Хроматография двухмерная

Для разделения аминокислот, образовавшихся в результате гидролиза полипептида, еще Э. Фишер предложил использовать фракционную вакуумную перегонку их эфиров. Этот метод требует сравнительно большого количества вещества. В самое последнее время он, однако, вновь становится очень актуальным, так как газовая хроматография позволяет разделить ничтожные количества смеси эфиров аминокислот. Широкое применение для разделения смесей аминокислот нашла за последние годы бумажная хроматография. Если требуется определить качественный состав смеси аминокислот, то проводят двухмерное хроматографирование на листе бумаги и проявляют хроматограмму нингидрином, причем каждая аминокислота дает окрашенное пятно. [c.384]

По приведенным ниже значениям Rf для двух растворителей построить двухмерную хроматограмму. Какие из указанных веществ не разделяются при одномерном хроматографировании с использованием двух растворителей Какие вещества пе разделяются методом двухмерной хроматографии [c.221]

Для каких целей применяют двухмерную хроматографию на бумаге [c.229]

Для лучшего разделения соединений с близкими значениями R , а также для увеличения часто проводят хроматографирование в нескольких (обычно двух) системах растворителей, пропуская второй растворитель в том же направлении, что и первый. Это приводит к уплощению пятен разделяемых соединений в направлении, перпендикулярном пропускаемому растворителю, и способствует их лучшему разделению. Более полное разделение аминокислот и пептидов достигается при двухмерной хроматографии (второй растворитель пропускают в направлении, перпендикулярном первому) или при сочетании хроматографии (одно направление) и электрофореза (второе взаимно перпендикулярное направление). Последний метод носит название метода пептидных карт или отпечатка пальцев . [c.126]

Разделение аминокислот мышечной ткани проводят методом двухмерной восходящей хроматографии во взаимно перпендикулярных направлениях. [c.143]

И г препарата. Общий выход составляет 52%. Методами двухмерной бумажной хроматографии и радиоаутографии показано, что в полученном препарате содержится только одно вещество, содержащее меченый углерод (примечание 9). [c.230]

При синтезе меченого лизина выход в расчете на вступивший в реакцию цианид-С составлял 21 или 38%. При помощи двухмерной бумажной хроматографии в продуктах реакции не было обнаружено 2-аминоадипиновой кислоты. [c.311]

При необходимости достигнуть лучшего разделения анализируемых смесей веществ методами хроматографии на бумаге и в тонком слое сорбента можно применять специальные приемы хроматографирования — повторное и двухмерное. [c.105]

Двухмерную хроматографию с использованием одной и той же подвижной фазы часто применяют для проверки устойчивости веществ в условиях хроматографирования. Устойчивые вещества образуют пятна, лежащие только на диагонали пластинки или листа бумаги. [c.105]

Первое теоретическое описание двухмерного динамического процесса. соответствующего тонкослойной хроматографии, было дано в 1967 г. Беленьким с соавт. [19]. Такой подход рассматривается в приводимом далее разделе (читатели, менее заинтересованные в теории ТСХ. могут этот раздел пропустить). Вопрос освещен с достаточной степенью упрощения (что можно только приветствовать) и весьма доходчиво. [c.75]

В двухмерном варианте тонкослойной хроматографии образец наносят (в виде единственного пятна) в "нижний правый" угол пластинки (рис. 98). после чего проводят обычное элюирование растворителем А. Пятно смещается вдоль правого ребра пластинки. После этого элюирование повторяют (обычно пользуясь другим растворителем) в перпендикулярном направлении. Компоненты образца располагаются не вдоль линии гг-го, а идеально распределяется по всей площади (гг-а) . Пространство, на котором распределяются разделенные вещества, оказывается увеличенным возведением в квадрат. Это дает возможность иногда прибегать к сокращенному обозначению метода (ТСХ) , поскольку число разделений тоже возрастает, примерно до (SN) . [c.274]

Рнс. 99. Схема установки для двухмерной хроматографии (показан разрез в горизонтально плоскости). [c.279]

Рнс. 101. Схема установки для двухмерной хроматографии. Показан вертикальный разрез в поперечном направлении. [c.280]

Рис. 38 Пример разделения смеси веществ по варианту восходящей двухмерной хроматографии.

В бумажной хроматографии носителем служит фильтровальная бумага. Фильтровальная бумага в качестве носителя имеет ряд преимуществ меньшую адсорбционную способность, равномерность материала, листообразную форму, пригодную для двухмерной хроматографии возможность разделения веществ в количествах очень малых (микрограммы). Неподвижной фазой служит воздушно-сухая бумага, содержащая 25% воды. В качестве подвижной фаз1Л [c.254]

Ключевую роль в этом исследовании сыграло сочетание методов двухмерной хроматографии на бумаге и радиоавтографии (дополнение 2-В). Суспензия водоросли hlorella (рис. [c.477]

Чистоту полученной кислоты контролируют при помощи двухмерной бумажной хроматографии и радиоаутографически (см. метод II). [c.126]

К раствору 10 Л молей неочищенной хлоруксусной-1-С кислоты в 20 мл воды медленно прибавляют 4—5 г карбоната кальция. Затем смесь нагревают с обратным холодильником на паровой бане в течение 2.5 дней. После этого реакционную массу фильтруют горячей и фильтрат (без промывных вод) выдерживают в холодильнике не менее 24 час. Выпавшее кристаллическое вещество отделяют, промывают абсолютным спиртом и сушат в вакууме. Оставшийся карбонат кальция тщательно промывают горячей водой. Фильтрат концентрируют до объема 5—7 мл и помещают в холодильник. Из него выкристаллизовывается вторая порция кристаллов (примечание 2). Первые две порции содержат только радиоактивное вещество. Данные, полученные методами двухмерной хроматографии и радиоаутографии, свидетельствуют о том, что в двух первых порциях содержится только одно радиоактивное соединение (примечание 3), Выход 65% в расчете на ацетат-1- натрия (примечание 4), [c.136]

КИПЯТЯТ С обратным холодильником в течеиие 24 час. на паровой бане. Минеральную кислоту удаляют в вакууме, причем последние следы ее удаляют, добавляя к остатку четыре порции воды по 60 мл. Оставшуюся хлористоводородную соль кислоты (примечание 4) растворяют в нескольких миллилитрах воды, и равные порции пропускают через 2 колонки (200 X 15 мм), содержащие 60 мл ионообменной смолы дауэкс-50 в Н-форме. Колонки промывают 300 мл воды и затем элюируют 300 мл 2 н. раствора гидроокиси аммония и промывают 800 мл воды. Элюаты и промывные воды объединяют и упаривают досуха, а остаток перекристаллизовывают из водного спирта. Маточные жидкости после получения второй порции валина упаривают досуха, а остаток возгоняют в вакууме, получая в результате третью порцию валина. Выход очищенного вещества 1,196 г, что в расчете на цианистый калий составляет 51,4 /о. Анализы, проведенные методами двухмерной бумажной хроматографии и радиоаутографии, свидетельствуют о том, что полученное вещество гомогенно (примечание 5). [c.200]

Л1МОЛЯ (74,57о), радиохимический выход 70,5% (примечание 4). Методами двухмерной бумажной хроматографии и радиоаутографии показано, что полученное вещество не содержит примеси других аминокислот и радиоактивных соединений. [c.201]

К 3 Л1У1 0,5 М эфирного раствора алюмогидрнда лития [I] прибавляют при перемешивании раствор 0,022 г амида пировино-градной-2- кислоты в 10 мл абсолютного эфира с такой скоростью, чтобы поддерживалось слабое кипение с обратным холодильником. Смесь нагревают с обратным холодильником в течение 4 час., выдерживают в течение ночи, концентрируют до объема 3—5 мл, затем обрабатывают 10 мл безводного хлороформа и вновь испаряют. Смесь нагревают с обратным холодильником в течение 4—5 час. с 0,6—0,7 мл хлорокиси фосфора в 10 мл хлороформа, затем выдерживают в течение ночи и разбавляют 15 Л1Л воды. Хлороформ испаряют на паровой бане, нагревают водный раствор при 100° в течение 2 час. (примечание 2), охлаждают и с помощью 10 н. раствора едкого кали доводят pH среды до 7. Раствор нагревают при перемешивании при 100° в течение 5 мин. с 12—14 мл 1 /М раствора ацетата бария (примечание 3). Фосфат бария отделяют центрифугированием и пять раз промывают водой (порциями по 25 Л1уг) (примечание 4). Промывные воды объединяют и пропускают раствор через колонку (высота 20 см, диаметр 2 см) с ионообменной смолой дауэкс-50 (Н-форма), которую затем пять раз промывают водой (порциями по 10 мл). Элюат объединяют и концентрируют в вакууме при комнатной температуре до объема 5 ма (примечание 5) и очищают продукт реакции методом двухмерной нисходящей хроматографии на бумаге (примечание 6), причем в качестве растворителей используют следующие смеси изопропиловый спирт — концентрированный раствор аммиака — насыщенный водный раствор версена (6 2) изопропиловый спирт — насыщенный водный раствор версена — 2 М раствор хлоруксусной кислоты (7 2 1). Общий выход продукта 25—39% в расчете на амид пировииоградной кислоты (примечание 7). [c.544]

После удаления кислот путем пропускания водного раствора через колонку с довексом-2, они исчерпывающе экстрагировали элюат эфиром и подвергали эфирный экстракт двухмерной хроматографии на бумаге. Растворителями служили бутанол — аммиак — вода (45 5 50, нисходящий метод) бутанол — уксусная кислота — вода (4 1 5, восходящий мегод) бензол — петролейный эфир (точка кипения 40—70° С) — метанол — вода (5 5 1 5, органическая фаза, восходящий метод) бутанол — аммиак — вода (восходящий метод). [c.445]

Смесь 6,0 г (20 лшолей) Ы-окиси морфина (примечание 1) и метилата натрия, полученного из 0,46 г (20 имолей) натрия в 20 мл абсолютного метилового спирта, замораживают жидким азотом и к ней прибавляют 2,22 г (15,6 л1молей) йодистого ме-тила-С путем вакуумной перегонки (примечание 2). Смесь нагревают с обратным холодильником на паровой бане в течение 4 час. К охлажденной смеси добавляют 5 мл воды и через раствор пропускают сернистый газ в течение 1 часа. Добавляют 30 мл воды и отгоняют метиловый спирт при пониженном давлении. Остаток обрабатывают 10 мл 6 н. раствора едкого натра (для растворения морфина) и экстрагируют кодеин хлороформом дважды порциями по 25 мл и четыре раза порциями по 10 мл. Экстракт промывают водой (две порции по 10 мл), сушат карбонатом калия, фильтруют и выпаривают досуха. Кодеин растворяют в минимальном количестве бензола и добавляют петролейный эфир до прекрашения появления мути желтовато-оранжевого цвета. Примеси отфильтровывают, добавляют к фильтрату избыток петролейного эфира и выдерживают смесь в холодильном шкафу для полного осаждения кодеина. Твердое вещество отделяют (т пл. 155°), а маточный раствор вновь обрабатывают для получения дополнительного количества продукта. Кодеин растворяют в небольшом количестве абсолютного спирта, и для высаживания продукта насыщают раствор сухим хлористым водородом. Упаривают смесь досуха на паровой бане, перекристаллизовывают продукт из 95%-ного спирта, отделяют, промывают холодным абсолютным спиртом и сушат. Общий выход 3,65 г (62,8%). Молярная удельная активность не отличается от активности исходного соединения (примечание 3). Анализ [1] методом двухмерной бумажной хроматографии и радиоаутографии указывает на присутствие только одного радиоактивного соединения, [c.640]

Методы разделения с применением тонкослойной хроматографии иногда могут быть усовершенствованы путем многократного хроматографирования (хроматограмме дают высохнуть и вновь хроматографируют в той же системе), непрерывного хроматографирования (подвижная фаза непрерывно испаряется с верхнего края поверхности адсорбента) или двухмерного хроматографирования (хроматограмме дают высохнуть, повопачивают под прямым углом и затем вновь хроматографиоуют, часто в иной системе растворителей, чем та, что была использована первоначально). Юднако интерпретировать результаты хроматографии, если используются такие процессы промежуточного высушивания, надо с осторожностью, так как во время хроматографирования на пластинке может происходить разрушение вещества, например вследствие окисления. Методика двухмерной хроматографии имеет особую ценность для заключения о химических изменениях, происходящих в процессе хроматографирования. Если смесь вначале хроматографируют в одном направлении, а затем под прямым углом в той же системе растворителя, пятна, соответствующие разделенным веществам, будут лежать на пластинке по диагонали при условии, что не возникнет никаких артефактов. [c.95]

Еще более точные результаты получаются при помощи так называемой двухмерной хроматографии на бумаге. Для этого варианта применяют не полоски фильтровальной бумаги, а прямоугольники размером примерно 400x500 мм. Каплю исследуемого раствора наносят вблизи одной из вершин прямоугольника, а хроматограмму проявляют дважды различными растворителями, например фенолом и коллидином, сперва одним растворителем, а затем, после поворота на 90°,—другим. [c.234]

Метод тонкослойной хроматографии чрезвычайно широко используется в анализе 1,4-бенздиазепинов. В качестве неподвижной фазы обычно применяется силикагель или окись алюминия. Для разделения метаболитов бенздиазепинов достаточно одномерной хроматографии, а в особых случаях следует использовать двухмерную. [c.222]

Хигучи [60] подвергал гидролизу по Гольдшмиду 50 г предварительно экстрагированного бамбука, нагревая его с 500 мл воды в течение 1 ч при 175° С. Он исчерпывающе экстрагировал фильтрат эфиром и подвергал эфирный остаток двухмерной хроматографии, применяя смесь бензола— лигроина — метанола — воды (50 50 1 50 по объему) и бутанол, насыщенный 3%-ным раствором гидроокиси аммония в качестве растворителей. По этому способу он обнаружил /г-оксибензальдегид, ванилин, синаповый, л-оксикоричный и сиреневый альдегиды. [c.446]

Бланд [10] использовал для разделения лигнина двухмерную хроматографию на простой бумаге, а также бумаге, пропитанной тетраборатом натрия (ср. Бланд [9]) и смеси изобутанол—бензол — вода (1 9 10), метанол—вода (1 1). Он разделил лигнин, выделенный из Eu alyptus regnans, метанолом при 150° на трп лигнинных вещества с величиной R/, равной 0,00—0,99 (изобутанол — бензол — вода) и 0,7 (метанол — вода). Все было сделано на бумаге, пропитанной боратом, восходящим методом. [c.524]

Применяя растворитель I, можно разделить таллий, индий и алюминий методом одномерной хроматографии, а применяя растворитель И, можно разделить таллий, индий и галлий [286а . Возможно также разделение индия, бериллия, ванадия и галлия (скандия, циркония) методом двухмерной хроматографии с использованием растворителей I и V. [c.92]

Перемещение зон н размывание пятен в тонкослойной хроматографии характеризуются двухмерным процессом (в то время как аналогичное перемещение зон в газовой или жидкостной колоночной хроматографии представляет собой одномерный процесс). Кроме того, если рассматривать взаимодействие с молекулами растворителя, ситуация оказывается еще даже более сложной, поскольку приходится учитывать взаимодействия газовой фазы со слоем в обычной камере. До 1975 г. объем информации о механизмах размывания зоны и зависимости размывания от эффективности слоя был весьма незначительным, но позднее в целом ряде научных статей (в частности, статей Гиошона с соавт. [20-25]) этот сложный вопрос был прояснен и было выявлено несколько основных взаимосвязей. Однако по каждому из вопросов еще не сделано окончательных выводов и еше достаточно скудно количество опубликованных экспериментальных данных, подтверждающих высказанные теоретические предпосылки. Несмотря на то, что тонкослойная хроматография представляет собой "простейший из хроматографических методов, теория размывания зоны оказывается наиболее сложной и меньше всего разработана. Осложнение обусловливается, главным образом, тем фактом, что в ТСХ (в отличие суг случаев ГХ или КЖХ) скорость подвижной фазы (растворителя) не постоянна во время хроматографического разделения и на нее нельзя повлиять (если не считать варианта разделений, выполняемых под давлением). Тем не менее большинство теоретических предпосылок в ТСХ [c.74]

Метод двухмерной хроматографии в плоском слое был предпсжен в 1944 г. Кондсено, , Гордоном и Мартином [91]. Им удалось разделить 15 из 22 аминокислот на бумаге в течение (27+48) ч. С того времени появилось свыше 200 публикаций о применении такого двухмерного метода. Тем не менее в усовершенствовании этого подхода еще не сделано каких-то крупных достижений. Основная причина обусловлена тем. что положению веществ в двухмерном слое относительно трудно дать числовую оценку не могут [c.274]

Двухмерная "колоночная" тонкослойная хроматография. Такой подход соответствует попытке воспользоваться предложенным Тихаком принципом обеспечения принудительного потока в тонкослойной хроматографии [c.277]

Представление о потенциальных возможностях трехмерной тонкослойной хроматографии дают следующие сопоставительные данные (которые в равной степени характеризовапн бы и трехмерный вариант колоночной жидкостной хроматографии) для скорости около 3 см/с через слой частиц с размерами 5 мкм при толщине слоя в 10 см (соответственно данным, подсчитанным Гиошоном с соавт [93]) числа разделений (нагрузочная емкость, оцениваемая по количеству пиков) составляет около 50 в одномерной тонкослойной хроматографии (под давлением), 1200 в двухмерной тонкослойной хроматографии или около 27000 в трехмерном варианте (тонкослойной или колоночной жидкостной хроматографии) при давлении около 25 атм. При употреблении сорбента с размером частиц 15 мкм, соответствующими окажутся следующие цифры 30, 400, 5300 и 0.8 атм. [c.285]

Ппвпды против 1) умеренная потеря разрешающей способности (для веществ, характеризующихся почти одинаковой степенью удерживания) в диапазоне высоких значений Кг 2) относительно низкая скорость потока при гг - а 4 см (если не повышена приложением давления) 3) метод не так прост и доступен, как линейное элюирование 4) относительно мало число одновременно анализируемых образцов (5-10) 5) не может быть реализован двухмерный вариант тонкослойной хроматографии. [c.289]

Элюирование в тонком слое обычно рассматривают как двухмерный процесс. Именно такому случаю соответствуют модели Беленького и Гиошона, рассмотренные в гл. II. Однако в отличие от условий, характерных для колоночной жидкостной хроматографии, в хроматографическом процессе, реализуемом в камере для ТСХ, очень важную роль играет газовая фаза. В главе, посвященной "активности" сорбента, уже было описано, насколько сухая поверхность адсорбента может быть "занята" сорбированными молекулами воды и, соответственно, дезактивирована. Аналогичным образом, помимо сорбционной способности к воде сухой слой сорбента обладает и способностью насыщаться (перед началом элюирования) находящимися в газовой фазе молекулами растворителя, неизбежно присутствующими в окружающей пластинку атмосфере, более или менее насыщенной парами растворителя камеры. И, наконец, жидкость, поднимающаяся по слою за счет действия капиллярных сил, тоже может взаимодействовать с газовой фазой. Находящиеся в газовой атмосфере молекулы растворителя оказывают влияние на взаимодействие сорбента с растворителем, сорбента с водой, сорбента с водой и растворителем, воды с растворителем, растворителя с растворителем, не говоря уже о взаимодействиях, в которые вовлечено растворенное вещество. [c.87]

Техника лабораторной работы в органической химии (1952) -- [ c.234 ]

Техника лабораторной работы в органической химии (1963) -- [ c.301 , c.302 ]

Техника лабораторной работы в органической химии Издание 3 (1973) -- [ c.288 , c.289 ]

Методы практической биохимии (1978) -- [ c.71 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология