иммобилизованного аффинанта постоянна. Эти зависимости выражаются уравнением [c.45]