Основания и нуклеозиды

Одной из первых работ, в которых было показано существование ассоциатов оснований и нуклеозидов, явилось исследование изменения давления пара раствора с изменением концентрации пурина, уридина и цитидина В результате были определены константы равновесия ассоциации и установлено, что образуются на- [c.230]

Концентрационные изменения спектров ЯМР растворов оснований и нуклеозидов , [c.234]

Наблюдаемые значения рКа для оснований и нуклеозидов [c.309]

Разделение нуклеиновых оснований и нуклеозидов..............320 [c.320]

Для аналитического определения и идентификации нуклеиновых оснований и нуклеозидов наиболее широко применяется хроматография на бумаге. [c.320]

Рис. 1. Хроматография на бумаге нуклеиновых оснований и нуклеозидов [1].

Обычными системами для разделения нуклеиновых оснований и нуклеозидов являются смеси воды или водных растворов солей, кислот или оснований с органическими растворителями — спиртами, эфирами, кислотами и т. д. Из большого числа описанных систем лишь немногие получили широкое распространение (рис. 1). [c.322]

Для разделения стандартных смесей оснований и нуклеозидов обычно применяют системы, приведенные на рис. 1. Эти системы довольно просты и дают надежно воспроизводимые результаты. Сравнение величин в приведенных системах дает наглядное представление о влиянии pH раствора и концентрации солей в системах на хроматографическую подвижность разделяемых веществ. [c.322]

Рис. 2. Хроматография на бумаге метилированных оснований и нуклеозидов — минорных компонентов т. РНК [5, 6, 7].

Ионообменная хроматография для разделения нуклеиновых оснований и нуклеозидов не имеет особых преимуществ перед хроматографией на бумаге. Емкость ионитов по основаниям и нуклеозидам невелика, разделение [c.325]

Для препаративного разделения оснований и нуклеозидов широко применяются два метода. [c.325]

Наличие фосфатной грунны в нуклеотидах резко отличает последние от нуклеиновых оснований и нуклеозидов. Нуклеотиды — сильные двухосновные кислоты (рК1 1 и рКа 6) [20]. Разделение и анализ микроколичеств нуклеотидов обычно проводят хроматографией на бумаге, для больших количеств или для точного анализа применяется ионообменная хроматография. [c.326]

Из числа кислотных систем растворителей применяются главным образом смеси Сз—С5. Системы Сз и С4 особенно эффективны при разделении оснований и нуклеозидов система С4 пригодна для разделения гидролизатов с последующей спектрофотометрической идентификацией их компонентов. Система С5 очень неудобна в работе из-за ее резкого неприятного запаха, однако она обладает исключительно высокой разделяющей способностью в отношении свободных нуклеотидов. [c.127]

Ионообменная хроматография для разделения нуклеиновых оснований и нуклеозидов не имеет особых преимуществ перед хроматографией на бумаге. Емкость ионитов по основаниям и нуклеозидам невелика, разделение трудоемко и длительно. Однако Щ7о для получения точных количе- 20 ственных результатов все-таки предпочтительна ионообменная 10 хроматография. Описан ряд методов разделения оснований и нуклеозидов (учитывая амфотерность [c.325]

Синтезы пуриновых и пиримидиновых оснований и нуклеозид-фосфатов могут быть представлены несколькими правдоподобными схемами. Важным исходным веществом был, по-видимому, циа-новодород, термодинамическая устойчивость которого при высоких температурах обеспечивала необходимую концентрацию его в первичной атмосфере. Кальвин указал на обращение знака AG реакции образования H N при 1050 К выше этой температуры AG становится отрицательной, В реакции [c.379]

I Механизм сорбции нуклеиновых кислот и их производных на оксиапатите, ио-видимому, во многом аналогичен механизму сорбции кислых белков. Вместо карбоксилов во взаимодействии с ионами кальция на поверхности сорбента участвуют остатки фосфатов полинуклеотидной цепи. Для моно- и олигонуклеотидов наблюдается явная зависимость силы сорбции от длины цеии (из-за многоточечной сорбции Мононуклеотиды в присутствии 1 мМ фосфатного буфера задерживаются на сорбенте слабо, а основания и нуклеозиды не задерживаются вовсе. Ди- и тринуклеотиды сорбируются гораздо прочнее решающую роль играют здесь фосфаты. Любопытно, что сказывается не только их число, но и расположение) Наиример, нуклеозидтрифосфаты сорбируются заметно прочне ё чем тринуклеотиды. Небольшие олигонуклеотиды хорошо сорбируются в 1 мМ фосфатном буфере, но относительно легко элюируются (0,02—0,0.3 М фосфатным буфером). орбция самих нуклеиновых кислот гораздо более прочна ]Я1 Элюцию осуществляет фосфатны буфер с концентрацией 0,12—0,25 М Размер высокомолекулярной нуклеиновой кислоты сказывается мало. По-видимому, достаточно отдаленные участки длинной цепи полинуклеотида благодаря их гибкости элюируются одновременно и независимо друг от друга. [c.229]

Нуклеиновые основания и нуклеозиды можно разделять ТСХ на целлюлозе, используя в качестве элюентов водно-солевые растворы [Bij, Lederer, 1983]. Основную роль в этих случаях играют гидрофобные взаимодействия нуклепновых оснований с целлюлозой и эффект высаливания. [c.496]

Анализ нуклеиновых оснований и нуклеозидов на слоях эктеола, целлюлозы и силикагелд Г превосходит хроматографию на бумаге по чувствительности обнаружения разделяемых веществ, а также по четкости разделения [c.445]

Мононуклеотиды и нуклеотидполифосфаты разделяют на слоях эктеола методом ионообменной хроматографии в качестве растворителя пригоден разбавленный водный раствор хлорида натрия (табл. 115 и 117). Как правило, удовлетворительного разделения достигают за 15 мин. Величины Rf нуклеотидов являются функцией концентрации хлорида в растворителе скорость движения нуклеиновых оснований и нуклеозидов не зависит от концентрации хлорида. Это отчетливо видно из рис. 178, который заимствован из работы Рандерата [69]. [c.448]

В определенных условиях используют для синтеза нуклеотидов свободные основания и нуклеозиды, образующиеся в результате разрушения нуклеоновых кислот или поступающие в клетку из питательной среды. Это запасной путь, известный в литературе как salvage ( селвидж ) - синтез, или синтез из готовых фрагментов , или реакции сбережения . Японцы называют этот путь биосинтеза нуклеотидов трансформация нуклеотидов , нуклеотидная ферментация . [c.419]

Этот путь является альтернативным к de novo синтезу, путь образования нуклеотидов из оснований и нуклеозидов. Впервые это было доказано с введением в аналитическую биохимию метода меченых атомов. Селвидж-синтез носит универсальный характер, [c.423]

Нуклеозидфосфорилазная реакция является этапом образования нуклеозидфосфата из готового основания, а также взаимопревращением оснований и нуклеозидов, имеющим большое физиологическое значение. [c.425]

К реакциям селвидж-синтеза в последнее время правомерно стали относить реакции взаимопревращений пуринов на уровне оснований и нуклеозидов, что указывает на разнообразие пути селвидж-синтеза. [c.426]

Кроме четырех обычных оснований в ДНК (главным образом в ДНК бактериофагов) найдено шесть так называемых минорных оснований. Еще больше — до 35 минорных оснований (табл. 37.3)—встречается в РНК, главным образом в тРНК. Минорные компоненты можно получить лишь расщеплением природных полимеров, так как они образуются в результате ферментативной модификации уже готовых полинуклеотидов, т. е. в результате модификации на макромолекулярном уровне. Кроме того, в работах по изучению структуры и функций нуклеиновых кислот имеют дело с производными компонентов нуклеиновых кислот, т. е. с нуклеозидами, несущими защитные группы, или с аналогами оснований и нуклеозидов, например с азапиримидинами [14]. Разделение таких соединений также было предметом исследования в работе [15]. [c.37]

Нуклеотиды в отличие от оснований и нуклеозидов являются сильными кислотами и в водных растворах существуют в виде анионов. Их хроматографическая подвижность зависит от заряда молекулы, а также в некоторой степенй от природы основания (табл. 37.4). Нуклеотиды нельзя разделить методом хроматографии на бумаге, но, поскольку эти соединения ионизованы, [c.53]

Поглощение в ультрафиолете дает возможность идентифицировать различные пуриновые и пиримидиновые основания. Водный раствор каждого пуринового и пиримидинового основания и нуклеозида обладает определенным спектром поглогцения, который специфически изменяется в зависимости от величины pH [c.35]

Фиг. 58. Необычные основания и нуклеозиды транспортной РНК. Стрелки ука.эывают места, чувствительные к реакции алкилирования.

Таблица 4.6. Константы гомоассоциации оснований и нуклеозидов (по данным изменения давления пара водных растворов при 25° С)

Фотодинамическим эффектом, или фотодинамическим действием, в химии нуклеиновых кислот называют сенсибилизированное красителя.ми окисление оснований и их производных при облучении видимым светом в присутствии кислорода. Результатом фотодина-мического действия является деструкция главным образом пуриновых оснований и нуклеозидов 255-258 приводящая в случае нуклеиновых кислот к потере биологической активности 259-262 более жестких условиях облучения иногда помимо пуриновых нуклеозидов частично деградируют также тимидин и уридин [c.681]

Ряд задач, возникаюш,их при изучении нуклеиновых кислот и пуклеотидкоферментов, решается с помош,ью различных видов хроматографии. Эти задачи могут быть классифицированы с точки зрения методов или объектов. Более важным кажется второй подход, в связи с чем дальнейшее изложение построено по этому принципу. Объекты подразделены на следующие группы 1) основания и нуклеозиды, 2) нуклеотиды и нуклеотидангидриды, 3) олигонуклеотиды, 4) нуклеиновые кислоты. [c.320]

Нуклеотиды более полярны, чем соответствующие основания и нуклеозиды, поэтому из систем, применяемых для хроматографического анализа на бумаге оснований и нуклеозидов, в случае нуклеотидов применимы лишь немногие — содержащие большие концентрации солей, кислот или оснований. Повышение содержания воды приводит обычно к ухудшению разделения и повышению значений i . Повышение концентрации неполярных веществ в системах приводит обычно к ухудшению разделения и понижению значений Ну. Солевые системы хорошо делят пуриннуклеотиды (разделяя даже смесь изомерных 2 - и З -фосфатов), но не делят пиримидиннуклеотиды кислые и основные системы хорошо разделяют пиримидиннуклеотиды и плохо делят пуриновые производные. [c.326]

Рандерат [4] разделял на слоях силикагеля G основания и нуклеозиды, применяя в качестве элюирующего растворителя дистиллированную воду. В некоторых случаях он закреплял слои силикагеля коллодием, а не гипсом, так как кальций может давать устойчивые комплексы [5]. Шейг и др. [6] анализировали окисленные и восстановленные дифосфопиридиннуклеотид (DPN) и трифосфопиридиннуклетоид (TPN) на слоях силикагеля G, элюируя пробу смесью изомасляная кислота—гидроксид аммония—вода (66 1 33). Эти же соединения разделяли также смесью этанол—1 М раствор ацетата аммония (7 3), pH 7,5. Смесью тех же компонентов, но при соотношении 1 1, не удается разделить окисленный и восстановленный трифосфопиридиннуклеотид. [c.116]

Рандерат [4], а также Рандерат и Страк [22] применяли тонкие слои целлюлозы, приготовленные размешиванием 10 г порошка целлюлозы МЫ-ЗОО в 50—60 мл ацетона. Никакое закрепляющее вещество не добавлялось. На таких слоях удалось разделить нуклеиновые основания и нуклеозиды, используя в качестве элюирующего растворителя воду. Нуклеотиды разделяли смесью н-бутанол—ацетон—уксусная кислота—5 %-ный раствор гидроксида аммония—вода (4,5 1,5 1 1 2). [c.118]

Величины X100 свободных оснований и нуклеозидов в различных хроматографических системах 6 [c.121]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология