Элюирование пятен

Элюирование пятен с хроматограммы на бумаге [c.476]

Сущность тонкослойной хроматографии заключается в разделении в токе растворителя смеси веществ в тонком слое сорбента, нанесенного на пластинку. Согласно принятой терминологии, процесс разделения смеси растворителем называется проявлением, а растворитель проявителем. Распознавание вещества на проявленной хроматограмме называется обнаружением или идентификацией. Наиболее распространенным способом идентификации является окрашивание проявленных пятен индивидуальных веществ специфическими реагентами или элюирование пятен соответствующими растворителям.и. Другой характеристикой для идентификации окрашенных пятен является коэффициент или величина Rf, которая вычисляется по формуле [c.117]

АППАРАТУРА ДЛЯ ЭЛЮИРОВАНИЯ ПЯТЕН [c.70]

Количественный анализ. Успешное использование качественного анализа методом хроматографии на бумаге поставило вопрос о возможности разработки количественной хроматографии неорганических веществ. Количественный анализ можно в принципе проводить двумя способами. После разделения смеси анализ проводят или на бумаге, или же после элюирования пятен с бумаги соответствующим растворителем. [c.90]

Тонкослойная хроматография находит все большее применение для количественного определения углеводов. Этот метод чрезвычайно полезен при изучении кинетики реакций, исследовании их механизма и определении выхода продуктов, однако он применим лишь для анализа смесей, компоненты которых можно полностью разделить. Способы количественного определения делят на две большие группы а) прямое определение (установление количества вещества непосредственно на пластинке) б) косвенное определение (элюирование пятен вещества с последующим анализом элюата физическими методами) [1]. [c.46]

ФТГ-Производные можно идентифицировать хроматографированием на бумаге [92, 186, 288] и на распределительной колонке [290]. Последний метод пригоден для количественных определений, но можно выполнять также быстрые полуколи-чественные определения путем элюирования пятен хроматограмм на бумаге. Пятна проявляются иод-азидным реактивом, специфичным на двухвалентную серу, а при количественных определениях обнаруживаются по сильному поглощению в УФ-области ФТГ-производных [92]. [c.242]

Кетокислоты в растительных продуктах можно определить методом распределительной хроматографии на бумаге, разработанным И. А. Егоровым и М. Б. Борисовой для анализа кетокислот в вине. В основу этого метода положена реакция образования гидразонов кислот при взаимодействии их с фенилгидразином. Гидразоны разделяют с помощью бумажной двухмерной хроматографии. Количество гидразона каждой отдельно выделенной кетокислоты, в том числе и пировиноградной, определяется после элюирования пятен в фотоэлектроколориметре по цветной реакции гидразона с NaOH. Р. Я- Школьник (1954) разработал метод количественного разделения органических кислот с помощью распределительной хроматографии иа силикагеле. Этот метод применяют для разделения кислот, находящихся в растительных тканях. Разделение кислот ведут на хроматографической колонке. Элюируемые кислоты титруют 0,01 н. спиртовым раствором NaOH. [c.215]

Пластинки с идентифицированными пятнами фосфолипидов фотографировали способом контактной печати (см. стр. 32). Количественное содержание этих веществ измеряли или при помощи денситометра, или элюированием пятен для определения содержания в них фосфора, которое в дальнейшем пересчитыйа-лось на фосфолипиды. [c.31]

Пурины и пиримидины. Окончательное разделение и очистка оснований осуществляется одномерной хроматографией на бумаге (ватманская фильтровальная бумага № 1). Для этого существует несколько типов распределительных сред н-бутиловый спирт и гидроокись аммония пригодны в тех случаях, когда отсутствует гуанин в присутствии гуанина хорошие результаты получаются при использовании смеси изонронанола и соляной кислоты (Linskens, 1959). Места пятен определяют с помощью ультрафиолетового света. Количественный анализ заключается в элюировании пятен и спектрофотометрическом измерении. [c.28]

Хроматографический метод может быть завершен количественным определением после элюирования пятен hj бумаги — фотоколориметрическим или спекрофотомет-рическим методами. [c.123]

Разделение и определение салицилсалициловой кислоты в салициловой кислоте осуществляли методом ТСХ на оксиде алюминия О, применяя 0,1 н. раствор соляной кислоты в абсолютном этаноле [66]. Количественный анализ завершали элюированием пятен и спектрофотометрическим промером элюата в УФ-области. [c.396]

Генест и Фармило [150] использовали метод ТСХ для обнаружения и определения диэтиламида лизергиновой кислоты в присутствии героина или других официально проверяемых лекарственных веществ. После элюирования пятен проводили спектрофотофлуориметрический анализ. Изучая возможность идентификации лизергиновой кислоты среди 14 родственных алкалоидов спорыньи, включенных в список запрещенных лекарственных веществ, Фаулер и др. [151] обнаружили, что ни один индивидуальный растворитель из 18 исследованных не может обеспечить отделение лизергидов от других алкалоидов. [c.442]

Котсис и Гери [82, 83] описали методику разделения и идентификации красителей для губной помады на слоях силикагеля (адсорбосил-1), закрепленных кальцием. Красители экстрагировали из губной помады смесью 3 частей бензола и 1 части ацетона образцы помады кипятили с этой смесью в колбе с обратным холодильником. Для разделения использовали смеси растворителей трех видов бензол—метанол—гидроксид аммония (65 30 4), бензол—н-амиловый спирт—концентрированная соляная кислота (65 30 5) и бензол—н-пропанол—гидроксид аммония (6 3 1). Для количественной оценки проводили элюирование пятен и определяли поглощение элюата на спектрофотометре. [c.23]

Для качественного и количественного определения каптана (I) и фталана (II) использован метод тонкослойной хроматографии. Для извлечения препаратов при--меняют С,П, и проявляют AgNOз и УФ-светом. каптана 0,3—0,35 фталана 0,55). Количественный анализ основан на реакции с резорцином и проводится после их хроматографического разделения и элюирования пятен с пластинки бензолом. [c.160]

Разделение 4-окси-3,8-диметоксибензальдегида, п-оксибензальдеги-да и ванилина хроматографией на бумаге. Эти три альдегида, являющиеся продуктами окисления лигнина нитробензолом в щелочной среде, могут быть разделены методом хроматографии на бумаге. В качестве растворителя используют верхнюю фазу смеси петролейного эфира (т. кип. 100—120° С), н-бутилового эфира и воды (6 1 1). Вещества располагаются в указанной в заголовке последовательности в соответствии с увеличением значений Яр. Количественное определение производят спектрофотометрически после элюирования пятен зз. [c.902]

Повторным разделением в последнее время пользуются часто, особенно в круговой хроматографии (рис. 58). Удобно применять его также и для препаративных це гей, где резкая ограниченность зон имеет большое значение д,яя элюирования пятен с бумаги (Гири [1J). Преимущество повторного разделения ио сравнению с хроматографией с перетеканием состоит в том, что веи1,ества с высокими значениями ii, не удаляются с бумаги, а в конце концов образуются концентрированные пятна, что особенно удобно для количественного анализа in situ. Определенное неудобство заключается в большей затрате активного рабочего времени по сравнению с разделе- [c.132]

Целесообразность разделительных систем ТСХ с многокомпонентными проявителями, полярность которых сильно различается, намного более проблематична хотя бы только из-за фронтального разделения проявляющей жидкости. В этом случае состав проявляющей жидкости и состав фаз, необходимый для элюирования пятен, можно определить только очень приближенно. Чем больше компонентов содержит проявляющая жидкость в ТСХ, тем меньше имеет смысл переносить результаты разделения, проведенного этим методом, на колоночную хроматографию. Данные колоночной хроматографии следует дополнять данными ТСХ. Так, основываясь на результатах разделения ТСХ, очень просто установить, можно ли элюировать все компоненты с помощью выбранного элюента (в стартовом пятне не остается никакой пробы ). Благодаря разнообразию реагентов для обнаружения такое решение можно принять относительно просто. При использовании селективных реагентов по меньшей мере получают дополнительную информахщю о составе пробы. [c.222]

Первоначально в методе Эдмана тиогидантоины подвергали щелочному гидролизу для освобождения аминокислот, которые идентифицировали хроматографией на бумаге [129]. Аргинин и триптофан давали по два пятна, что затрудняло идентификацию. Сёквист [131] преодолел эту трудность, применив непосредственную хроматографию фТГ на бумаге и обнаруживая зоны реакцией с иодом и азидом [132]. Эдман и Сёквист [133] разработали количественный метод элюирования пятен ФТГ с последующим определением их ультрафиолетового поглощения при 270 ммк. [c.154]

Проблемы, возникающие при количественном определении моносахаридов в присутствии большого количества аминокислот, обсуждаются в гл. 8 (том 1). В табл. приведены результаты определения содержания углеводных компонентов в препаратах а -кислого гликопротеипа, полученных из одного и того же источника разными методами. Обнаруженные расхождения, возможно, отчасти обусловлены истинными различиями между препаратами, однако, более вероятно, что они объясняются отличиями в использованных методах исследования. При изучении химической структуры -кислого гликопротеипа особый интерес представляет определение количественного соотношения маннозы и галактозы. Это соотношение варьирует от 1 1 до 1 2. Неопубликованные результаты опытов, проведенных в лаборатории автора доктором А. М. Клоссом, показали, что эти расхождения зависят только от применяемых методов. Сравнивались два метода разделение на смоле дауэкс-1 [311 и хроматография на бумаге с последующим окрашиванием фосфатом анилина и элюированием пятен. Оба метода дали правильные результаты при проверке их на стандартной смеси, но при изучении одного и того же гидролизата -кислого гликоиротеина было получено отношение маннозы к галактозе, равное 1 1 и 1 2. [c.80]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология