Метод ультрафиолетовой флуоресценции

Люминесцентный, или флуоресцентный, метод анализа основан на измерении интенсивности излучаемого веществами видимого света (флуоресценции) при облучении их ультрафиолетовыми лучами. [c.28]

Г. Оптические методы анализа. Оптические методы анализа реагирующей смеси во многих случаях оказываются весьма удобными. В качеств оптических свойств, характеризующих систему, можно использовать поглощение при какой-то одной или нескольких длинах волн (в ультрафиолетовой, видимой, инфракрасной или микроволновой областях), показатель преломления смеси, вращение плоскости поляризации одним или несколькими веществами, рассеяние света макромолекулами или флуоресценцию некоторых из присутствующих веществ. [c.63]

МЕТОД УЛЬТРАФИОЛЕТОВОЙ ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ [c.532]

Как и следует ожидать из данных ультрафиолетовой поглотительной спектроскопии (см. выше), парафины и нафтены в основном лишь слабо флуоресцируют. Ароматические соединения, начиная от бензола, обладают слегка видимой флуоресценцией (полосы поглощения видны в коротких длинах волн обыкновенного ультрафиолета), но флуоресценция увеличивается по мере усложнения структуры кольца, полосы поглощения близки к видимой области или в самой видимой области [202]. Использование флуоресцирующего спектра при решении аналитических проблем было ограничено, хотя некоторые ароматические соединения, находящиеся в более тяжелых нефтяных фракциях, дают характерные картины [203—204]. Но так как флуоресценция очень чувствительна к следам инородных веществ [205 ], то другой метод, ультрафиолетовая спектроскопия поглощения, должен быть использован в качестве дополнения к этим анализам. [c.190]

Следует заметить, что в образце 2 природная флуоресценция модифицированной целлюлозы благоприятна для метода гашения. Ультрафиолетовый индикатор не был примешан в материал, из которого изготовляли тонкий слой, как это обычно необходимо делать в методе гашения флуоресценции. [c.110]

Сущность метода состоит в прямом впрыскивании пробы углеводорода в флуоресцентный детектор. Проба попадает в трубку высокотемпературного сгорания (1000-1100°С), где сера окисляется до диоксида серы (80г) в атмосфере, обогащенной кислородом. Вода, образующаяся во время сгорания пробы, удаляется, и газообразные продукты сгорания пробы облучают ультрафиолетовым светом. Молекула 80г поглощает энергию ультрафиолетовой флуоресценции света и превращается в возбужденный диоксид серы (ЗОг ). Флуоресценция, излучаемая 802 при возвращении его в стабильное состояние, определяется фотоэлектронным умножителем, и величина полученного сигнала является мерой содержания серы в пробе. [c.533]

При облучении ультрафиолетовым светом (Я>2000 А) бензола, замороженного при температуре жидкого азота (77° К) в прозрачных для ультрафиолетового света углеводородных стеклах, наряду с хорошо известными излучательными процессами флуоресценции и фосфоресценции происходит также и его разложение с разрывом связи С—С бензольного кольца. В результате ряда работ [1—3] с помощью методов ультрафиолетовой спектроскопии и газовой хроматографии было установлено, что продуктом фотохимического разложения бензола при 77° К является замещенный гексатриен [c.249]

Следует подчеркнуть, что рассеяние происходит не только на частицах в газах пламени и частицах пыли, но и вследствие рэлеевского рассеяния излучения молекулами и атомами, и поэтому последнее явление представляет собой основное ограничение в измерениях методом резонансной флуоресценции. Сечения рэлеевского рассеяния увеличиваются пропорционально AJ где h — длина волны падающего лазерного излучения. Вклад рэлеевского рассеяния (от атомов и молекул) в пламенах соответствует 200—2000 отсчетов в 1 с для типичной флуоресцентной установки, в которой в качестве источника возбуждения используется обычная ксеноновая дуговая лампа на 150 Вт фирмы ElM.iV . Поэтому, допуская, что время интегрирования 10 с и дробовой шум из-за рассеяния мал, шум составляет 100 отсчетов, что типично для ограничивающего уровня шума в обычной атомной флуоресценции с обычными источниками света, особенно в ультрафиолетовой области. Конечно, в видимой области ( 300 нм) шум фона пламени может даже превышать шум рассеяния в некоторых областях спектра. Во всяком случае, величина шума рассеяния, неотъемлемая в любых флуоресцентных методах, достаточно велика, чтобы оправдать крупные исследования в области использования нерезонансной флуоресценции для анализа. [c.229]

Количественное определение нуклеиновых кислот. Принцип метода основан на выделении рибонуклеиновых (РНК) и дезоксирибонуклеиновых (ДНК) кислот и на дальнейшем их анализе прямыми и косвенными методами. К прямым методам относятся такие, которые включают гидролиз нуклеиновых кислот с последующим выделением из гидролизатов пуринов и пиримидинов и определение их хроматографическим методом. Хроматография позволяет производить точный микроанализ нуклеиновых кислот. Исследование пуринов и пиримидинов проводят в ультрафиолетовом свете, наблюдая флуоресценцию пятен на хроматограммах или в экстрактах, полученных из соответствующих участков хроматограмм. Кроме хроматографического метода, применяют также способ электрофореза на бумаге. [c.60]

Эти задачи в значительной мере разрешаются методами ультрафиолетовой микроскопии и особенно наблюдениями в ультрафиолетовых лучах с применением метода цветовой трансформации (9, 10, 12, 35, 47]. Сущность последнего заключается в проявлении видимыми лучами невидимого изображения предмета, даваемого объективом ультрафиолетового микроскопа в результате поглощения ультрафиолетовых лучей. Для этого используется комбинированный пучок света, состоящий из красных и ультрафиолетовых лучей, и флуоресцирующий экран, флуоресценция которого возбуждается ультрафиолетовыми лучами определенной длины волны. Вещество, поглощающее ультрафиолетовые лучи, располагается перед флуоресцирующим экраном, и на него направляется комбинированный пучок света. В зависимости от степени поглощения ультрафиолетовых лучей наблюдатель видит на экране слабое или плотное теневое пятно, окруженное светом люминесценции в местах на которые упали лучи, не поглощенные телом. Само теневое пятно на экране окрашено остающимися после прохождения через вещество красными лучами в красный цвет. Таким образом создаются цветные изображения бесцветных объектов, условная окраска которых определяется пО глощением, не видимых, как обычно, а ультрафиолетовых лучей. [c.7]

Качественная идентификация компонентов анализируемой смеси производится одним из следующих методов химическим микроанализом по характерным окраскам, появляющимся в результате взаимодействия анализируемого вещества с добавляемым реагентом, по спектрам поглощения в ультрафиолетовой или инфракрасной областях по спектрам флуоресценции по масс-спектрам или же по спектрам ядерного магнитного резонанса. [c.98]

Причины возникновения флуоресценции были кратко описаны выше. Использование этого явления в анализе основано на способности некоторых веществ флуоресцировать под действием ультрафиолетового излучения. Число таких веществ невелико, так что метод вначале в основном применяли для анализа органических веществ и в меньшей степени для неорганических. В последние годы метод успешно применяют и для чувствительного определения многих неорганических соединений. [c.367]

Тип эмульсии можно установить, используя также метод флуоресценции. Эмульсии В/М под действием ультрафиолетового излучения могут приобретать видимую в темной камере окраску это отличает их от эмульсий М/В, которые обычно не флуоресцируют. Применимость метода также ограничена низкими и средними концентрациями дисперсной фазы. [c.176]

Детектором, указывающим на разделение, в колоннах создателя хроматографии служило поглощение разделяемыми компонентами света в видимой области света, т. е. цвет компонента. В случае бесцветных соединений для их детектирования используют другие свойства и методы поглощение в ультрафиолетовом и инфракрасном свете, показатель преломления света, различные ионизационные, химические й электрохимические методы, масс-спектр, спектры флуоресценции, ядерный магнитный резонанс и до. [c.8]

Чтобы выяснить, какая из двух-жидкостей является дисперсной фазой эмульсии, чаще всего применяют кондуктометрический метод. Известно, что удельная электрическая проводимость воды и ее растворов значительно больше (в Ю раз) удельной электрической проводимости нерастворимых в ней органических жидкостей. Электрическая проводимость дисперсной системы по значению близка к электрической проводимости дисперсионной среды. Поэтому, если электрическая проводимость эмульсии достаточно высока, это означает, что присутствует эмульсия типа М/В, а в случае низкой электрической проводимости — В/М. Для установления типа эмульсий используют также метод флуоресценции. Эмульсии В/М под действием ультрафиолетового излучения приобретают видимую в темной камере окраску это отличает их от эмульсий М/В, которые обычно не флуоресцируют. [c.344]

Третий метод получения спектров свободных радикалов — флуоресценция, наблюдаемая при возбуждении стабильных исходных соединений ультрафиолетовым излучением. Впервые работы такого типа были выполнены Терениным и сотр. [103, 130], а затем [c.12]

Обнаружение вещества непосредственно на столбике носителя представляет собой наиболее простой и удобный метод. Если сами вещества окрашены, как, например, динитрофенильные производные аминокислот или органические красители, то их наблюдение не представляет никаких затруднений, так как в настоящее время применяют только бесцветные носители. Так же как и при адсорбционной хроматографии, наблюдение можно вести в ультрафиолетовом свете. Однако необходимо иметь в виду что флуоресценция иногда может быть вызвана присутствующими загряз нениями, в то время как сами разделяемые вещества остаются невидимыми [c.460]

Флуоресцентные методы газового анализа для контроля диоксида серы и сероводорода. Явление флуоресценции — свойство возбужденных молекул вещества испускать свет под воздействием электромагнитного излучения. При облучении пробы газа, содержащего диоксид серы, ультрафиолетовым светом (214 нм) молекулы SO2 переходят из возбужденного в нормальное состояние, разряжаясь частично на флуоресценцию (максимум интенсивности флуоресценции в данном случае лежит в области волн 350 нм). Интенсивность излучения, пропорциональная содержанию диоксида серы, регистрируется фотоумножителем. [c.212]

Почти исключительная особенность системы иО —ЫаР давать яркую желто-зеленую флуоресценцию под действием ультрафиолетового излучения делает флуоресцентный метод настолько избирательным, что в ряде случаев предварительного отделения примесей не требуется. Это особенно удобно для быстрых качественных анализов и, конечно, для количественных определений, которые подробно описываются в гл. IV. Хорошая избирательность флуоресцентных реакций сочетается с высокой чувствительностью, что делает метод полезным при анализе сбросных и природных вод и объектов с низким содержанием урана [239, 262, 364, 747, 8641. [c.35]

Широкое распространение, в особенности за рубежом, при групповом анализе углеводородных смесей получил метод жидкостной хроматографии на силикагеле в присутствии флуоресцирующих (люминесцирующих) индикаторов —м етод ФИ А. В колонку с силикагелем вводят анализируемую фракцию с небольшим количеством флуоресцирующих индикаторов и красителя. Ароматический индикатор хорошо растворим в аренах, но не растворяется в других углеводородах. При ультрафиолетовом облучении колонки зона аренов дает ярко-голубую флуоресценцию. Найдены также олефиновые индикаторы, растворимые в алкенах и вызывающие флуоресценцию в УФ-свете алкеновой зоны хроматографической колонки. По отношению высоты соответствующей зоны к высоте слоя адсорбента рассчитывают содержание алкенов и аренов в нефтяной фракции или нефтепродукте. [c.131]

После электрофореза бумагу следует тщательно высушить в сушильном шкафу при 100°С. Даже небольшое количество влаги или пиридина может вызвать сильное тушение флуоресценции, что заметно снизит чувствительность метода. Рекомендуется также установить за ультрафиолетовой лампой фен и обдувать теплым воздухом бумагу в ходе определения. [c.277]

Метод основан на образовании характерных кристаллических осадков, которые рассматривают под микроскопом о присутствии определяемых ионов судят по внешнему виду кристаллов. Для выполнения анализа используют 1—2 мкл исследуемого раствора, к которому на предметном стекле прибавляют на острие оттянутой стеклянной палочки сухой реагент или, при помощи капиллярной трубочки, его раствор. Для наблюдения можно использовать любой микроскоп с увеличением в 40—200 раз (в частности — М-10, МВИ-1) при работе с ультрафиолетовым излучением рекомендован микроскоп МУФ-2. Техника работы описана в руководстве [191]. При наблюдении в УФ из-за поглощения кристаллами коротковолнового излучения с длиной волны 365 нм и менее тень от них на флуоресцирующем экране из тонкого уранового стекла становится красной на фоне зеленой флуоресценции (окраска вызывается красной линией ртутного спектра, пропускаемой стеклом УФС-1, испытуемым осадком и урановым стеклом) [392, стр. 71]. [c.41]

Международный стандарт ИСО 20846 устанавливает метод ультрафиолетовой флуоресценции для определения содержания серы в автомобильных бензинах, включая бензины, содержащие до 2,7 масс.% кислорода, и дизельные топлива, включая топлива, содержащие до 5 об.% метиловых эфиров жирных кислот (FAME), с содержанием серы от 3 мг/кг до 500 мг/кг. Этим методом можно анализировать другие нефтепродукты с другим содержанием серы. Однако данных по точности для других нефтец родуктов, кроме автомобильных бензинов, и для других содержаний серы, кроме указанного диапазона, не установлено. [c.532]

Естественным расширением методов денситометрии и флуоримет-1ИИ является возможность записать спектры ультрафиолетового поглощения, ультрафиолетовой флуоресценции и поглощения в видимой области спектра разделенных вешеств непосредственно на слое. Преимущество такого метода заключается в том, что неразделенные вещества, например стереоизомеры, можно определить в присутствии i pyr друга, если их спектры существенно отличаются. Подходящие [c.175]

Хроматографический анализ органических веществ развивался попутно с хроматографией неорганических веществ. В 1935— 1936 гг. появились первые сообщения об успешном применении метода Цвета в анализе синтетических красителей. Из жидкофазных вариантов хроматографии наиболее широкое применение в органической и биологической химии получила бумажная хроматография. Это тонкий микрометод, позволяющий разделять смеси нескольких десятков компонентов на полоске пористой бумаги, которая выполняет роль хроматографической колонки. Хроматограмма получается в виде пятен, окраска которых соответствует природной окраске разделяемых компонентов смеси. При анализе бесцветных веществ пятна проявляют, опрыскивая бумагу реактивом, образующим с разделяемыми компонентами окрашенные соединения. Например, при определении аминокислотного состава белков после их гидролиза бумагу опрыскивают раствором нин-гидрина, в результате чего на поверхности бумаги появляются пятна розового цвета, соответствующие индивидуальным аминокислотам (см. рис. 1.2). Если разделяемые бесцветные вещества обладают способностью к флуоресценции, бумагу облучают ультрафиолетовыми лучами (кварцевой или ртутной лампой) и тогда хроматограмма становится видимой. Этот случай можно наблюдать при разделении смеси антрахинонов, пятна которых в ультра- [c.9]

Появление лазеров, перестраиваемых в большей части ближней ультрафиолетовой и видимой областей, открыло новые возможности в диагностике плазмы [29—31]. Для исследования газообразных продуктов горения в пламени успешно была использована спектроскопия комбинационного рассеяния [32]. В работе [33] сообщалось о флуоресценции (О, 0) полосы электронного перехода Л А — ХЩ молекулы СН в пламени кислород — ацетилен при атмосферном давлении. Низкие концентрации других радикалов, таких, как ОН, СЫ и 5Н, были также обнаружены методом резонансной флуоресценции, возбуждаемой лазерами с перестраиваемой частотой [34—36], и легко предвидеть заманчивые перспективы аналитического применения молекулярной флуоресценции в пламенах при атмосферном давлеини [39]. [c.221]

Флуоресцентные методы. Из различных люминесцентных методов (фосфоресценция, флуоресценция, катодо- и хемилюминесценция ИТ. п.) для количественного определения мйкропримесей пока применяется флуоресценция. Флуоресцентный метод, или флуориметрия, основан на измерении интенсивности света, испускаемого веществом под воздействием падающих на него ультрафиолетовых лучей. [c.84]

Вторичные процессы исследовались независимо от первичных процессов при использовании вместо ионизирующей радиации ультрафиолетового излучения для непосредственного возбуждения X [13—17]. Сравнения-результатов этих исследований с результатами исследований характера сцинтилляций тех же систем [18] показали, что вторичные процессы в общем случае не зависят от способа возбуждения, и это дает возможность разделить первичные и вторичные процессы. Несмотря на некоторые неопределенности в ранних экспериментальных данных, теперь уже ясно, что основные характеристики сцинтилляционного излучения — его спектр, время затухания, самопоглощение — аналогичны тем же характеристикам фотофлуоресценции. Метод возбуждения флуоресценции ионизирующим излучением менее эффективен, чем метод возбуждения ультрафиолетовым излучением. [c.156]

После сборки вакуумной установки необходимо испытать ее на герметичность. Сначала проверяют вакуум, создаваемый насосом, путем присоединения его к буферной ёмкости на 5—10 л. Затем проверяют герметичность кранов, шлифовых соединений и мест спаев. Целесообразно размещать краны или клапаны на установке таким образом, чтобы можно было отдельно испытать на герметичность различные ее части. Для проверки герметичности применяют высокочастотный течеискатель типа Тесла с электродом в виде щетки (рис. 191). Принцип работы прибора основан на возникновении искры от электрода в месте пропускания воздуха. Можно также проверить герметичность аппарата с помощью стетоскопа или смазать предполагаемые места пропусков мыльным раствором и создать в установке избыточное давление около 0,5 кгс/см . Изящный метод проверки герметичности состоит в том, что на поверхность вакуумированной установки наносят кисточкой слабощелочной раствор флоуресцина или эозина в метаноле, затем ее облучают в темноте ультрафиолетовым светом, при этом в герметичных местах будет отчетливо наблюдаться флуоресценция. Специальные методы испытаний установок, работающих в условиях высокого вакуума, описаны Лаппорте [119] и Мён-хом [126]. [c.268]

Стайлом и сотр. [39, 1261. При облучении соответствующих соединений коротковолновым ультрафиолетовым излучением в спектре флуоресценции наблюдались системы полос СН, NH, ОН, С>], ННг, N00 и др. Недавно Дэвис и Окабе [27а], а также Юдж и сотр. 81] значительно усовершенствовали метод флуоресценции и зарегистрировали спектры СМ, СН и Сз при флуоресценции НСМ, СН4, С2Н2 и других исходных молекул, находящихся при низких давлениях и возбуждаемых коротковолновым ультрафиолетовым излучением. [c.13]

Интенсивная зеленовато-желтая флуоресценция хлороформного раствора оксихинолината алюминия при освещении ультрафиолетовым светом положена в основу одного из важнейших флуориметрических методов определения алюминия [451, 651, 767, 779, 785, 827а, 1016, 1082, 1106, 1125, 1233, 1272]. Метод высокочувствительный, позволяет опреде.-1ять до 10" % алюминия, влияние других металлов меньше, чем в фотометрическом методе. Оксихинолинат алюминия обычно экстрагируют хлороформом из растворов с pH 6—9. Интенсивность флуоресценции одинакова при измерении сразу и через 24 часа [767]. Наибольшая чувствительность метода — при использовании 2 мл 0,2%-ного раствора оксихинолина в 50 мл, [c.135]

В качестве детекторов на настоящей стадии разработки метода наиболее часто применяются устройства, основанные на ультрафиолетовой спектрофотометрии, на измерении показателя преломления или на измерениях флуоресценции. Для фармацевтических целей наиболее подходящим является ультрафиолетовый спектрофотометр, обладающий высокой чувствительностью (низший уровень обнаружения составляет 1—2 нг для материала, имеющего хорошие светопоглощающие свойства) и стабильностью (в частности он отличается низкой чувствительностью к контролируемым изменениям в составе растворителя и неравномерности потока) естественно, что такой детектор не может быть использован, если элюируется материал, не имеющий заметного поглощения в ультрафиолетовой области. Рефрактометр реагирует на разницу в показателе преломления чистой подвижной фазы и подвижной фазы, содержащей элюируемый материал этот метод имеет более широкое применение, чем адсорбционная опектрофото-метрия в ультрафиолетовой области, но он малочувствителен и в значительной степени зависит от небольших изменений в составе растворителя, от скорости потока и температуры. [c.104]

Аналитические методы, используемые при изучении взаи Л)дей-ствия альбумина с молекулами лекарств, делятся на неспектроскопические и спектроскопические [316, 317]. Первая группа включает так называемые классические методы равновесный и кинетический диализ, ультрафильтрацию, ультрацентпифугирование и электрофорез. Ко второй группе относятся ультрафиолетовая и видимая спектроскопия, флуоресценция, дисперсия оптического вращения и кругового дихроизма, ЯМР. [c.235]

Индий экстрагируют хлороформом из водного раствора при pH 3,2—4,5вформе 8-оксихинолината и фотометрируют окраску желтого раствора с максимумом абсорбции при 395—400 м[л. Следы индия определяют, кроме того, методом стандартных серий по интенсивности флуоресценции раствора 8-оксихинолината в СНСЬ в ультрафиолетовом свете. Можно также купелировать связанный с индием остаток оксихинолина с диазосоединением и определять образовавшийся азокраситель фотометрированием. [c.15]

Следы индия можно определить методом стандартных серий по интенсивности флуоресценции раствора оксихинолината в СНСЬ в ультрафиолетовом свете [122]. На возможность флуоресцентного определения индия указал Сендел [402]. Детально разработанный Боком и Хакштайном [122] метод сводится к следующему. [c.131]

Наибольшее распространение получили методы с использованием тетрартутьацетатфлуоресцеина. Щелочные растворы реагента флуоресцируют в УФ-овете ярким зеленым цветом. В присутствии сульфидной серы, а также тиофенола, метилмерксщтана, тиомочевины, тиоацетамида, диэтилдитиокар-баматов и других серусодержащих веществ флуоресценция раствора гасится вследствие взаимодействия реактива с серусодержа-щим остатком. При титровании раствором тетрартутьацетатфлуоресцеина растворов серусодержащих веществ в ультрафиолетовом свете в точке эквивалентности возникает яркая зеленая флуоресценция. Чувствительность реакции при измерении флуоресценции в области 530 нм составляет 0,01 мкг серы в 10 мл 1%-ного раствора КОН. [523]. Визуальная чувствительность титрования равна 0,002 мкг ъЪ мл раствора, относительная ошибка — 25% [501]. [c.121]

Бериллий образует с З-окси-2-нафтойной кислотой соединение с синей флуоресценцией в ультрафиолетовом свете. Чувствительность реакции — 0,002 мкг1мл. Флуоресценция возникает в кислых растворах, начиная с pH 2,5. Мешают реакции Fe, Th и U. Медь даже в больших концентрациях не мешает, поэтому метод удобен для определения бериллия в бронзе. Оптимальные условия определения бериллия в медных сплавах следующие pH 3—4 (устанавливают при помощи 2 N раствора ацетата натрия), присутствие комплексона III для устранения влияния А1, Fe. Ин тервал определяемых концентраций составляет 0,02—0,2 мкг [c.123]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология