Адсорбция и элюирование

Фракционированное осаждение, как и фракционированная кристаллизация, служит для разделения и получения в чистом виде многих элементов в препаративных масштабах. При этом используют различия в растворимости осадков и устойчивости комплексов. Однако фракционированное осаждение применяют несколько реже, чем фракционированную кристаллизацию, так как ряд операций кристаллизации требует в общем значительно меньших затрат труда, времени и реагентов, чем то же число осаждений. Поэтому фракционированное осаждение выгодно только тогда, когда степень разделения при одной операции значительно выше, чем при одной кристаллизации. Оба метода значительно устарели с тех пор, как стали располагать значительно более производительными методами фракционированной адсорбции и элюирования на обменниках. [c.309]

Свинину анализируют на содержание витамина В1 окислением последнего в тиохром. Навеску 2 г исследуемого объекта экстрагируют соляной кислотой, обрабатывают фосфатазой и разбавляют полученный раствор до 100 мл. Очищают 15 ил этого раствора адсорбцией и элюированием при этом процессе раствор разбавляют до 25 мл. Из разбавленного таким способом раствора берут две порции по 5 мл одну из них обрабатывают феррицианидом и обе разбавляют до объема 10 лл для флуорометрического исследования. Стандартный раствор тиамина, содержащий 0,2 (лг в 1 мл, подвергают аналогичной операции с той лишь разницей, что порцию, введенную в адсорбционную колонку после элюирования, доводят до первоначального объема (т. е. не разбавляют). Берут две [c.256]

Условия проведения аффинной хроматографии зависят от природы соединения, которое нужно выделить. Однако существует ряд общих требований, касающихся свойств нерастворимого носителя, выбора типа аффинного лиганда, его связывания с носителем, условий адсорбции и элюирования. [c.7]

Условия адсорбции и элюирования выделяемого соединения зависят от его специфических свойств. Если нужно выделить небольшое количество белка из неочищенной смеси с помощью аффинного лиганда, обладающего высоким сродством, то иногда сочетают обработку в стационарных условиях с элюированием после переноса сорбента в колонку [16]. Если же соединение, которое необходимо выделить, обладает незначительным сродством к специфическому адсорбенту, оно очень часто элюируется из колонки даже без смены буферного раствора. В этом случае получают разбавленный раствор этого соединения. При выделении высокомолекулярных соединений скорость потока жидкости, проходящего через колонку, должна быть достаточно низкой. На адсорбционное равновесие влияет не только число [c.12]

А. Адсорбция и элюирование. Хроматография [c.73]

Овомукоиды, полученные из яичных белков И различных видов птиц адсорбцией и элюированием с колонок, наполненных КМ- или ДЭАЭ-целлюлозой, приблизительно в тех же условиях, какие применялись для получения овомукоидов курицы (см. стр. 25), имели близкую величину общего азота (11—13%) и содержали очень мало триптофана (менее 1%) [12]. Однако по своей ингибиторной активности по отношению к трипсину и химотрипсину они очень резко различались, и на этой основе овомукоиды можно было разделить на следующие четыре класса овомукоиды курицы, фазана, индюка и утки. Физические и химические свойства (включая молекулярный вес) овомукоида утки очень сходны со свойствами овомукоида курицы. Исследование на ультрацентрифуге овомукоидов индюка и фазана показало, что молекулярный вес их также, по-видимому, близок к весу овомукоидов курицы и утки. Исследования, проведенные с учетом весовых взаимоотношений, привели к классификации различных видов овомукоида по количеству фермента, которое ингибируется соответственно одним молем овомукоида [c.38]

Периодический процесс разделения белков осуществляют путем их адсорбции и последующего элюирования. Условия проведения такой процедуры следует установить в ходе контрольных опытов с каждой партией адсорбента и обычно с каждым препаратом белка (фермента или антитела), предназначенным для разделения. На рис. 16.6 представлены результаты проведения циклов адсорбции и элюирования, полученные в контрольных опытах. На рис. 16.6, Л показаны три процесса адсорбции, различающиеся в зависимости от природы очищаемого материала, примесей и других параметров, например pH и ионной силы. Интересующий нас белок может адсорбироваться лучще, чем белки-примеси (слева), так же, как они (в центре), или хуже (справа). В первом случае к раствору добавляют такое количество адсорбента, какое необходимо для извлечения основной части нужного вещества, при этом большинство других белков остается в растворе (положительная адсорбция). Если нужный белок адсорбируется хуже примесей, то адсорбент добавляют, а затем удаляют до тех пор, пока не начнется адсорбция нужного белка (количество адсорбированного белка должно составлять около 10%). В этом случае вначале удаляются белки-при-меси (отрицательная адсорбция), после чего нужный частично очищенный материал можно адсорбировать или очистить каким-либо иным способом. Если примесный и основной белки адсорбируются с одинаковой скоростью, адсорбция может привести лишь к небольшой степени очистки. Тем не менее можно добиться положительных результатов, подвергнув очищаемый белок последовательным циклам адсорбции и элюции. [c.203]

Характерно, что применение групповых лигандов способствовало лучшему пониманию механизма действия кофакторов, а также влияния солей и сопутствующих белков, определяющих силу биоспецифического взаимодействия и условия адсорбции и элюирования фермента. Таким образом, несмотря на сравнительно низкую специфичность групповых лигандов, путем подбора соответствующих условий можно достичь высокой степени очистки выделяемого фермента. [c.190]

Можно назвать множество примеров использования микрофильтрационных мембран в качестве фильтров для сбора частиц, подвергаемых затем анализу сбор бактерий для прямого подсчета с помощью микроскопа в прошедшем свете подсчет частиц в напитках подсчет фитопланктона измерение и подсчет инертных частиц подсчет асбестовых волокон, раковых клеток, адсорбция и элюирование вирусов и подсчет жизнеспособных водопереносимых бактерий [7]. Электрофорез является электрически управляемым процессом, в котором белковые фракции разделяются либо в микропористых ацетатцеллюлозных гелях [8], либо в ультрапористых агаровых или полиамидных гелях. Активному возбуждению гибридизации нуклеиновой кислоты помогает способность нитрата целлюлозы сильно сорбировать ДНК, поэтому и ДНК ДНК-, и ДНК РНК-гибриди-зации могут быть осуществлены на мембранном фильтре [7]. [c.85]

Ключом к открытию этих элементов стала химическая идентификация по методу ионообменной адсорбции и элюирования, описанному в гл. 4. Первоначально полученные данные, свидетельствующие об этой идентификации. приведены на рис. 8 и 9 для элементов 97 и 98 соответственно. В гл. 4 дано объяснение значения этих кривых и приведены характеристики смолы даузкс-50, а также элюирующих веществ, которые перечислены в подписях к рис. 8 и 9. [c.34]

В случае элемента 97 предварительное отделение от вещества мин1епи (америция) достигалось по методу, который включал трудный процесс окисления америция до шестивалентного состояния. Шестивалентный Ат образов.ывал растворимый фторид, от которого элемент 97 отделялся соосаждением с фторидом редкоземельного элемента. Элемент 98 от вещества мишени (кюрия) предварительно отделялся методом ионообменной адсорбции с последующим элюированием. Нетрудно заметить, что элементы 97 и 98 элюируются до кюрия именно в том порядке, который и следует ожидать. Это и является убедительным доказательством их химической идентификации. Эксперимент по адсорбции и элюированию, приведший к открытию элемента 97, производился 19 декабря 1949 г. соответствующий эксперимент, относящийся к элементу 98, — 9 февраля 1950 г. [c.34]

Оригинальные данные по ионообменной адсорбции и элюированию для элемента 99 в том виде, в каком эти данные были получены в Беркли при 1Ючном эксне-рпмеите 19 декабря 1952 г., ко да этот элемент был открыт, приведены на рпс. 13. Читателю снова следует обратиться к 1л. 4, в которой дается объяснение значения приведенны.х на рисунке кривых, а также сообщаются [c.40]

Разработаны также методы хроматографического разделения хинных алкалоидов6. Так, применяя в качестве адсорбентов соответствующие аниониты и катеониты (в циклическом процессе экстракция — ионная адсорбция — элюирование), удается выделить кристаллический хинин с выходом до 12,5% (на сухой вес исходной хинной корки) 7. При этом процесс адсорбции и элюирования хинина на колонке контролируется путем наблюдения за характером и интенсивностью флуоресценции под действием ультрафиолетовых лучей 6а. [c.317]

Целью колоночной хроматографии экстрактов из образцов загрязнений воздуха является получение последовательного распределения компонентов на адсорбенте в соответствии с их химической структурой и удаление их с адсорбента элюированием также в условиях линейной адсорбции. Как было показано Винтерштейном и Шеном [5] в 1934 г., такая задача может быть решена. Кроме того, поскольку приходится работать с микроколичествами, адсорбция и элюирование ПАУ должны быть как можно более полными. Стадии разделения и детектирования должны быть по возможности короткими, а разделение следует проводить с предельной тщательностью, чтобы избежать потерь компонентов. Фундаментального обоснования факторов, обусловливающих достижение таких идеальных условий, практически не проводилось. При разработке конкретных методик обычно основываются на предыдущем практическом опыте (В этой области. [c.145]

Чтобы измерить величину поправки на посторойнее поглощение или вообще избежать необходимости в поправках для спектрофотометрических определений, были введены добавочные стадии адсорбции и элюирования [31, 169, 201, 214, 239, 291] или удаления витамина А фотолитическим разложением. [c.168]

Тот факт, что тиамин может быть окислен в растворах в соединение с интенсивной синей флуоресценцией (тиохро-мия), привлек большое внимание химиков. Был предложен флуорометрический метод количественного определения тиамина, основанный на этой реакции [100]. Хотя образование тиохрома из тиамина не протекает количественно [42], однако отношение их при соблюдении соответствующих условий довольно постоянно, и теперь в большинстве методов определения витамина В использована тио-хромная флуоресценция. Опубликованы сравнительные данные определений по методу фармакопеи США и по другим методам [196, 57], Предварительный энзиматический гидролиз и очистка путем адсорбции и элюирования не нужны для природных препаратов с высоким содержанием тиамина, а для синтетического витамина Вх даже и при низком содержании. Однако в смесях, где тиамин присутствует в связанном виде, например в виде эфиров фосфорной кислоты, предварительный энзиматический гидролиз заметно повышает результаты определения. [c.212]

Предлагаемое вниманию советского читателя руководство вышло в серии книг, посвященных актуальным методам современной биохимии и родственных областей естествознания. В нем собраны подробные экспериментальные методики, охватывающие практически все аспекты аффинной хроматографии получение, характеристика и применение твердых носителей, активация твердых носителей, иммобилизация на них лигандов различной природы, адсорбция и элюирование, анализ биоспе-цифических адсорбентов, использование аффинной хроматографии в препаративном масштабе и в условиях высокоэффективной хроматографии, количественная характеристика молекулярных взаимодействий, выделение клеток и другие. Хотя как практическое руководство данная книга призвана помочь исследователю прежде всего в экспериментальной работе, каждой главе предпослано небольшое теоретическое вступление. Особую ценность книге придает участие в ее написании ведущих специалистов по аффинной хроматографии из многих стран. [c.5]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология