Перемешивание жидкой культуры

В последние 15 лет для выращивания продуцентов ферментов чаще используют более экономный — глубинный метод культивирования (рис. 4.1). В промышленных условиях для этих целей применяют ферментеры из нержавеющей стали, снабженные приспособлениями для перемешивания и подачи в жидкую питательную среду стерильного воздуха. Сначала ферментер заполняют питательной средой, автоклавируют, а затем засевают чистой культурой, подаваемой из специального генератора. Для предотвращения инфекции в ферментере поддерживают повышенное давле- [c.76]

Работу с грибными культурами на твердых средах удобнее проводить в чашках Петри бактериальные же культуры выраш,ивают в жидких средах, в пробирках или колбах на круговых качалках (аппаратах, где периодическая аэрация и перемешивание среды достигается за счет встряхивания). [c.43]

Перемешивание культуральной среды влияет и на другие параметры скорость переноса кислорода из пузырьков газа в жидк> ю среду, а затем из среды в клетки эффективность теплопередачи точность измерения концентрации метаболитов в культуральной жидкости эффективность диспергирования добавляемых реагентов (кислот, оснований, питательных веществ и т. д.). Исходя из всего этого, можно было бы предположить, что чем интенсивнее культура перемешивается, тем лучше она растет. Однако при чрезмерном перемешивании среды в ней могут возникнуть гидромеханические эффекты, губительные для бактериальных клеток и клеток [c.355]

Ферментеры, или реакторы с мешалкой для культивирования бактерий, устроены таким образом, что обеспечивают постоянство среды. Рабочий объем ферментеров колеблется от 500 мл до тысяч литров. Обычные лабораторные ферментеры имеют рабочие объемы от 1 до 20 л. Поскольку они предназначены для того, чтобы максимально уменьшить температурный и химический концентрационный градиент в культуре, среда в них должна перемешиваться таким способом, чтобы достигалось быстрое и полное смешение всех компонентов жидкой фазы. В случае недостаточного перемешивания возникают застойные зоны, что приводит к появлению неконтролируемых локальных градиентов концентраций. Если перемешивание слабое, то популяция клеток будет сильно гетерогенной. Например, при слабом перемешивании аэробных культур контакт между кислородом воздуха и жидкой средой недостаточен, поэтому в некоторых участках ферментера могут создаваться почти анаэробные условия, что лимитирует рост культур. Если куль- [c.388]

В случае суспензионных культур проточные реакторы с полным, вытеснением используются редко. Как правило, реакторы работают в режиме, близком к режиму полного перемешивания разумеется, применительно к жидкой фазе. Тем не менее не следует считать, что в системе действительно осуществляется идеальное перемешивание, пока не проанализированы все возможные причины появления неоднородности (например, из-за пристеночного роста и т. п.). Вероятно, самым лучшим приближением к реактору с полным вытеснением был бы каскад последовательных реакторов с идеальным перемешиванием без дополнительных поступлений питательных веществ, однако длят этого число биореакторов, составляющих такой каскад, должно быть бесконечным. Неидеальный поток с полным вытеснением можно получить, лишь когда работает более шести после -довательных биореакторов. [c.430]

Суспензию клеток можно получить из каллуса, поместив его в жидкую питательную среду с автоматическим перемешиванием. Используя фермент, например пектиназу, получаем суспензионную культуру непосредственно из ткани экспланта (лист, стебель, корень и т. д.). Вначале на поверхности экспланта образуется каллусная ткань, а затем уже от нее отделяются клетки и клеточные агрегаты, в результате чего получается клеточная суспензия. [c.93]

Наиболее простой для анализа бактериальной системой является чистая культура, растущая в виде дискретно диспергированных клеток по уравнению Моно в жидкой среде известного состава, в реакторе полного смешения, в котором нет влияния стенок на перемешивание, на субстрате, являющемся единственным источником энергии и углерода. Для такой системы можно предположить несколько температурных эффектов. Среди них явно обнаруживается влияние на максимальную удельную скорость роста, сродство бактерий к лимитирующему рост субстрату, эндогенный метаболизм и основные метаболические потребности, удельные скорости отмирания и лизиса культуры. [c.102]

Зависимость величины Кв от концентрации биомассы может быть объяснена иа основе теории конгломератов микроорганизмов в виде жидких частиц , образующихся при неидеальном перемешивании культуры в ферментере [13]. [c.37]

Б обоих случаях для перемешивания культуры пробирку с засеянной жидкой средой можно слегка потрясти. [c.50]

Суспензионная культура — суспензия клеток или их агрегатов (небольших групп) во взвешенном состоянии в жидкой среде при использовании аппаратуры, обеспечивающей их аэрацию и перемешивание. [c.467]

Двухфазная система в принципе состоит из толстого слоя затвердевшей питательной среды, покрытого тонким слоем питательного бульона (рис. 9.1). Чтобы приготовить такую систему, частично заполняют сосуд горячей средой, содержащей 2—3% агара. После затвердения агарового слоя на него наливают с соблюдением правил асептики небольшое количество питательной среды, засевают ее и инкубируют. Для выращивания аэробов культуральный сосуд помещают на качалку, что обеспечивает хорошее снабжение кислородом и перемешивание среды во время инкубации. Культура развивается в жидкой части среды, но постепенно клетки диффундируют в твердую питательную среду и значительно концентрируются. Таким способом можно получить популяции с плотностью более 10" клеток/мл, причем данный метод пригоден для выращивания бактерий любого типа. [c.364]

Клеточную суспензию получают, помещая каллусную ткань в колбу с жидкой питательной средой. Эта суспензия перемешивается в колбах на качалке или в специальных сосудах с помощью роллеров разного типа. Для инициации суспензионной культуры необходимо 2—3 г свежей массы каллусной ткани на 60—100 мл жидкой питательной среды. Первичную суспензию получают на круговой качалке, имеющей скорость перемешивания 100— 120 об/мин. [c.22]

Более производительным считается комбинированный способ выращивания пленки гриба. Он включает а) получение маточных культур на зерне б) выращивание инокулята (проращивание спор) в колбах на жидкой питательной среде в течение 12—17 ч в) выращивание и накопление вегетативной культуры в ферментере с принудительной аэрацией и перемешиванием в течение [c.77]

Стадия подготовки засевной биомассы I обеспечивает подачу в производственные биореакторы необходимого количества посевного материала — активной культуры микроорганизмов, выращенной в периодически или непрерывно работающих инокуляторах. На стадии подготовки минеральной питательной среды а осуществляется растворение минеральных солей, фильтрация растворов и доведение концентраций элементов в них до заданных соотношений. В качестве минеральных источников питания используют сернокислые соли калия, магния, железа, аммофос, сульфат аммония, а также микроэлементы — соли марганца, цинка, железа и меди. Подготовка углеводородного субстрата (стадия III) включает процессы подогрева, перемешивания жидких парафинов и их дозированной подачи в производственные биореакторы. [c.14]

При использовании жидкой культуры плесневых грибов, полученных глубинным способом, в готовую культуру при тщательном перемешивании задают 40%-ный раствор формалина из расчета 2 л на I м культуральной жидкости н перекачивают ее в расходные чанки откуда она непрерывно поступает через дозатор в осахариватель. [c.98]

Скорость перехода молекулярного кислорода в раствор возрастает с увеличением поверхности раздела между газовой и жидкой фазами и с повышением парциального давления Оз в газовой фазе. Для аэрации жидких культур пользуются либо обычным воздухом, либо смесью О2, N3 и СОз- Для увеличения поверхности раздела прибегают к различным способам, таким как 1) культивирование в тонком слое 2) перемешивание жидкости путем встряхивания (прямого или кругового) 3) вращение лежапщх сосудов вокруг продольной оси 4) пропускание воздуха через жидкость под давлением с помощью газораспределителя (стеклянные фильтры, колбы Клюйвера) 5) перколяция (рис. 6.1) 6) механическое перемешивание. Для глубинной культуры аэробных микроорганизмов принудительную аэрацию с помощью газораспределите- [c.182]

Для того чтобы улучшить аэрацию жидкой культуры в пробирке, увеличивают отношение поверхности среды к объему, например уменьшая объем среды или наклоняя пробирку. Еще лучше поместить пробирки на качалку, благодаря чему получают активное перемешивание среды. Снабжение воздухом улучшается, если для закрывания пробирок используют неплотные ватные пробки, колпачки типа Morton (S ientifi Produ ts) или проницаемые для газов мембранные пробки. Хотя мембранные пробки используют довольно редко, они очень эффективны, поскольку хорошо проницаемы для обменивающихся газов и в то же время почти непроницаемы [c.382]

Г. Процесс культивирования. В течение культивирования контролируют стерильность среды и чистоту культур путем посева отбираемых проб на мясопептонный агар, а также определяют темп накопления в среде мицелия гриба и эндоконидий. Если при поверхностном культивировании первые споры появляются через 9 дней, при глубинном культивировании спорообразование происходит уже через 24 часа. Установлено, что оптимальное количество эндоконндий в жидкой среде содержится через 3 дня. При более длительном культивировании количество спор хотя и возрастает, но часть их прорастает, образуется мицелий, масса которого позднее начинает превышать массу спор, и в конечном итоге на 11-й день в культуре остаются лишь сгустки дегенерировавшего мицелия, без спор. Эндоконидии образуются на фиалидах, вырастая из каждого обрывка нити мицелия. При глубинном культивировании, сопровождающемся перемешиванием среды в чанах большого объема, образование спор начинается уже через 12 часов и заканчивается через 72 часа. [c.368]

При определении крахмала в картофеле очень важно правильно взять аналитическую пробу. Масса измельченного на терке картофеля сильно расслаивается крахмал оседает на дно, а сверху отделяется жидкая часть. Расслоение идет очень быстро, поэтому взять правильно навеску очень трудно. Центральная химическая лаборатория Госкомиссии но сортоиспытанию сельскохозяйственных культур использует для тщательного измельчения и перемешивания образцов картофеля размельчятель тканей, который дает пенистую, хорошо взбитую массу, В этот прибор загружают пропущенный через кухонную терку картофель и размельчают его в течение 3 минут. [c.292]

Потенциал размножения различных разновидностей Вас. thuringiensis проверяли при глубинном выращивании путем перемешивания со 100 мл жидкой питательной среды, выдерживания в пробирке полученной смеси в течение 48 часов при 28°С и при промывании 10 мл стерильной воды. Культуры выращивали в течение 48 часов при 28°С. Спустя сутки были взяты пробы для проверки морфологической картины и определения числа клеток на 1 мл культуральной [c.396]

Чистую культуру, находящуюся в логарифмической стадии роста, переносят в малый посевной аппарат 12 объемом 500 л с подготовленной питательной средой. Питательную среду готовят в специальном смесителе 7, снабженном рубашкой для обогрева и мешалкой. Все компоненты питательной среды поступают из соответствующих сборников /—5 через дозирующие устройства в биореактор 7, pH среды доводится до значения 5,5—5,8 аммиачной водой или известковым молоком. Одновременно в смеситель подается жидкий источник углерода (субстрат), используемый в данном производстве. Среду дополнительно обогащают автолизатом дрожжей из автолизатора 6. После тщательного перемешивания в течен 1е 20 — 30 мин готовую питательную среду перекачивают в отстойник II, а если на заводе имеет место инфициирование процесса посторонней микрофлорой, то среду предварительно стерилизуют в греющей колонне 8 острым паром и выдерживателе 9 в течение 10—15 мин. Стерильную питательную среду охлаждают в теплообменнике 10 и подают в отстойник 11. На ряде производств питательная среда отдельно не готовится, а отбирается из основного производства и в отде- [c.75]

Чистая культура высшего пищевого грнба, используемого в данном производстве, поддерживается на сусло-агаре. Для получения посевного материала смывом с 5-—7-суточных косяков засеваются колбы с жидкой питательной средой, содержащей картофельный сок. Культивирование в колбах проводится на качалке (150 об/ мин) в течение 72 ч при температуре 24 °С. Выросший и пригодный по микробиологическим показателям посевной материал передается в стерильных условиях в малый посевной аппарат — инокулятор, с предварительно простерилизованной и охлажденной средой. Выращивание ведется при непрерывном перемешивании и аэрации в течение 48 ч при температуре 22—24 °С. К этому времени образуется густое сплетение гиф, культуральная жидкость преобретает густую консистенцию. [c.177]

Клетьси для суспензионных культур получают из каллусных тканей, помещая последние в жидкие питательные среды и подвергая их перемешиванию с помощью разнообразных качалок или встряхивателей. Суспензионную культуру можно получить и из растительных тканей, однако это более трудоемьсий путь, требующий большего времени. Клетьси экспланта при этом способе должны сначала образовать первичный каллус, и лишь после попадания возникших на поверхности каллусных [c.96]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология