Метод денситометрии

В ряде случаев целесообразно количественно анализировать разделенные элементы непосредственно на хроматограмме методом денситометрии, так как плотность окраски пятен пропорциональна содержанию веществ в зоне. Это значительно ускоряет ход анализа. [c.187]

Применение методов денситометрии, флуориметрии и спектро-фотометрии для количественного определения компонентов смесей различных органических соединений, разделенных тонкослойной хроматографией, хорошо освещено в обзорных работах [252, 263, 272, 276, 278]. [c.158]

Перед сканированием с помощью денситометров необходимо бумагу промаслить парафином. Это делается для уменьшения рассеивания света и для того, чтобы окрашенное производное принимало участие в изменении потока лучистой энергии по всей толщине слоя. Более подробное описание использования метода денситометрии дано в работе [19]. [c.266]

Один из наиболе удобных и чувствительных методов количественного определения веществ в зонах хроматограмм — метод денситометрии. Он позволяет сравнительно просто определить наномолярные количества вещества с точностью 1—2°/о- Это прямое определение концентрации производного в зоне хроматограммы является одним из видов абсорбциометрии. Хроматограмму сканируют лучом или пятном монохроматического света и измеряют фотоэлектрическим методом долю отраженного бумагой или проходящего через [c.45]

При постоянном отношении полезного сигнала к шуму уменьшение площади зоны дает положительный эффект для однолучевой денситометрии. Для двухлучевой денситометрии и флуориметрии при этих условиях предел определения уменьшается с увеличением площади зоны за счет повышения точности интегрирования. Уменьшение толщины слоя сорбента по-разному сказывается па изменении предела определения веществ методами денситометрии и флуориметрии. [c.87]

При исследовании [722] применимости метода ЯМР для определения содержания в полипропилене синдиотактических структур были получены результаты, недостаточно хорошо согласующиеся с данными, полученными другими методами, например методом денситометрии. Это, возможно, обусловлено тем, что по методу ЯМР синдиотактическая конфигурация метильных групп фиксируется даже при отсутствии блоков в полимерной цепи. Было проведено определение содержания синдиотактических групп в ряде полипропиленов. Спектры ЯМР образцов, растворенных в о-дихлорбензоле, регистрировались при 170°С на частоте 100 МГц. Спектры синдиотактических и изотактических образцов характеризуются параметрами, которые приведены на следующей странице (стр. 194). [c.193]

Токоферолы обнаруживают в виде соответствующих хинонов [565]. Реакция окисления протекает легко, причем образующиеся окрашенные зоны пригодны для количественного определения веществ с помощью методов денситометрии [562]. Эту реакцию проводят путем опрыскивания пластинок раствором трихлоруксусной кислоты, содержащей ионы Се +, с последующей нейтрализацией кислоты парами аммиака [562] или 2,6-дихлор-п-бензохинон-4-хлорамином (реагентом Гиббса) [566] либо просто путем нагревания пластинок на воздухе при 110°С в течение 18 ч [567]. Сами по себе продукты окисления можно хроматографировать на силикагеле в бензоле или в системе легкий петролейный эфир — диэтиловый эфир —ацетон (94 5 1) [568]. [c.265]

Количество белка, которое можно определить методом денситометрии, зависит также и от длины волны, применяемой при сканировании [107]. Так, например, при длине волны 550 нм, т. е. в той области, где чувствительность детектирования максимальна, это количество находится в пределах О—15 мкг, тогда как при длине волны 400 или 500 нм оно должно быть в три раза больше. [c.270]

После электрофореза в агарозном геле, так же как после электрофореза в других гелях, разделенные компоненты обнаруживают путем окрашивания различными красителями или методами денситометрии в УФ-свете. Поскольку высушивание агаровых гелей не представляет трудности, в УФ-свете можно получать контактные отпечатки с высушенных пленок геля. [c.370]

Окрашивание комплексом серебра с последующим тонированием [23J Интенсивность окрашенных полос белка может быть увеличена в 7— 10 раз с помощью описываемой ниже обработки. Оценка методом денситометрии показала, что линейность зависимости интенсивности окраски от концентрации белка сохраняется в диапазоне 0,05—1,7 пмоль/мм . [c.310]

Пластинку для ТСХ размером 20x20 см, содержащую хроматограммы пяти стандартов и десяти образцов, можно оценить с помощью метода денситометрии менее чем за 10 мин. Однако в этом случае уже необходим более дорогой прибор. [c.170]

Методом денситометрии измеряется суммарная функция площади пятна и его интенсивности. Это означает, что начальная плошадь нанесенного пятна больше не является таким критическим параметром, как в двух предыдущих методах, хотя следует все-таки заботиться о том, чтобы площади пятен были одинаковыми. Факторы, влияющие на площадь окончательного пятна, влияют и на его интенсивность, но противоположным образом. Голдман и Гуцол /28/рассмотрели теоретические основы денситометрии, которая базируется на теории Кубелки - Мунка, описывающей взаимодействие света с беспорядочно распределенным поглощающим веществом, и пришли к выводу, что проводить измерения предпочтительнее в проходвшхем свете, чем в отраженном. [c.171]

Естественным расширением методов денситометрии и флуоримет-1ИИ является возможность записать спектры ультрафиолетового поглощения, ультрафиолетовой флуоресценции и поглощения в видимой области спектра разделенных вешеств непосредственно на слое. Преимущество такого метода заключается в том, что неразделенные вещества, например стереоизомеры, можно определить в присутствии i pyr друга, если их спектры существенно отличаются. Подходящие [c.175]

Кроме масс-спектроскопии, существует и ряд других методов анализа стабильных изотопов, а имепио эмиссионная спектроскопия, оптические методы, денситометрия, ЯМР и т. д.— Прим. ред. [c.201]

Метод денситометрии — один из высокочувствительных и удобных, позволяющий быстро определить наномолярные количества вещества с точностью 1—2%. [c.266]

Индивидуальные сапонины подвергали кислотному гидролизу. Исследования генинов проводили общепринятыми методами, моносахариды идентифицировали совместной хроматографией на бумаге в нескольких системах с заведомыми образцами. Для количественного исследования углеводной части сапонинов был применен метод денситометрии хроматограмм. [c.47]

Измерение интенсивности окраски сахара или продуктов его распада непосредственно на хроматограмме производится методом денситометрии [10—16]. Ввиду того что сами сахара не окращены, их обрабатывают реактивом, вызывающим появление окращенного пятна на фоне слоя сорбента. Цвет последнего, как правило, не изменяется (белый). Если сорбент все-таки окрашивается, необходимо, чтобы окрашивание было равномерным и настолько отличалось от цвета пятен анализируемых вещств, чтобы при использовании подходящих фильтров сорбент можно было рассматривать как бесцветный фон. Пятна должны иметь четко очерченные границы и не должны выцветать. Даллас [3], а также Шеллард и Алам [4] подробно рассмотрели факторы, влияющие на точность и воспроизводимость результатов анализа. Кроме того, было проведено сравнение методов обугливания, используемых для денситометрического определения сахаров [17]. [c.47]

Битман и др. [689] разработали метод ТСХ для анализа липидов крови, молока, яичного желтка и других тканей, приводящий к быстрому и воспроизводимому разделению, после кото-poro можно сразу провести количественную оценку методом денситометрии. Авторы использовали двухступенчатое разделение сначала в системе хлороформ — метанол — уксусная кислота (98 2 1) до достижения фронтом растворителя отметки 16 см, затем в системе гексан — диэтиловый эфир—уксусная кислота (470 30 1) до прохождения растворителем 20 см. Перед карбонизацией пластинку погружали в 3%-ный раствор ацетата меди в 8%-ной фосфорной кислоте на 3 с. [c.205]

Количественное определение сахаров на хроматограмме можно провести методом денситометрии. Так, например, описан способ оценки содержания сахаров в клинических анализах крови и мочи при концентрациях до 10 мкг/мл с точностью 2—3,5% [394]. При препаративной хроматографии на бумаге зоны, соответствующие разделяемым соединениям, вырезают и элюируют водой или 50%-ным этанолом. В результаты любых определений углеводов, выделенных таким образом, следует вносить поправку на присутствие следов целлюлозного материала из бумаги, количество которого можно оценить после элюирования в тех же условиях пустого образца бумаги тех же размеров, что и хроматографическая зона. [c.62]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология