Хроматографические методы идентификации антибиотиков

Для того чтобы можно было следить за ходом выделения и очистки антибиотиков, разработаны многочисленные методы обнаружения и идентификации этих веществ, основанные главным образом на использовании различных хроматографических методов. Первоначально, когда число известных антибиотиков было еще сравнительно мало, для этой цели были вполне пригодны простые методы бумажной хроматографии. К настоящему времени открыты уже тысячи антибиотиков, и их число продолжает неуклонно расти благодаря получению новых, более эффективных препаратов из природных антибиотиков путем их моди- [c.143]

Хроматографические методы идентификации антибиотиков [c.144]

К настоящему времени открыто очень много самых различных (и химически и биологически) антибиотиков, поэтому невозможно предложить какую-то универсальную систему для их хроматографии. Для обнаружения классических антибиотиков разработаны были в свое время химические цветные реакции, но обычно их обнаруживают методом биоавтографии. При разработке и идентификации новых антибиотиков стал традиционным метод определения их хроматографических спектров (профилей) посредством биоавтографии. Если установлено, что определенная среда проявляет свойства антибиотика по отноще-нию к какому-либо бактериальному штамму, то эту среДу или экстракт из нее хроматографируют в серии выбранных растворителей и подвергают хроматограммы (в виде полосок) био-автографическому обнаружению (прижимают полоски к пленке с культурой и определяют зоны, в которых подавляется рост бактерий). Значения Rf пятен соединений, проявляющих свойства антибиотика, измеряют во всех растворяющих системах и строят кривую зависимости Rf от используемой системы (на оси ставят номера систем). Соединяя нанесенные точки, получают ломаную линию, которую и называют хроматографическим спектром или профилем. Этого обычно достаточно для получения полной хроматографической характеристики или для идентификации исследуемого антибиотика. Некоторые авторы используют до 14 растворителей для построения хроматографического спектра. В качестве примера приведем перечень систем, исполь- [c.139]

Хроматографический метод анализа находит широкое распространение для определения состава антибиотиков, представляющих собой группу веществ, обладающих антимикробной активностью. Так, например, методами колоночной сорбционной хроматографии разделены пенициллин, альбомицин и многие другие антибиотики на фракции, содержащие отдельные индивидуальные представители этих антибиотиков. В хроматографическом анализе единственный способ независимого определения веществ состоит в определении времени выхода компонента или же места компонента на хроматограмме. В результате этого для постановки аналитического эксперимента необходимо заранее поставить опыт с известным веществом. Введение других компонентов может в то же время сместить изучаемое вещество на хроматограмме и затруднить его идентификацию. Поэтому наибольшее значение хроматографический метод даже и в аналитической практике имеет как способ разделения веществ. При этом возникают возможности идентификации вещества путем его совместного хроматографирования с добавкой заведомо чистого и определенного вещества. Хроматографический метод может служить также в качестве способа. проверки однородности выделенного вещества. Если ряд постановок элютивного хроматографического процесса в различных условиях не приводит к образованию нескольких зон веществ, то испытываемое вещество с большей вероятностью можно рассматривать как однородное. [c.88]

Лишь для небольшого числа из тысяч известных антибиотиков разработаны системы классификации и идентификации. В работе [25] на основании данных ТСХ и биоавтографии предложена классификация 151 антибиотика, обладающего противоопухолевой активностью в работах [26, 27] для классификации 91 антибиотика использован метод мгновенной ТСХ , а в работе [28] рассмотрены вопросы, связанные с применением ТСХ-систем для классификации и идентификации антибиотиков. Существуют два справочника по хроматографии антибиотиков [29, 30]. В Руководстве по хроматографии [31] приведены таблицы с данными по хроматографическим свойствам этих соединений. Описание ТСХ-методик можно найти в подробном обзоре Лотта и др. [32]. [c.145]

К счастью, весьма часто антибиотики можно обнаружить непосредственно в культуральных средах, причем в отличие от многих других соединений для их идентификации хроматографическими методами бывает достаточно незначительных количеств вещества и эта процедура не сопряжена с трудоемким выделением и очисткой препарата. Многие из недавно описанных ВЭЖХ-методов вполне пригодны для выделения небольших количеств чистых антибиотиков. Хроматография является важным вспомогательным средством, позволяющим убедиться в справедливости закона Мерфи, который гласит, что антибиотик, продуцируемый в сложной.смеси в наименьших количествах, обычно наиболее интересен. В этой главе мы не будем углубляться в вопросы, касающиеся препаративной хроматографии, а ограничимся лишь описанием методологии идентификации антибиотиков. [c.144]

Фармакопея США различает два термина стандарт и вещество для сравнения . Последнее относится к соединениям, имеющим гетерогенный состав, вследствие чего они не могут быть точно определены химическим путем. Однако такие вещества могут быть полезными для клинических испытаний или для начальной стадии фармакопейной стандартизации. Фармакопея США ХУП имеет 72 стероидных вещества для сравнения. Образцы стероидов разбавлены инертным наполнителем для использования при идентификации стероидов хроматографическими методами. Общее число стандартов составляет 172, в основном это антибиотики, гормональные препараты и витамины. [c.49]

Рассмотренный материал показывает, что на хроматографическом уровне могут быть изучены различные свойства антибиотиков. Применение бумажной хроматографии для изучения свойств антибиотиков безусловно целесообразно в тех случаях, когда вещество получено в очень небольших количествах и к тому же плохо очищено, т. е. тогда, когда обычные методы изучения и идентификации применить невозможно. [c.68]

Хроматография — наиболее часто используемый аналитический метод. Новейшими оматографическими методами можно опрвд шпъ газообразные, жидкие и твердые вещества с молекулярной массой от единиц до 10 . Это могут быть изотопы водорода, ионы металлов, сингетические полимеры, белки и др. С помощью хроматографии получена обширная информация о строении и свойствах органических соединений многих классов. Применение хроматографических методов для разделения белков оказало огромное влияние на развитие современной биохимии. Хроматографию с успехом применяют в исследовательских и клинических целях в самых разных областях биологии и медицины, в фармацевтике и криминалистике дпя терапевтического мониторинга в связи с ростом нелегального употребления наркотиков, идентификации антибиотиков и отнесения их к той или иной группе антибактериальных препаратов, дпя определения наиболее важных классов пестицидов и дпя мониторинга окружающей среды. Такие достоинства как универсальность, экспрессность и чувствительность делают хроматографию важнейшим аналитическим методом. Более десяти работ (1957—1980), выполненных с применением хроматографических методов, были удостоены Нобелевских премий среди авторов методических работ, удостоенных премий, А. Тизелиус (1948), А. Мартин и Р. Синдж (1956). [c.265]

Для идентификации антибиотиков и их отнесения к той или иной группе антибактериальных препаратов служит ряд хроматографических методов. До недавнего времени наиболее распространенным методом была бумажная хроматография (восходящая, нисходящая, круговая, центрифужная, одно- и двумерная бумажная хроматография, хроматография на бумаге, пропитанной буферами [2], на ионообменной бумаге [3] и т. п.), однако впоследствии широкое распространение получила также ТСХ (преимущественно на силикагеле или на оксиде алюминия), отличающаяся простотой аппаратурного оформления и высокой скоростью анализа [4—9]. Чтобы придать сорбенту определенные свойства, его можно предварительно обработать соответствующим реагентом. Например, для разделения тетрациклинов, способных образовывать хелаты, Нишимото и др. [10] использовали пластинки с силикагелем, пропитанным раствором динат-риевой соли ЭДТА. Известны примеры хроматографического [c.144]

Для всех туя плиципов характерна цветная реакция с Fe ls (зеленая окраска), а также образование комплексных медных солей, растворимых в H I3. Для разделения и идентификации этих антибиотиков разработан хроматографический метод зоз-зоб. [c.319]

Преодолеть эти затруднения удалось с помощью методов лио-филизации фильтратов культуральных жидкостей и экстрагирования их соответствующими растворителями. Сущность схемы хроматографической идентификации антибиотиков из культур на стадии малоактивных культуральных жидкостей состоит в следующем. [c.139]

При изучении стрептотрицинов бумажную хроматографию использовали не только для анализа компонентного состава различных препаратов, но также для препаративного разделения [1643], контроля выделения и очистки [231, 240, 245], количественного анализа компонентов смесей стрептотрицинов [231, 369, 1662], при изучении биосинтеза [413] и влияния состава сред на образование стрептотрицинов [1665]. Также разработаны методы хроматографической идентификации продуктов гидролиза антибиотиков группы стрептотрицинов гулозамина, стрептоли-дина, р-лизина и др. [1663, 1664, 1666—1668]. [c.260]

Насбаумер [34, 35] разделил пенициллины после кислотного гидролиза. Анализируя продукт разложения пенициллина, он исследовал влияние 40 различных компонентов на идентификацию пенициллинов методом ТСХ. Этот же автор [36, 37] изучил возможность спектрофотометрического определения пенициллинов в различных фармацевтических препаратах. Прямому анализу этих антибиотиков мешают полиэтиленгликоли и стеараты натрия, однако предварительное разделение методом ТСХ позволяет отделить пенициллины от мешающих анализу соединений. Слои для хроматографического разделения приготавливают так смешивают 20 % рисового крахмала с силикагелем О в фосфатном буфере (pH 5,8). Элюирование проводят смесью бутилацетат—н-бутанол—уксусная кислота—фосфатный буфер (pH 5,8) — метанол (80 15 40 24 5). [c.537]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология